COPELAND, K. K. P. G.

DAVID, J. P. de L.

LEDO, A. da S.

MACHADO, C. de A.

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III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros72Indução da Calogênese em Caesalpinia pyramidalis T.Kicia Karinne Pereira Gomes Copeland1; Ana da Silva Lédo2; Caroline de Araújo Machado3; Juceni Pereira de Lima David4ResumoA catingueira possui um grande uso na medicina popular no tratamento de anemias, hepatites, infecções catarrais e diarreias. Nesse contexto, diversos procedimentos biotecnológicos vêm sendo desenvolvidos ao longo dos anos e acultura de tecidos é a que mais se destaca como ferramenta para produzir metabólitos secundários de interesse. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar diferentes concentrações de 2,4-D, combinados ou não com BAP, na indução de calogênese em Caesalpinia pyramidalis, para futura obtenção de protocolos de produção in vitro de bifl avonóides. Foram utilizados explantes nodal,internodal e disco foliar de plantas germinadas in vitro de catingueira. Estes foraminoculados em placas de Petri estéreis descartáveis (90 x 15 mm) contendo meiode cultura MS (MURASHIGE; SKOOG, 1962) suplementado com 30 g/L de sacarose, solidifi cado com 5 g/L de ágar e, acrescidos com 2,4-D (0; 2,5; 5 e 10 mg/L) e BAP (0 e 1 mg/L) combinados ou não. Na ausência e presença de BAPas culturas apresentaram um comportamento quadrático com aumento da formaçãode calos na presença de BAP até a concentração de 6,49 mg/L de 2,4-D e na ausência de BAP até 6,49 mg/L de 2,4-D com redução a partir desses valores. Ossegmentos internodal e foliar apresentaram o mesmo comportamento quadrático,sendo que a maior produção de calo em segmento internodal ocorreu nas concentrações de 2,93 mg/L e 2,62 mg/L de 2,4-D na ausência e presença deBAP, respectivamente, e para o explante foliar na presença de 1,76 mg/L e2,49 mg/L de 2,4-D na ausência e presença de BAP, respectivamente. Portanto,é necessário o uso de regulador de crescimento para indução de calos em catingueira sendo que as concentrações de 2,4-D na ausência e presença BAP 1 Química, doutoranda em Biotecnologia da Renorbio/UFBA, Salvador, BA, kiciagomes@gmail.com.2 Engenheira-agrônoma, doutora em Agronomia, pesquisadora da Embrapa Tabuleiros Costeiros, Aracaju, SE, ana.ledo@embrapa.br.3 Bióloga, mestre em Agroecossistemas, Universidade Federal de Sergipe, Aracaju, SE, camachado1@hotmail.com.4 Farmacêutica Industrial, doutora em Química Orgânica, professora da Universidade Federal da Bahia, Salvador, BA, juceni@ufba.br.III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros 73que melhor induzem calo são 5,90 mg/L e 6,49 mg/L para o segmento nodal; 2,93 mg/L e 2,62 mg/L para o segmento internodal e, 2,49 mg/L e 1,76 mg/L para o segmento foliar, respectivamente.Palavras-chave: Catingueira, organogênese, regulador de crescimento.IntroduçãoO bioma Catinga ocupa cerca de 11%  (844.453 km2) do território nacional, sendo a região nordeste e o norte de Minas Gerais sua maior concentração (MMA,2013). A Poincianella pyramidalis, conhecida popularmente como catingueira, é uma das espécies Catinga mais representativas e bem distribuídas, ocorrendo nos estados do Piauí, Ceará, Rio Grande do Norte, Paraíba, Pernambuco, Alagoas,Sergipe e Bahia (MAIA, 2004).A catingueira possui um grande uso na medicina popular no tratamento de anemias, hepatites, infecções catarrais e diarreias (MAIA, 2004; SILVA et al.,2009). Esse uso está associado aos compostos produzidos pela mesma como: bifl avonóides, triterpenos, fl avonóides, e fenilpropanóides (BAHIA et al., 2005).Nesse contexto, diversos procedimentos biotecnológicos vêm sendo desenvolvidosao longo dos anos e a cultura de tecidos é a que mais se destaca como ferramentapara produzir metabólitos secundários de interesse. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar diferentes concentrações de 2,4-D, combinados ou não comBAP, na indução de calogênese em Caesalpinia pyramidalis, para futura obtençãode protocolos de produção in vitro de bifl avonóides.Material e MétodosForam utilizados explantes nodal, internodal e disco foliar de Caesalpinia pyramidalis T., obtidos de plântulas germinadas in vitro, coletadas do município de Poço Redondo, SE, e cultivadas no laboratório de cultura de tecidos de plantasna Embrapa Tabuleiros Costeiros, Aracaju, SE.Os explantes, após excisão, foram inoculados em placas de Petri estéreis descartáveis (90 x 15 mm) contendo meio de cultura MS (MURASHIGE; SKOOG,1962) suplementado com 30 g/L de sacarose, solidifi cado com 5 g/L de ágar e, acrescidos com 2,4-D (0; 2,5; 5 e 10 mg/L) e BAP (0 e 1 mg/L) combinados ou III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros74não. Em seguida as culturas foram mantida no escuro em sala de crescimento com temperatura de 25 ± 2 °C.  