BASTOS, D. C.

PINTO, M. dos S. T.

RIBEIRO, J. M.

TEIXEIRA, M. T.

TEIXEIRA, S. L.

RCAAP - Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal

Hipoclorito de sódio para esterilização química de meios nutritivos e frascos de cultivo.

Este trabalho teve como objetivo a determinação da quantidade de hipoclorito de sódio, adicionada ao meio de cultura e à água de enxágue das vidrarias, responsável por um menor número de culturas contaminada

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HIPOCLORITO DE SÓDIO PARA ESTERILIZAÇÃO QUÍMICA DE MEIOS NUTRITIVOS E FRASCOS DE CULTIVOJuliana Martins Ribeiro1, Silvio Lopes Teixeira2 , Márcia Torres Teixeira3, Márcio Dos Santos Teixeira Pinto4 E Débora Costa Bastos51 Pesquisadora Biotecnologia Vegetal, Embrapa Semiárido, Petrolina  - PE, e-mail:juliana.ribeiro@cpatsa.embrapa.br2 Professor aposentado da Universidade Federal de Viçosa e Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, Campos dos Goytacazes – RJ, e-mail: teixeira70@yahoo.com.br3 Bolsista de apoio técnico da Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, Campos dos Goytacazes – RJ4 Bolsista de Desenvolvimento Científico Regional CNPq/FACEPE, e-mail: marciostp@yahoo.com.br5 Pesquisadora Fitotecnia, Embrapa Semiárido, Petrolina – PE, e-mail: débora@cpatsa.embrapa.brEmbora seja uma tecnologia com uma série de vantagens quanto ao produto final obtido, a técnica de cultivo in vitro de plantas ainda é considerada dispendiosa. A substituição da técnica de autoclavagem por  outra de menor  custo corresponde a uma alternativa importante para tornar  uma  biofábrica  mais  econômica.  Sendo  assim,  este  trabalho  teve  como  objetivo  a determinação da quantidade de hipoclorito de sódio, adicionada ao meio de cultura e à água de enxágüe das vidrarias, responsável por um menor número de culturas contaminadas. O material vegetal utilizado como fonte explantes foi proveniente de culturas-estoque de Pfaffia glomerata (Spreng.) Pedersen. As concentrações de hipoclorito de sódio adicionadas à água de enxágüe das vidrarias e ao meio nutritivo foram (p/v): A) controle sem NaClO; B) 0.001%; C) 0.004%; D) 0.007%; E) 0.010%. Os tubos de ensaio foram enxaguados nas soluções citadas e, logo após, preenchidos com o meio nutritivo contendo as diferentes concentrações de hipoclorito de sódio testadas.  O experimento foi  conduzido em delineamento inteiramente casualizado,  esquema fatorial 5x5 (cinco concentrações de hipoclorito de sódio adicionadas ao meio de cultura x cinco concentrações de hipoclorito de sódio adicionados à água de enxágüe das vidrarias), com 5 repetições e a unidade experimental  composta de quatro tubos de ensaio.   Foi realizada a análise  de  variância  e  as  médias  foram  comparadas  pelo  Teste  de  Tukey  com  5%  de probabilidade.  Decorrido  um  mês  de  cultivo,  foram  tomados  dados  quanto  ao  número  de culturas contaminadas, bem como o local das contaminações (base do explante, superfície do meio ou interior do meio). A esterilização completa do meio nutritivo foi observada apenas nos tratamentos  que  foram  adicionados  de  concentrações  de  hipoclorito  de  sódio  iguais  ou superiores a 0,004%, independente da concentração de hipoclorito de sódio adicionada á água de enxágüe das vidrarias.  Apenas os tratamentos controle apresentaram-se completamente contaminados,  tanto  na  superfície  quanto  no  interior  do  meio.  A  contaminação  nos  meios esterilizados quimicamente ocorreu apenas na superfície do meio, indicando ser esta oriunda do ar circulante, e não da ineficiência do processo de esterilização química do meio nutritivo com o  hipoclorito  de  sódio.  Conclui-se  que  o  processo  de  esterilização  química  de  meios nutritivos  pode  ser  utilizado  em  substituição  a  autoclavagem  e  que  a  concentração  de hipoclorito de sódio adicionada ao meio de cultura pode variar em função das condições de limpeza do ambiente do laboratório.Agradecimentos: Os autores agradecem à Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro,  a  Fundação  de  Amparo  a  Pesquisa  do  Estado  do  Rio  de  Janeiro  e  à  Embrapa Semiárido pelo suporte financeiro.

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/921506/1/JulianaABCTP201101.pdf

Hipoclorito de sódio para esterilização química de meios nutritivos e frascos de cultivo.

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