IRITANI, C.

RIBASKI, J.

RIBASKI, N. G.

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Embriogênese somática de Cedrela fissilis Vell: alternativa para gerar plantas resistentes ao ataque da broca-do-cedro (Hypsipyla grandella).

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1-016   Embriogênese somática de Cedrela fissilis Vell.: alternativa para gerar plantas resistentes ao ataque da broca-do-cedro (Hypsipyla grandella)  Nayara Guetten RIBASKI 1; Cecilia IRITANI 2; Jorge RIBASKI 3  1  UFPR, Graduanda em Eng. Florestal, nayribaski@hotmail.com 2 UFPR - Centro Politécnico, Edifício do Setor de Ciências Biológicas, Jardim das Américas,   Departamento de Botânica, CEP 81531-990, Cx. Postal 19031   3 Embrapa Florestas, Estrada da Ribeira km 111, CEP 83411-000, Colombo, PR.   INTRODUÇÃO  O cedro (Cedrela fissilis Vell.), regionalmente conhecido como cedro-rosa, ocorre nas florestas semidecíduas e pluvial atlântica da região sul do Brasil, e parte de Minas Gerais (Lorenzi, 2000). Ocorre também em quase todos os outros países da América do Sul e ainda na Costa Rica e Panamá (Carvalho, 1994). A Cedrela fissilis, entre as várias espécies do gênero, merece maior atenção da pesquisa devido às potencialidades silviculturais que possui (Styles, 1973). Sua madeira é de reconhecida importância econômica e histórica. O cedro tem sido exaustivamente explorado e usado desde a pré-história (Lisboa, 1999).   Segundo Carvalho (1994), dentre as madeiras leves somente é superada pela madeira do pinheiro-do-paraná (Araucaria angustifolia). A madeira é largamente empregada em compensados, estruturas e obras de talha, modelos e molduras, esquadrias, móveis em geral, marcenaria, construção civil, naval e aeronáutica. A árvore é muito utilizada para paisagismo, sendo recomendada para a arborização de praças públicas e, ainda, para a recuperação de ecossistemas degradados e para reposição de matas ciliares (Carvalho, 1994 e Lorenzi, 2000).  Todavia, a silvicultura dessa espécie é problemática devido ao ataque da broca Hypsipyla grandella, que destrói a gema apical das plantas jovens, impedindo o seu desenvolvimento, transformando as árvores em arbustos e ocasionando alta mortalidade das mesmas. As gemas florais dos indivíduos adultos também são destruídas provocando a perda total da frutificação. A estratégia evolutiva adotada pela espécie para fugir do ataque da broca-do-cedro esta relacionada com a baixa densidade de árvores por hectare (Castilho et al, 1997a). Por apresentar maior produtividade sob condições de baixa intensidade de luz o cedro é adequado para plantios mistos, na forma de sistemas agroflorestais (Inoue, 1977). Vila et al. (1982), sugere associá-lo com cinamomo (Melia azedarach), como forma de reduzir a incidência da broca-do-cedro.  A significativa variação genética entre progênies indica, também, a possibilidade de melhoramento genético, dentro de procedências superiores (Carvalho, 1994). Firkowski (1990), avaliando um teste de procedências, encontrou diferenças com relação a resistência ao ataque da Hypsipyla nos frutos. Também Inoue (1973), constatou variação de comportamento entre espécies e procedências de cedro, dentre os vários parâmetros analisados: altura, danos pela geada e o ataque da broca. Diante do exposto e pela escassez de estudos sobre a micropropagação da espécie, este trabalho tem por objetivo estudar a embriogênese somática, a partir de embriões zigóticos imaturos. Segundo Cid (2001), a cultura in vitro de plantas, é uma técnica que não apenas apresenta importância na pesquisa científica básica mas também na pesquisa aplicada, na área florestal e agrícola. A embriogênese, apesar de ser uma técnica mais complexa, permite uma multiplicação mais rápida, quando comparadas às demais técnicas de propagação assexuada como estaquia e enxertia (Kalil, 1998), fornecendo, assim, uma alternativa para produção de plântulas mais resistentes para reflorestamento, em larga escala, melhoramento genético e conservação de germoplasma (Castilho et al, 1997b).    MATERIAIS E METÓDOS  Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Micropropagação no Depto. de Botânica do Setor de Ciências Biológicas da UFPR. Os frutos imaturos foram coletados de fevereiro a maio de 2001, nos municípios de Curitiba e São José dos Pinhais, de plantas sadias e com bom desenvolvimento vegetativo. As sementes antes da inoculação ficaram em solução de hipoclorito de sódio (10-12% de cloro livre) 8% por 10 minutos. Para os cultivos foram utilizados os meios básicos MS e MS/2 contendo adicionalmente 2 g .L -1 de caseína enzimática hidrolizada e 0,15 µM de glutamina e concentrações de 4,54; 9,08; 13,62; 18,16 e 22,7 µM de 2,4-D. As culturas permaneceram no escuro por cinco meses em sala de incubação à temperatura de 25 ± 2 ºC. As avaliações foram feitas pelos parâmetros sobrevivência, formação de massas e calos embriogênicos e desenvolvimento de embriões somáticos. As formações resultantes dos tratamentos dados foram registrados através de fotomacrografias utilizando-se fotomicróscopio estereoscópico do Laboratório de Botânica Estrutural do Depto. de Botânica do Setor de Ciências Biológicas da UFPR.  