O fungo Mycosphaerella musicola Leach é o agente causal da Sigatoka-amarela em bananeira. Essa doença é reduz da área foliar verde da planta, refletindo em menor produtividade. O objetivo do trabalho foi iniciar uma coleção de isolados de M. musicola coletados no Estado da Bahia. As amostras foram coletadas nas principais microrregiões produtoras de banana, a saber: Bom Jesus da Lapa ( Bom Jesus da Lapa), Ilhéus-Itabuna ( Presidente Tancredo Neves, Wenceslau Guimarães, Barro Preto, Gandu e Teolândia), Valença ( Morro de São Paulo) e Vitória da Conquista (Morro de São Paulo). A partir de 141 amostras coletadas consegui-se isolar e preservar 56 isolados (39,72%) em duplicata nos métodos de Castellani, BDA, BDA+Glicerol, Tiras de papel e Esferas de vidro. A primeira micoteca de Mycosphaerella musicola Leach do Estado da Bahia está sendo construída

AMORIM, E. P.

ANDRADE, W.

FERREIRA, C. F.

HADDAD, F.

PEIXOUTO, Y. S.

ROQUE, R. L.

RCAAP - Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal

Construção da primeira micoteca de Mycosphaerella Musicola Leach do Estado da Bahia.

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CONSTRUÇÃO  DA  PRIMEIRA  MICOTECA  DE  Mycosphaerella  musicola Leach  DO ESTADO DA BAHIA.Yslai Silva Peixouto1, Wilma Brandão de Andrade2, Rafaella de Lima Roque2, Cláudia Fortes Ferreira3, Fernando Haddad3, Edson Perito Amorim3 1 Bióloga, estudante de pós-graduação, Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, yslaipeixouto@hotmail.com, rafaella_roque@hotmail.com 2 Graduanda em Biologia, Universidade Federal do Recôncavo da Bahia, wilma_bio@hotmail.com 3Eng. Agr., pesquisador Embrapa Mandioca e Fruticultura, claudiaf@cnpmf.embrapa.br, fernando@cnpmf.embrapa.br, edson@cnpmf.embrapa.br .Resumo:  O  fungo  Mycosphaerella  musicola Leach  é  o  agente  causal  da  Sigatoka-amarela  em bananeira.  Essa doença é reduz da área foliar verde da planta, refletindo em menor produtividade. O objetivo do trabalho foi iniciar uma coleção de isolados de M. musicola coletados no Estado da Bahia. As amostras foram coletadas nas principais microrregiões produtoras de banana, a saber: Bom Jesus da Lapa ( Bom Jesus da Lapa), Ilhéus-Itabuna ( Presidente Tancredo Neves, Wenceslau Guimarães, Barro Preto, Gandu e Teolândia), Valença ( Morro de São Paulo) e Vitória da Conquista (Morro de São Paulo). A partir de 141 amostras coletadas consegui-se isolar e preservar 56 isolados (39,72%) em duplicata  nos  métodos de  Castellani,  BDA,  BDA+Glicerol,  Tiras  de  papel  e  Esferas  de  vidro.  A primeira micoteca de Mycosphaerella musicola Leach do Estado da Bahia está sendo construída. Palavras-chave: Mycosphaerella musicola Leach, micoteca, Sigatoka-amarelaIntroduçãoO fungo  ascomyceto,  Mycosphaerella  musicola  Leach  (anamorfa:  Peudocercospora  musae Zimm.), agente causal da Sigatoka-amarela em bananeira; também conhecida como Cercosporiose da bananeira,  foi  inicialmente detectada na ilha de Java (Indonésia) por volta de 1902.  Esta  doença ganhou maior importância após enormes prejuízos causados  no distrito de Sigatoka, nas Ilhas Fiji em 1913. No Brasil, a Sigatoka-amarela foi constatada, pela primeira vez, no Estado do Amazonas, em 1944, estendendo-se posteriormente por todos os estados brasileiros. O fungo M. musicola encontra-se disseminado  em  todas  as  regiões  produtoras  de  banana  do  Brasil  e  do  mundo,  provocando consideráveis prejuízos na produção dos frutos (FOURÈ, 1994). Entretanto, a doença apresenta maior relevância nas regiões ou microrregiões de clima úmido, com alta pluviosidade e temperaturas em torno de 25 °C. O principal sintoma dessa doença redução da área foliar verde da bananeira, refletindo em menor número de frutos por cacho, menor número de pencas, menor tamanho de fruto, maturação precoce dos frutos no campo ou em pós-colheita (CORDEIRO & MATOS, 2005).  