Este trabalho foi conduzido com os objetivos de estabelecer protocolos para o cultivo de anteras de milho, in vitro, visando a producao de linhagens; e avaliar a possibilidade da incorporacao dessa tecnica em um programa de melhoramento. Foram testados 37 genotipos de milho. A metodologia utilizada inclui a determinacao do estadio de desenvolvimento dos microsporos, mediante coloracao com carmim propionico; um teste de viabilidade de microsporos, pela reacao da fluorescencia enzimaticamente induzida; o pre-tratamento de pendoes a 8,0 C; o plaqueamento das anteras, em posicao lateral, sobre tres tipos de meio; e a incubacao das placas no escuro ou sob fotoperiodo de 16 horas, a 26 +/- 1C. Para a regeneracao de plantas, os calos foram transferidos para um meio sem reguladores de crescimento. Embora os microsporos apresentassem boa taxa de viabilidade quando plaqueados, os materiais testados mostraram-se pouco responsivos, havendo formacao de calos a partir de tres genotipos apenas e regeneracao de plantas a partir de apenas uma linhagem. Diante do pequeno sucesso obtido com os materiais testados e considerando que, em um programa de melhoramento de milho, ha necessidade da producao de grande numero de linhagens, conclui-se que a cultura de anteras ainda nao pode ser vista como tecnica auxiliar rotineira, pelo menos com a metodologia de cultivo e de regeneracao de plantas, atualmente disponivel, para o germoplasma amostrado