RESULTADOS E DISCUSSÃO  As respostas dos embriões zigóticos aos tratamentos com o 2,4-D ocorreram na região cotiledonar com a formação de embriões somáticos, massas embriogênicas e calos compactos de pequenas dimensões. Sepel et al (1996), trabalhando com esse mesmo regulador de crescimento, não obtiveram sucesso na propagação in vitro de Cedrela fissilis.  O meio MS com 4,54 µM de 2,4-D, foi o único tratamento que proporcionou o desenvolvimento de embriões somáticos (20%), tendo proporcionado também a formação de calos compactos e massas embriogênicas, 50% e 80% respectivamente. Nas demais concentrações de 2,4-D, 43% a 76% dos embriões formaram massas embriogênicas, 16% a 33% formaram calos compactos. Em muitos dos casos observou-se a formação simultânea de calos compactos e massas embriogênicas e em 40% dos mesmos ainda pôde-se observar o desenvolvimento de embriões mal formados. Constatou-se que o meio MS favoreceu ligeiramente as respostas dos explantes quando comparado ao meio MS/2.  CONCLUSÕES  Com os resultados obtidos permite-se concluir que a embriogênese somática do cedro (Cedrela fissilis Vell.), a partir de embriões zigóticos imaturos, é viável. Essa tecnologia assume importância em programas de seleção e manutenção de germoplasmas, bem como para a produção em larga escala, de mudas que sejam resistentes à Hypsipyla, havendo porém a necessidade de estudos mais amplos com relação aos efeitos das concentrações de 2,4-D, metodologia para respostas mais rápidas, efeitos de outros meios básicos e concentrações de glutamina, caseína hidrolizada e sacarose.   REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS  CARVALHO, P.E.R. Espécies florestais brasileiras: recomendações silviculturais, potencialidades e uso da madeira. Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária, Centro Nacional de Pesquisa de Florestas, Colombo: EMBRAPA - CNPF; Brasília : EMBRAPA - SPI. 1 ed.. 639 p. 1994.  CASTILHO, C.V.; CID, E.G.D.; MATOS, J.Z.; VIANA, A.M. Cultivo in vitro de Cedrella spp. (Meliaceae). CONGRESSO BRASILEIRO DE FISIOLOGIA VEGETAL, 6., Belém, PA, 1997. Anais... Belém, 1997a.  CASTILHO, C.V.; CID, E.G.D.; MATOS, J.Z.; VIANA, A.M. Cultivo in vitro de Cedrella fissilis (Meliaceae): Efeito do Thidiazuron (TDZ) na indução de Ramos. II ENCONTRO BRASILEIRO DE BIOTECNOLOGIA VEGETAL, 2., Gramado, RS, 24 e 28 de novembro 1997. Anais...Gramado, 1997b.  CID, L.P.B. A propagação in vitro de plantas. O que é isso? Biotecnologia Ciência & Desenvolvimento, São Paulo, ano III, n.19, p. 16-21, março/abril de 2001.  FIRKOWSKI, C. Avaliação da variação genética e fenótipica entre procedências e progênies de Cedrela fissilis. Floresta, Curitiba, v.20, n.1/2, p.3, 1990.  INOUE, M.T.   Ensaio de procedência de Cedrela em Santo Antônio da Platina, PR.  Floresta, Curitiba, v. 4, n.2, p. 49-57, 1973.  INOUE, M.T. A auto-ecologia do gênero Cedrela: efeitos na fisiologia do crescimento no estágio juvenil em função da intensidade luminosa. Floresta, Curitiba, v. 7, n.2, p. 58- 61, 1977.  KALIL, A.N.F.; GRAÇA, M.E.C.; GRIGOLETTI, A.J. Micropropagação do Mogno: Desinfestação e Germinação.  Colombo:EMBRAPA-CNPF, 1998. 3 p. (EMBRAPA-CNPF. Pesquisa em Andamento, 65).  LISBOA, P.; COIROLO, A.D. A prova da antigüidade dos povos do Tapajós: a arte sacra e o cedro. Ciência Hoje n. 119, 1999. Disponível em < www.contandohistoria.pro.br/hbcol >.  LORENZI, H.   Árvores Brasileiras: manual de identificação e cultivo de plantas arbóreas nativas do Brasil. Nova Odessa- SP: Instituto Plantarum, v.1, 3 ed. 368 p. 2000.  SEPEL, L.; SILVEIRA, L.R.M.; CERVI, L.G.; KIRST, M.; BISOGNIN, E.; SANTOS, F.E.M. Programa de cultivo in vitro de essências florestais nativas: canafístula (Pelthorum dubium), cedro-branco (Cedrella fissilis), e louro-pardo (Cordia tricoma). In: REUNIÃO ESTADUAL DE BIOTECNOLOGIA VEGETAL, 9., Porto Alegre, RS., 1986. Anais... Porto Alegre, 1996.    STYTES, B.T.   Meliaceae. Grijpma, Pieter, comp. Bibliografia selectivas sobre Meliaceaes, Turrialba, IICA/CIDIA, 1973  VILA, W.M.; TEIXEIRA, E.P.; GARRIDO, M.A.; ROSA, P.R.F. da; SOUZA, W.J.M. de; GARRIDO, L.M. do A..G.   Ocorrência de Hypsipyla sp. (Lepidoptera, Pyralidae) em ensaios de consorção de Meliaceae. Silvicultura em São Paulo. v. 16a, parte 2, p. 1209-1218, 1982. 

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/307606/1/1016embriogenese.pdf

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