O objetivo do trabalho foi iniciar uma coleção a partir de isolados coletados em diferentes locais e regiões produtoras de  banana,  dando  início  à  criação  da  primeira  micoteca  de  Mycosphaerella  musicola Leach  do Nordeste do país.Material e MétodosAs amostras foram coletadas nas principais microrregiões produtoras de banana da Bahia, a citar:  Bom  Jesus  da  Lapa  (  Bom  Jesus  da  Lapa),  Ilhéus-Itabuna  (  Presidente  Tancredo  Neves, Wenceslau Guimarães, Barro Preto, Gandu e Teolândia), Valença ( Morro de São Paulo) e Vitória da Conquista (Morro de São Paulo). Cada isolado coletado teve a sua informação georeferenciada (GPS – Global Positioning System) em cadernetas apropriadas. A princípio, foram feitas coletas em quatro microrregiões, oito municípios, três fazendas em cada município e coletados três amostras em cada propriedade.As folhas coletadas foram lavadas em água corrente, em seguida mantidas em câmaras úmidas por 48 horas, seguido de verificação de esporulação do patógeno com auxilio de uma lupa. Os esporos de  M.  musicola foram retirados  cuidadosamente  das  lesões  e  transferidos  para  lâminas  de  vidro contendo  blocos  de  ágar-água,  para  posterior  transferência  dos  conídios  para  meio  V8.  Foram colocados mais de um conídio por placa e depois os mesmos transferidos individualmente para placas com meio V8 e espalhados por toda placa. Após 15 dias foi possível visualizar as colônias compactas de  coloração  acinzentada,  crescendo  no  meio  de  cultura,  podendo  dar  início  aos  métodos  de preservação que foram feitos em duplicata.Para a preservação em Castellani foi feito o armazenamento de porções de micélio do fungo em microtubos com 1 mL de água destilada e autoclavada. Os microtubos Castellani foram devidamente identificados e armazenados em temperatura ambiente longe da luz solar direta.Para a preservação em microtubos com meio BDA (Batata-dextrose-ágar), com o auxilio de um estilete  de  ponta  fina,  o  micélio  do  fungo  foi  acondicionado  no  meio  BDA  que  se  encontrava levemente inclinado. Foram feitos quatro microtubos para cada isolado. Em dois destes, metade do volume foi completado com glicerol, constituindo-se o terceiro método de preservação BDA+glicerol.A preservação em tiras de papel com sílica gel foi  feita vertendo-se leite desnatado (10%) estéril  nas  placas  após  a  incubação do fungo,  visando preparar  uma suspensão de inoculo com a raspagem da placa. Em seguida, foram adicionadas tiras de papel filtro dentro das placas de Petri para que ficassem embebidas com a suspensão de leite com o fungo; que foram colocadas para secar na tampa da placa por cerca de 30 minutos. Os tubos foram preenchidos até ¾ da sua capacidade com sílica gel com indicador de umidade de granulometria de 4 a 8 mm de diâmetro. Na superfície da sílica gel foi colocado um disco de papel filtro de diâmetro igual ao do frasco para receber as tiras de papel após secas e em seguida foram armazenados a 4 ºC.O ultimo método realizado foi o método das esferas de vidro (miçangas), onde após o período de incubação foi vertido leite desnatado (10%) estéril, preparando assim uma suspensão do inoculo com a raspagem da placa. Em seguida, foram adicionadas as miçangas e misturadas à suspensão e posteriormente acondicionadas na tampa das placas para secarem.  