AUER, C. G.

MONTEIRO, P. H. R.

MOTTA, A. C. V.

OLIVA, E. V. de

REISSMANN, C. B.

WINAGRASKI, E.

RCAAP - Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal

Variação na presença de ectomicorrizas em serapilheira de Pinus taeda submetido a teste de omissão de nutrientes em Jaguariaíva, PR.

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     1 Variação na presença de ectomicorrizas em serapilheira de Pinus taeda submetido a teste de omissão de nutrientes em Jaguariaíva, PR (1).  Etienne Winagraski(2); Carlos Bruno Reissmann(3); Celso Garcia Auer(4); Antonio Carlos Vargas Motta(5); Elaine Vivian de Oliva(6); Pedro Henrique Riboldi Monteiro (7)  (1) Trabalho executado com recursos da Embrapa Florestas, Universidade Federal do Paraná e Valor Florestal Gestão de Ativos Florestais.  (2) Engenheira Florestal, Mestranda do Programa de Pós-Graduação em Engenharia Florestal da Universidade Federal do Paraná, Curitiba, PR. Av. Pref. Lothário Meissner, 900, Jardim Botânico, Campus III, CEP 80210-170, Curitiba, PR Bolsista Capes. etiennewinagraski@yahoo.com.br. (3) Engenheiro Florestal, Dr. Professor colaborador do Programa de Pós-Graduação em Ciência do Solo e Engenharia Florestal da Universidade Federal do Paraná, Curitiba, PR. (4) Engenheiro Florestal, Dr. Pesquisador da Embrapa Florestas, professor associado do Programa de Pós-Graduação em Engenharia Florestal da Universidade Federal do Paraná, Estrada da Ribeira, Km 111. Colombo, PR. celso.auer@embrapa.br. (5) Engenheiro Agrônomo, Dr. Professor do Programa de Pós-Graduação em Ciência do Solo e da Universidade Federal do Paraná, Rua dos Funcionários, 1540, Juvevê, CEP 80035-050, Curitiba, PR. mottaufpr@gmail.com. (6) Bióloga, Doutoranda do Programa de Pós-Graduação em Engenharia Florestal da Universidade Federal do Paraná, Curitiba, PR. Av. Pref. Lothário Meissner, 900, Jardim Botânico, Campus III, CEP 80210-170, Curitiba, PR.Bolsista Capes. elainevivian_bio@hotmail.com. (7) Engenheiro Florestal, Mestrando do Programa de Pós-Graduação em Engenharia Florestal da Universidade Federal do Paraná. Curitiba, PR. Av. Pref. Lothário Meissner, 900, Jardim Botânico, Campus III, CEP 80210-170, Curitiba, PR. Bolsista Capes.monteiro.ef@gmail.com.   RESUMO: As ectomicorrizas estão presentes em coníferas e folhosas e quando associadas às raízes garantem melhor nutrição à planta. O objetivo deste trabalho foi analisar ectomicorrizas na serapilheira de um plantio de Pinus taeda com oito anos de idade sob diferentes adubações, localizado no município de Jaguariaíva/PR. No ano de 2008, foi instalado o ensaio utilizando a técnica de diagnose por subtração ou omissão de nutrientes. O experimento foi disposto em delineamento em blocos ao acaso com quatro repetições. Sete tratamentos foram estabelecidos: T1 (Completo: macro: N, P, K, micro: Zn, Cu, B, Mo e calcário: 2,6 mg ha-1 de calcário dolomítico); T2 (Completo menos a aplicação de Macro); T3 (Completo menos Micro); T4 (Completo menos K); T5 (Completo menos Zn); T6 (Completo menos Calcário); T7 (Testemunha). Em 2010, foi realizada uma reaplicação com a mesma quantidade de nutrientes. Em 2012 foram coletados em cada tratamento 5 monólitos de serapilheira (10 x 10 cm) para avaliar a presença de ectomicorrizas. O tratamento que apresentou maior frequência de ectomicorrizas foi a Testemunha (70 % das amostras), seguido pelo tratamento menos Calcário (55 % das amostras) refletindo o efeito do calcário realizado a lanço na serapilheira. O tratamento menos Macro foi o terceiro com melhor efeito para ectomicorrizas (50 % das amostras). Já os tratamentos Completo, menos Zn, menos Micro e menos K apresentaram baixa presença de ectomicorrizas (10, 20, 20 e 15 %, respectivamente). Houve redução de micorrizas na serapilheira pela aplicação do calcário e do fósforo.  