BARRETO, M. R.

LOGUERCIO, L. L.

PAIVA, E.

SANTOS, C. G. dos

VALICENTE, F. H.

Repository Open Access to Scientific Information from Embrapa

..,-.,--","MA-049 ~ ANÁLISE DO SOBRENADANTE DECULTURA Bacillus thruringiensisCONTENDO GENES VIP E SUAEFICIÊNCIA RELATIVA NO CONTROLEDE LAGARTAS DE Spodopterafrugiperda.Cíntia Guim".arães dos Santos. Leandro L. Loquercio". MarlitonR. Barreto::\~rnanao H. Valicee e Edilson Paiva.CNPMS/EMBRAPA, C.P. 151. CEP 35701-970. Sete Lagoas.MG.Proteínas Inseticidas. do tipo "vlp", são secreta das no sobrenadante deculturas de Baclllus rhruringiensts (B.t.) em fase de crescimentovegetatlvo. Caracterlzou·se por PCR 59 cepas de B.t. da coleção dis-ponível no Laboratório de Controle Blológico/NBA/ Embrapa Milho eSor9O. para verificar especificamente a presença do gene Vlp3A. Iam-bém foram testados os efeitos de mortalidade das proteínas Inseticidasdo sobrenadante de algumas destas cepas em lagartas de Spodopterafrugtperoa. As cepas foram crescidas em meio líquido e centrifugadaspara obtenção das células bacterianas. O DNA de cada cepa foi obtidoatravés de lise alcalina ("mlniprep") e os fragmentos foram amplifica·dos utilizando pares de prlmers específicos para o gene Vlp3A . Identi-ficou-se o número e o peso molecular das bandas ampllficadas em gelde IIcrilamlda 6%. Para estimar o conteúdo de vlps com atividade blolé-glca em um sobrenadante. as culturas de bactérias foram cultivadas emmeio liquido por 16 horas à 30'C e centrifugadas: o sobrenadante foientão filtrado para mlnlmlzar a presença de células bacterlanas. Comoa fração vlp é termosensível. estimou-se a atividade biológica destafração pela aplicação de alíquotas de sobrenadante aquecidadlferenciadamente. Pedaços de dietas artlflclai~ foram embebidos nes-tas aliquotas para cada cepa e aplicados individualmente a 24 lagartascom dois dias de idade. Observou-se que a simples presença do geneVlp não significou necessariamente altas eficiências de mortalidade nafração protéica dos sobrenadantes. Esse resultado pode ser explicadopor uma coleta do sobrenadante em tempos de cultura inadequados. oupelos respectivos genes Vlp serem. nesses casos. naturalmenteineficientes no controle da lagarta-do-cartucho.Fonte Financiadora: PRONEX - Projeto: Biologia Molecular e Ce-lular no Melhoramento de Milho Tropical e Fundação de Amparo aPesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Análise de sobrenadante de cultura Bacillus thuringiensis contendo genes VIP e sua eficiência relativa no controle de lagartas de Spodoptera frugiperda.

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/483537/1/Analisesobrenadante.pdf

Análise de sobrenadante de cultura Bacillus thuringiensis contendo genes VIP e sua eficiência relativa no controle de lagartas de Spodoptera frugiperda.

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Repository Open Access to Scientific Information from Embrapa