AZEVEDO, V. C. R.

CIAMPI, A. Y.

GAVIÃO, C. de F. C.

MACHADO, J. B.

SOUZA, V. A. B. de

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DESENVOLVIMENTO DE MARCADORESMICROSSATELITES PARA BABAf;U(Orbignya phalerata Mart).Camila de Fatima Coelho Gavhio\ Vania Cristina Renno Azevedo!, JeffersonBarros Machado!, Valdomiro Aurelio Barbosa de Souza, Ana Yamaguishi Ciampi!1Embrapa Recursos Geneticos e Biotecnologia, camila@cenargen.embrapa.br, aciampi@cenargen.embrapa.br, azevedovcr@cenragen.embrapa.br; 2 Embrapa Meio Norte,Orbigf!)'a phalerata Mart.(baba<;u) pertencente a familia das palmciras Arecaceae e uma das mais impor-tantes representantes das palmeiras brasileiras, com alto potencial energetico para produ<;ao de biodisel. NoBrasil, encontram-se espalhados ao sul da bacia amaz6nica, onde a floresta Umida cede lugar a vegeta<;ao tipicados cerrados. Sao os Estados do Maranhao, Piau! e Tocantins que concentram as maiores extensoes de matasonde predominam os baba<;us.0 uso da biotecnologia pode ser de grande valia, pela possibilidade de aumentoda produtividade e qualidade dos seus produtos. Ate 0 momento, poucas sao as informa<;oes a respeito demarcadores moleculares, genes e regioes cromoss6micas que controlam caracteres de imporcincia econ6micaneste genero. No que se ref ere a estudos geneticos de popula<;:oes naturais, os marcadores moleculares repre-sentam uma ferramenta poderosa na quantifica<;:ao da diversidade genetica. Dentre os diversos marcadoresmoleculares, os microssatelites-SSR destacam-se nos estudos de caracteriza<;ao da estrutura genetica de popu-la<;oesnaturais, por apresentarem 0 maior conteudo informativo por loco genico entre as classes de marcado-res moleculares atualmente utilizadas. Este trabalho tem como objetivo 0 desenvolvimento de microssatelitespara 0. phalerata visando a realiza<;:aode estudos de caracteriza<;ao e diversidade genetica da especie. Cerca de50fLgde DNA genomico foi digerido com a enzima de restri<;ao MSE I. 0 processo de enriquecimento dabiblioteca foi realizada com a hibridiza<;ao do complexo bio-oligo (TC14) e posteriormente sua recupera<;aocom auxilio de contas magneticas ligadas a estreptavidina. Os fragmentos recuperados contendo poli AG /TC foram amplificados e ligados ao vetor pGEM-T e transformados em E. coli, cepa XL i-Blue. As celulastransformadas foram multiplicadas meio de cultura LB-ampicilina, contendo X-Gal e IPTG. Das 672 co16niaspositivas, foram seqiienciados 288 produtos de PCR do DNA plamidial, purificadas por ExoSap, os quaisforam submetidos em seqiienciador automatico ABI 3700. As 288 seqiiencias obtidas foram processadas eanalisadas utilizando-se 0 programa Staden Package, com adapta<;oes. Foram encontrados 158 microssateliteslongos (com mais de seis repeti<;oes), sendo que 58 evidenciaram regioes, para desenho de pares de primers.Estes vem sendo sintetizados para posterior otimiza<;ao e caracteriza<;:ao em 24 acessos de O. phalerata. EssesSSRs abrem uma nova perspectiva para estudos de diversidade genetica debaba<;:u e de especies silvestres afins,bem como para analise de germoplasma de cole<;oes conservados a campo.

Desenvolvimento de marcadores microssatélites para babaçu (Orbignya phalerata Mart).

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