Termos de indexação: Adubação, micorrizas, litter. INTRODUÇÃO  O pinus é um gênero de espécies florestais de suma importância comercial para o Brasil, totalizando em 25,2 % de áreas de reflorestamento nacional (Abraf, 2012). Desenvolve-se em sítios extremamente pobres e normalmente não são adubados, resultando em produções abaixo do satisfatório (Schneider, 2011). Por este motivo, o cultivo de espécies de pinus no Brasil depende de fungos ectomicorrizicos, para maior sobrevivência e crescimento inicial da muda em campo (Tomazelho-Filho & Krugner, 1980). As micorrizas são encontradas em diferentes tipos de solo e vegetação. Cerca de 90 % das plantas superiores existentes no planeta formam micorrizas (Souza et al., 2003), as quais maximizam a absorção de água e nutrientes, como o P, N e P. Garantem tolerância ao estresse hídrico, à acidez, às temperaturas altas e à toxidez do solo. As associações podem variar de acordo com práticas de manejo de mudas, práticas com a temperatura, umidade, matéria orgânica, nutrientes, pH e a aeração do solo (Bellei & Carvalho, 1992; Souza et al., 2003). Dentre os diferentes tipos de micorrizas estão as ectomicorrizas. As ectomicorrizas estão presentes em coníferas e folhosas de clima temperado, caracterizando-se por uma densa camada de micélio na superfície da raiz de coloração variável (Bonnassis, 2007; Oliveira et al., 2010). São encontradas nas principais espécies florestais de interesse comercial (Pinaceae, Myrtaceae e Fagaceae) (Bellei & Carvalho, 1992; Bonnassis, 2007).       2A serapilheira formada em plantio pinus pode ser um excelente indicador no estabelecimento de sítios florestais. Em geral a atividade microbiana é superior na serapilheira devido a disponibilidade de nutrientes e a qualidade de carbono que se encontram (Carvalho et al., 2008). A camada superficial do solo (0-5 cm) é a região que mais ocorre raízes finas, raízes estas que se encontram as associações com fungos ectomicorrizicos. Diversos estudos vêm sendo realizados a fim de identificar os fungos micorrizicos mais eficientes quanto aos aspectos nutricionais para espécies silviculturais, mas poucos têm explicado os mesmos eventos em condições de campo (Bonnassis, 2007). Assim, realizou-se uma análise da ocorrência e frequência de ectomicorrizas presentes na serapilheira de Pinus taeda em um ensaio de omissão de nutrientes, para avaliar o efeito dos nutrientes na micorrização.  MATERIAL E MÉTODOS  Caracterização da área O município de Jaguariaíva (24° 14’ 16”S e 49° 43’ 41”W) está localizado no estado do Paraná, especificamente nas áreas dos Campos Gerais. Pertecente ao segundo planalto do Paraná possui como sua classificação o solo Latossolo Vermelho Amarelo Álico Típico, com relevo suave ondulado. Os solos da região caracterizam pelos baixos teores de pH e teores de bases trocáveis e elevada saturação por aluminio (Batista, 2011). O clima da regão de acordo com Köppen está localizado numa área de transição entre o Cfa (subtropical) e o Cfb (temperado), com precipitações médias de 1400 a 1600 mm, temperaturas médias entre 17 e 19 °C, umidade relativa média de 75% e cerca de 10 a 25 geadas no ano.  No ano de 2008 foi instalado um ensaio de omissão de nutrientes em área de reflorestamento da  empresa Valor Florestal Gestão de Ativos Florestais.  Delineamento experimental O ensaio de omissão de nutrientes utilizado foi montado em delineamento em blocos ao acaso com quatro repetições (blocos) contendo sete tratamentos. Cada tratamento correspondeu a uma parcela com 400 m² e espaçamento entre plantas de 3 x 2 m (Schneider, 2011). Cada parcela possuia 16 árvores úteis e uma bordadura dupla. Sete tratamentos foram utilizados: Tratamento Completo (aplicação de macro, micro e calagem), tratamento menos macro (aplicação do tratamento completo com a omissão dos macronutrientes N, P, K), tratamento menos micro (aplicação do tratamento completo com omissão dos micronutrientes: Zn, Cu, B e Mo), tratamento menos K (aplicação do tratamento completo menos K), tratamento menos Zn (aplicação do tratamento completo menos Zn), tratamento menos calagem