Aos 30 dias após a inoculação foi avaliada a porcentagem de explantes com formação de calo.O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial3 x 4 x 2 (3 segmentos, 4 concentrações de 2,4-D combinadas com 2 de BAP) 5 repetições com 4 explantes cada repetição. Os dados foram submetidos àanálise de variância, e quando signifi cativo foram estimadas curvas de regressão,utilizando-se o software SISVAR (FERREIRA, 2011).Resultados e DiscussãoHouve diferença signifi cativa da presença de 2,4 e BAP na porcentagem de segmentos nodais com calo. A indução dos calos em C. pyramidalis ocorreu entre7 e 21 dias após a inoculação. Não houve formação de calos na ausência de reguladores de crescimento (Figura 1).Figura 1. Presença de calos em segmento nodal de P. pyramidalis emfunção da concentração de 2,4-D na presença e ausência de BAP.Na ausência e presença de BAP as culturas apresentaram um comportamento quadrático com aumento da formação de calos na presença de BAP até a concentração de 6,49 mg/L de 2,4-D e na ausência de BAP até 5,90 mg/L de 2,4-D com redução a partir desses valores. O desenvolvimento de calo pode serindependente de auxinas e citocininas, dependente de auxinas, dependente decitocininas ou dependente de ambas (JAIN et al., 1995). No caso da P. pyramidalis,a calogênese foi dependente da auxina 2,4-D combinada ou não com BAP.III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros 75Jardim et al. (2010) trabalhando com explantes de pau-rosa, obtiveram um aumento signifi cativo na formação de calo ao serem submetidos a doses isoladasde auxinas e a combinação destas com citocininas. Observaram, ainda que, o uso de auxinas e citocininas foram preponderantes para a formação de calo nos explantes de pau-rosa. Segundo Santos et al. (2003) a relação intermediária entre os dois reguladores em questão, induz o calo.Conforme apresentado nas Figuras 2 e 3, os segmentos internodal e foliar apresentaram o mesmo comportamento quadrático, sendo que a maior produçãode calo em segmento internodal ocorreu nas concentrações de 2,93 mg/L e 2,62 mg/L de 2,4-D na ausência e presença de BAP, respectivamente, e para ofoliar de 1,76 mg/L e 2,49 mg/L de 2,4-D na ausência e presença de BAP, respectivamente.Figura 2. Presença de calos em segmento internodal de P. pyramidalis em função da concentração de 2,4-D na presença e ausência de BAP.III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros76Figura 3. Presença de calos em segmento foliar de P. pyramidalis em função da concentração de 2,4-D na presença e ausência de BAP.Conclusões- É necessário o uso de reguladores de crescimento para indução de calos em C. pyramidalis;- As concentrações de 2,4-D na ausência e presença BAP que melhor induzem aformação de calo são 5,90 mg/L e 6,49 mg/L para o segmento nodal; 2,93 mg/Le 2,62 mg/L para o segmento internodal e, 2,49 mg/L e 1,76 mg/L para o segmento foliar, respectivamente.ReferênciasBAHIA, M. V.; SANTOS, J. B dos; DAVID, J. P.; DAVID, J. M. Bifl avonoids andother Phenolics from Caesalpinia pyramidalis (Fabaceae). Journal of the BrazilianChemical Society, São Paulo, v. 16, n. 6B, p. 1402-1405, 2005.JAIN, S. M.; GUPTA, P. K.; NEWMAN, R. J. Somatic embryogenesis in wood plants. Dordrecht: Kluwer Academic Publishers, v. 2, 1995.JARDIM, L. S.; SAMPAIO, P. T. B.; COSTA, S. S.; GONÇALVES, C.Q. B.; BRANDÃO, H. L. M. Efeito de diferentes reguladores de crescimento na regeneração in vitro de pau-rosa (Aniba rosaeodora Ducke). Acta Amazonica, Manaus, v. 40, p. 275–280, 2010.III Seminário de Iniciação Científi ca e Pós-Graduação da Embrapa Tabuleiros Costeiros 77MAIA, G. N. Caatinga: arvores e arbustos e suas utilidades. São Paulo: Leitura &Arte, 2004. p. 413, MINISTÉRIO DO MEIO AMBIENTE. Biomas: caatinga. [2012]. Disponível em <http://www.mma.gov.br/biomas/caatinga/item/191>. Acesso em: 26 de agosto de 2013.MURASHIGE, T.; SKOOG, F. A. A revised medium for rapid growth and bioassayswith tabaco tissue cultures. Physiologia Plantarum, Copenhagen, v. 15, n. 3,p. 473-497, 1962.SANTOS, C.G.; PAIVA, R.; PAIVA, P.D.O.; PAIVA, E. Induction and biochemicalanalysis of callus obtained from leaf segments of Coffea arábica L., Cultivar Rubi.Ver. Ciência Agrotécnica, Lavras, v. 27, n. 3, p. 571–577, 2003.SILVA, L. B.; SANTOS, F. de A. R.; GASSON, P.; CUTLER, D. Anatomia e densidade básica da madeira de Caesalpinia pyramidalis Tul. (Fabacea), espécie endêmica da caatinga do Nordeste do Brasil. Acta Botânica Brasileira, São Paulo, v. 23, n. 2, p. 436-445, abr./jun. 2009.WERNER, E. T.; PESSOTTI, K. V.; LOPES, F. P.; ROGER, J. A. Controle da calogênese do Pau-Brasil in vitro. Revista Árvore, Viçosa, MG, v. 33, n. 6,p. 987-996, 2009.

Indução da calogênese em Caesalpinia pyramidalis T.

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