BONOW, S.

PINHEIRO, N. L.

REIS, L.

SOUZA, R. S. de

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 SELEÇÃO DE PRIMERS MICROSSATÉLITES VISANDO A IDENTIFICAÇÃO GENÉTICA EM MORANGUEIRO  Rafaela S. de Souza1; Letícia Reis2; Natércia L. P.Lima3; Sandro Bonow4 1Estudante do curso de Graduação em Agronomia, UFPel, bolsista de iniciação científica do CNPq. Email: rafaelaschmidt@hotmail.com 2Estudante do curso de Graduação em Agronomia –UTFPR.Campus de Pato Branco -PR. Em estágio obrigatório de conclusão de curso na Embrapa Clima Temperado. Email: lereis04@hotmail.com 3Analista da Embrapa Clima Temperado. 4Eng. Agrônomo, Doutor, pesquisador da Embrapa Clima Temperado.  A correta identificação genética de genótipos propagados clonalmente é de grande importância uma vez que erros durante a propagação de mudas podem acarretar em grandes prejuízos aos produtores. Dentro das culturas propagadas dessa forma encontra-se o morangueiro. Uma das alternativas visando à certificação genética é aquela realizada por meio de análise molecular. Entre os marcadores moleculares os microssatélites têm sido utilizados com sucesso na genotipagem em morangueiro incluindo a certificação genética. O objetivo do trabalho foi avaliar primers microssatélites visando identificar aqueles adequados ao uso em estudos com foco na certificação genética. Foram testados quinze primers microssatélites: ARSFL11, ChFaM-023, EMFn111, EMFn121, EMFn170, EMFn181, EMFn182, EMFv104, EMFvi136, EMFvi166, ARSFL_9, ARSFL_10 , ARSFL_12, ARSFL_15, ARSFL_17. Os primers foram testados em três genótipos oriundos do Banco Ativo de Germoplasma de Morangueiro da Embrapa Clima Temperado. O DNA foi extraído a partir de tecidos de folhas jovens os quais foram macerados em nitrogênio líquido e o DNA quantificado e diluído para a concentração 10ng/µl. A extração foi realizada conforme protocolo recomendado para a cultura. As reações de PCR foram realizadas em termociclador GeneAmp PCR System 9700 nas seguintes condições: ciclo inicial de desnaturação  a 94ºC por 1 minuto, seguido de 30 ciclos a 94°C por 45 segundos, anelamento variando de 55°C a 60°C, dependendo do primer,  por 45 segundos e extensão a 72°C por 2 minutos, finalizando com um ciclo de extensão a 72°C por 4 minutos.Os produtos de PCR foram analisados em gel de policrilamida 6% em sequenciador LICOR 4300.A partir dos resultados foi possível observar que todos os primers, com exceção do ARSFL_10 e ARSFL_12, amplificaram fragmentos considerados adequados para a genotipagem dos 31 genótipos do Banco Ativo de Germoplasma de Morangueiro da Embrapa Clima Temperado, nos quais estão incluídas as principais variedades plantadas no Brasil. Agradecimentos: CNPq pela concessão da bolsa e EMBRAPA.   

Seleção de primers microssatélites visando a identificação genética em morangueiro.

SOUZA, R. S. de.

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http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/948232/1/88.pdf

Seleção de primers microssatélites visando a identificação genética em morangueiro.

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