e testemunha (sem aplicação dos tratamentos). Duas aplicações foram feitas nos anos de 2008 e 2010. Os insumos aplicados foram calculados em relação para um hectare, sendo extrapolados para a área experimental. Esta quantidade foi dividida ao longo das duas aplicações. Aplicou-se doses equivalentes a 40; 60; 80; 3; 2 e 1,5 kg ha-1 de N, P2O5, K2O, Zn; B e Cu, respectivamente. A fonte dos nutrientes foram uréia, super-fosfato triplo, cloreto de potássio, sulfato de zinco, ulexita e sulfato de cobre. Também foram aplicados Mo na dose de 20 g ha-1 como molibdato de sódio e calcário dolomítico na dose de 1300 kg ha-1.   Amostragem e análise de serapilheira Em 2012, foram coletados em cada tratamento cinco monólitos de serapilheira de 10 x 10 cm com profundidade média de 5 cm, totalizando uma área de 500 cm², a fim de avaliar a ocorrência e frequência de ectomicorrizas. Foi realizada a avaliação visual da presença das ectomicorrizas nas raízes localizadas na serapilheira (Tabela 1). Para análise estatística, os valores foram transformados para (√x)+0,5 e analisados através do programa estatístico Assistat versão 7.6 beta (pt).   Tabela 1. Metodologia utilizada para quantificação das ectomicorrizas e identificação na serapilheira de Pinus taeda. Nota* Definição* 0,0 Sem presença de ectomicorriza 0,5 Ectomicorriza rara e dispersa 1,0 Ectomicorriza menos rara e dispersa 2,0 Ectomicorriza abundante, agrupada 3,0  Ectomicorriza  em toda área *Metodologia baseada em Garbaye (1994).  RESULTADOS E DISCUSSÃO  Das 140 amostras coletadas, foram observadas a frequência de ectomicorrizas em 48 amostras. O tratamento que apresentou maior frequência foi a Testemunha, confirmando a dependência que o pinus têm das ectomicorrizas principalmente em ambientes de baixa fertilidade, seguido pelo tratamento menos Calcário, refletindo o efeito do calcário realizado a lanço na serapilheira, visto que o o mesmo foi observado no momento da coleta da serapilheira em diversos tratamentos (Tabela 2).      3Tabela 2 – Frequência acumulada e frequência relativa baseada em 20 amostras coletadas para cada tratamento. Tratamento fi* fi%** Completo 02 10 Completo menos Macronutrientes 10 50 Completo menos Micronutrientes 04 20 Completo menos K 04 20 Completo menos Zn 03 15 Completo menos Calcário 11 55 Testemunha 14 70 Onde: *fi: frequência acumulada; **fi %: frequência relativa, baseada nas 20 amostras coletadas em cada tratamento.  O tratamento menos Macro foi o terceiro com melhor efeito para ectomicorrizas (50 % das amostras do tratamento).  Os tratamentos Completo, menos Zn, menos Micro e menos K apresentaram baixa presença de ectomicorrizas com valores de 10, 20, 20 e 15 %, respectivamente. Os tratamentos menos Macro, menos K e menos Calcário não diferiram entre si estatisticamente, assim como os tratamentos menos Micro e menos Zn (Tabela 3). A Testemunha e o tratamento Completo obtiveram diferença estatística em relação a todos os tratamentos. O tratamento menos Calcário diferiu estatisticamente em relação ao tratamento Completo e a Testemunha.  Tabela 3 – Frequência de ectomicorrizas  em cada tratamento por bloco.  Tratamento Bl 1 Bl 2 Bl 3 Bl 4 ∑ Média* 1 Completo 0,0 0,0 1,0 0,0 1,0  0,25 c 2 Menos Macro 2,0 2,0 3,0 1,0 8,0 2,00 ab 3 Menos Micro 0,0 2,5 0,0 2,0 4,5 1,12 bc 4 Menos K 0,5 0,0 4,5 0,5 5,5 1,37 ab  5 Menos Zn 0,5 3,0 0,0 0,0 3,5 0,87 bc 6 Menos Calcário 3,5 3,5 1,0 2,0 10,0 2,50 ab 7 Testemunha 4,0 2,0 4,5 5,0 15,5  3,87 a Onde:Bl: Bloco. *Médias  seguidas pela mesma letra não diferem estatisticamente ao nível de 5% de probabilidade (Duncan)  As respostas das micorrizas ao crescimento da planta podem ser positivas ou negativas, dependendo da relação fungo-planta e condições edáficas e ambientais (Bellei & Carvalho, 1992; Johnson et al., 1997). Pode-se observar inibição da simbiose por parte do calcário e macronutrientes, possivelmente devido o excesso de P. A concentração de ectomicorriza pode ser inibida