CARVALHO, C. H. S. de

PASQUAL, M.

REZENDE, J. C. de

SANTOS, A. C. R.

TEIXEIRA, J. B.

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 INFLUÊNCIA DE REGULADORES DE CRESCIMENTO NO DESENVOLVIMENTO DE EMBRIÕES SOMÁTICOS DE Coffea arabica. A.C. R. Santos, Pesquisadora Fundação Procafé, J. C. de Rezende, Pesq. Epamig Lavras; M. Pasqual, Prof. Dr. Titular Dpto. de Agricultura, J.B. Teixeira, Pesquisador Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, C. H. S. de Carvalho, Pesquisador Embrapa Café,  Na cultura de tecidos, a adição de reguladores de crescimento ao meio nutritivo é de suma importância. Objetivando avaliar o efeito de  IBA e de BAP na  fase  final de desenvolvimento de embriões somáticos de Coffea arabica, foi conduzido um experimento no Laboratório de Cultura de  Tecidos  da  Fundação  Procafé,  em  Varginha,  MG.  Segmentos  de  folha  do  clone  20  (grupo Catucaí)  foram  inoculados em placas de Petri  contendo o meio primário  (PM) e,  após um mês, transferidos para o meio secundário (SM), segundo o protocolo de Teixeira et al. (2004). Aos 180 dias após a  inoculação dos explantes, os setores embriogênicos  foram transferidos para o meio de  regeneração,  segundo  o  mesmo  protocolo,  suplementado  com  1g.L‐1  de  prolina,  onde permaneceram por mais 70 dias, até a formação de embriões globulares. Ao final deste período, os  embriões  permaneceram por  120  dias  em  biorreatores  do  tipo  RITA®,  contendo  o meio  de regeneração (R) de Boxtel & Berthouly (1996), até que as  folhas cotiledonares estivessem bem desenvolvidas.  Esses  embriões  em  estádio  cotiledonar  foram  utilizados  como  explantes  no presente  trabalho,  a  fim  de  completarem  o  desenvolvimento  até  o  estádio  de  plântulas.Os tratamentos constituíram das seguintes variações no meio de crescimento (PRM) de Teixeira et al. (2004): meio PRM (tratamento 1), meio PRM sem BAP (tratamento 2), meio PRM acrescido de 1,47µM de IBA (tratamento 3) e meio PRM sem o BAP acrescido de 1,47µM de IBA (tratamento 4).  Dessa  forma,  para  as  análises  estatísticas,  foi  isolado  o  efeito  do  BAP  e  do  IBA  e  os tratamentos  foram  arranjados  em  um  esquema  fatorial  2  x  2  (presença  e  ausência  de  BAP, presença  e  ausência  de  IBA).A  avaliação  do  experimento  foi  realizada  três  meses  após  a instalação,  analisando‐se  as  variáveis  comprimento  da  parte  aérea,  porcentagem  de  plântulas com  raízes  e  porcentagem  de  plântulas  normais.  Foram  contabilizadas  como  plantas  normais somente àquelas que apresentaram aspecto normal, ou seja,  fenótipo semelhante ao de plantas provenientes de sementes e parte aérea bem desenvolvida e vigorosa. Utilizou‐se o delineamento experimental inteiramente casualizado, com 20 repetições por tratamento.     Resultados e Conclusões:  Comprimento da parte aérea Na presença de BAP, o comprimento da parte aérea foi estatisticamente igual na presença ou na ausência de IBA e, na ausência de BAP, este comprimento foi estatisticamente superior na ausência de IBA do que na sua presença (Tabela 1). Da mesma forma, na presença de IBA, o comprimento médio das plantas é estatisticamente igual ao comprimento na presença ou na ausência de BAP. Na ausência de IBA, o comprimento foi estatisticamente superior na ausência de BAP. Verifica-se ainda, que houve maior comprimento da parte aérea na ausência de ambos os reguladores de crescimento.   TABELA 1  Valores médios do comprimento da parte aérea de plantas de C. arabica, segundo os tratamentos estudados. Fundação Procafé, Varginha, MG, 2008. BAP (1,33µM) IBA (1,47µM)  Com  Sem Com  1,92a A  1,87b A Sem  1,81a B  2,44a A 1 Médias seguidas de mesma letra minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem entre si, pelo teste t de Student, a 5% de significância.  Porcentagem de plântulas com raízes  Os efeitos principais da adição de IBA e de BAP ao meio de cultura foram significativos (Tabela 2). Observa‐se, pelos dados da Tabela 2, que o Tratamento 3, constituído pelo meio PRM acrescido  de  1,47µM  de  IBA,  não  apresentou  formação  de  sistema  radicular,  sendo estatisticamente inferior aos demais tratamentos estudados. Esse resultado pode ser atribuído à possibilidade de que os níveis naturais de auxina e citocinina das plantas tenham sido suficientes para proporcionar o desenvolvimento de raízes. No presente trabalho é possível também que os reguladores  de  crescimento  utilizados  nos  meios  anteriores  à  fase  de  formação  de  plântulas tenham  condicionado  um  efeito  residual,  proporcionando  condições  adequadas  ao desenvolvimento de raízes, dispensando o uso de reguladores nesta fase de desenvolvimento dos embriões somáticos.        TABELA  2  Valores  médios  de  palntulas  de  C.  arabica  com  raízes,  segundo  os  tratamentos estudados. Fundação Procafé, Varginha, MG, 2008 BAP (1,33µM)1 IBA (1,47µM)  Com  Sem Com  0,00 b B  39,44 a A Sem  42,69 a A  54,64 a A 1 Médias seguidas de mesma letra minúscula na coluna e maiúscula na linha não diferem entre si pelo teste t de Student, a 5% de significância.  Porcentagem de plântulas normais Cerca de 60% dos embriões cotiledonares colocados nos meios em estudo não se desenvolveram bem, formando plântulas muito pequenas, com baixo desenvolvimento da parte aérea ou plântulas anormais. A adição de IBA e de BAP, isoladamente, ou em conjunto, não aumentou a formação de plântulas normais. Observou-se que, na ausência do BAP, houve desenvolvimento de 44,84% de plântulas normais e, na presença deste regulador, esta porcentagem foi de 36,50%. Esta porcentagem foi bastante semelhante quando considerados os níveis de IBA (40,53% e 40,81% de plântulas normais na presença e na ausência do regulador, respectivamente). Dessa forma justifica-se a utilização do meio de cultura sem a adição desses reguladores, com o objetivo de redução dos custos. Vale ressaltar que as plântulas normais obtidas no presente trabalho foram transferidas para casa de vegetação, apresentando desenvolvimento normal e fenótipo idêntico ao de plantas originadas por sementes. Conclui-se que no protocolo empregado não há necessidade da adição de IBA e BAP para a conversão de embriões somáticos em estádio cotiledonar para plântulas de C. arabica.   

Influência de reguladores de crescimento no desenvolvimento de embriões somáticos de Coffea arabica.

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http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/923711/1/Influenciadereguladores.pdf

Influência de reguladores de crescimento no desenvolvimento de embriões somáticos de Coffea arabica.

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