Posteriormente as miçangas foram colocadas nos microtubos e armazenados a 4 ºC.Resultados e DiscussãoAs amostras foram coletadas em oito municípios de cinco microrregiões produtoras de banana no Estado da Bahia conforme a Tabela 1. O Estado da Bahia foi considerado na safra 2009/2010 o maior produtor de banana do Brasil com 1.015.505 toneladas, sendo o principal produtor do Estado o município  Bom Jesus  da  Lapa  com uma  produção  de  119.800  toneladas,  seguido  de  Wenceslau Guimarães com 114.000 toneladas, Barra do Choça com 50.400 toneladas, Ibirapitanga  com 36.400 toneladas, Ibirataia com 32.500 toneladas, Presidente Tancredo Neves apresentando 24.000 toneladas (SEAGRI, 2012).Foram coletados 141 amostras nos oito municípios. Destes foi possível isolar e preservar 56 isolados (39,72%) de Mycosphaerella musicola. Em geral, a obtenção de cultura pura desse fungo não é fácil,  devido o mesmo apresentar crescimento lento e baixa esporulação em substratos artificiais (DANTAS, 1948).Neste sentido, a obtenção de condições ótimas para o crescimento e reprodução do fungo em meios artificiais constitui-se um pré-requisito importante, facilitando a realização de vários estudos relacionados com a biologia, genética e bioquímica do fungo, de modo a fornecer subsídios básicos para o entendimento da relação patógeno-hospedeiro como, também, para produção de conídios em quantidade suficiente para inoculação de plantas visando à seleção de genótipos resistentes a doença (ROSA & MENEZES, 2001).Tabela  1: Municípios  dentro  das  cinco  principais  microrregiões  produtoras  de  banana  no  Estado  da  Bahia  onde  foram coletados os isolados.Os 56 isolados foram preservados nos cinco métodos diferentes (Figura 1) a citar: Castellani, BDA, BDA+Glicerol, Tiras de papel, Esferas de vidro (miçangas). ConclusãoEstá  sendo  possível  dar  início  à  construção  da  primeira  micoteca  de  M.  musicola do  Nordeste brasileiro com as metodologias de preservação empregadas, a citar:  Castellani, BDA, BDA + glicerol, tiras de papel com sílica gel e esferas de vidro.Referências BibliográficasCORDEIRO, Z.J.M; MATOS, A.P. Expressão da Resistência de Variedades de Banana à Sigatoka-Amarela. Fitopatologia Brasileira v. 30, p. 532-534. 2005.DANTAS, B. A ocorrência da “ Cercosporiose” da bananeira no Brasil,  Cercospora musae Zimm. Boletim Técnico do Instituto Agronômico do Norte 14:1-29. 1948FOURÉ,  E.  Leaf  spot  disease  of  Banana  and  Plantain  caused  by  Mycosphaerella  musicola and Mycosphaerella  fijiensis.  In:  CONFERENCE  OF  THE  INTERNATIONAL  MUSA  TESTING PROGRAM HELD AT FHIA, Honduras. Proceedings…Montpellier: INIBAP p.37-46, 1994.ROSA,  R.C.T.;  MENEZES,  M.  Caracterização  patogênica,  fisiológica  e  morfológica  de Pseudocercospora musae. Fitopatologia Brasileira v. 26, p. 141-147. 2001. Microrregiões MunicípiosIsolados coletados por MunicípioIsolados preservados por MunicípiosBom Jesus da Lapa Bom Jesus da Lapa 18 14Ilhéus-Itabuna Barro Preto 40 9Ilhéus-Itabuna Gandu 3 2Ilhéus-Itabuna Tancredo Neves 13 8Ilhéus-Itabuna Teolândia 1 1Ilhéus-Itabuna Wenceslau Guimarães 3 1Valença Morro de São Paulo 3 1Vitória da Conquista Barra do Choça 60 20TOTAL 141 56AFigura 1: Métodos de preservação do fungo M. musicola, a citar: Castellani (A), BDA (B), BDA+Glicerol (C), Tiras de papel com sílica gel (D), Esferas de vidro (miçangas) (E).B C D E

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