pela alta disponibilidade de fósforo (Castellano & Molina, 1989; Kasuya et al., 2010; Bellei & Carvalho, 1992). A concentração de P dependerá do fungo e da planta associada (Kasuya et al., 2010). Assim, se o solo possui P suficiente as ectomicorrizas passam a atuar como dreno de fotossintatos (Harley, 1978). Porém espécies colonizadas promoverão maior absorção de P do que plantas não colonizadas por ectomicorrizas (Santos, 2006). Apesar de N quando aplicado permitir maior crescimento de ectomicorrizas na forma de amônio (NH4+) do que nitrato (NO3-) (France & Reide, 1982), por ser muito dinâmico e móvel no solo, no ensaio realizado não foi fator limitante para a ocorrência das ectomicorrizas.  O mesmo ocorreu com o K. Quando aplicado em áreas de baixo pH, a absorção deste elemento pelas ectomicorrizas é reduzido (Jongbloed & Borst-Pauwels, 1992). Devido a última aplicação ter ocorrido no ano de 2010 e o K ser móvel e dinâmico, o mesmo elemento também não foi fator limitante para ocorrência de ectomicorrizas no experimento. Os nutrientes Ca e Mg em plantas associadas às ectomicorrizas permitem maior absorção de P (Silva et al., 2007a).  Relacionando o excesso de fósforo na frequência média do tratamento Completo e do tratamento menos Calcário (0,25 e 2,50, respectivamente) (Tabela 3). Os tratamentos sem micronutrientes e sem Zn apresentaram menor frequência e intensidade de ectomicorrizas podendo indicar que a ausência desses micronutrientes reduz o seu desenvolvimento. Em mudas mantidas em solos contaminados com metais pesados ocorrerá a formação de micorrizas e tolerância dos fungos. (Silva et al., 2007b; Bonnassi, 2007). Entretanto, Mudas de canafístula (Peltophorum dubium) com doses crescentes de aplicação de cobre apresentaram redução na ocorrência de ectomicorrizas, onde o cobre reduziu o comprimento radicular e a área específica radicular (Silva et al., 2007b).  CONCLUSÕES  Foi observada a importância de fungos ectomicorrizicos no estabelecimento de reflorestamentos de pinus em baixas condições de fertilidade, visto que a testemunha apresentou a maior colonização (70% das amostras) em relação ao tratamento completo (10% das amostras), ao tratamento menos Calcário (55% das amostras) e ao tratamento menos Macro (50% das amostras). Os tratamentos menos Micro, menos K, menos Zn também obtiveram pouca resposta na ocorrência de fungos ectomicorrizicos (20%, 20% e 15% das amostras respectivamente), isto devido a presença do P e da calagem. É necessário realizar mais estudos a fim de identificar os níveis de nutrientes limitantes para cada ectomicorriza bem como identificá-las.      4 AGRADECIMENTOS  A empresa Valor Florestal Gestão de Ativos Florestais pela área utilizada no experimento e recursos utilizados; ao Departamento de Solos da Universidade Federal do Paraná pelo apoio laboratorial e a Embrapa Florestas pelo apoio laboratorial.  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Efeito do cobre na população de bactérias e fungos do solo, associação ectomicorrizica e no desenvolvimento de mudas de eucalipto e canafístula. 81 f. Dissertação (Mestrado), Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, 2006.  SCHNEIDER,T. Crescimento e teores de B, Cu, Mn, Fe e Zn em Pinus taeda L., como resultado da adubação e calagem sob a técnica da omissão de nutrientes. 51 f. Dissertação (Mestrado em Ciência do Solo) – Setor de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Paraná, Curitiba, 2011  SILVA, M. A.; COSTA, M. D.; ROCHA, R. B. & BORGES, A. C. Formação de ectomicorrizas por monocários e dicários de Pisolithus sp. e interações nutricionais em Eucalyptus grandis. Revista Brasileira de Ciência do Solo, 31: 917-929, 2007.a.  SILVA, R. F.; SALLES, A. S.; LEAL, L. T.; LUPATINI, M.; MORO, C. A. J. & ANTONIOLLI, Z. I. Ectomicorriza na tolerância de mudas de canafístula Peltophorum dubium (Spreng.) Taub. a solo contaminado por cobre. 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