ALVES, E. S.

CARDOSO, J. E.

CAVALCANTI, J. J. V.

CÂMARA, M. P. S.

LIMA, F. A.

MELO, J. G. M.

SILVA, L. G. C. da

VIANA, F. M. P.

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REAÇÃO DE CLONES DE CAJUEIRO A ISOLADOS DE Colletotrichum sp.  Luís Gustavo Chaves da Silva¹, Francisco Marto P. Viana², Marcos P. S. Câmara¹, José J. V. Cavalcanti², José E. Cardoso², José G. M. Melo3, Edson S. Alves3, Francisco A. Lima3 ¹Universidade Federal Rural de Pernambuco, R. Dom Manoel de Medeiros s/n, Dois Irmãos - CEP 52171-900, Recife/PE, ²Embrapa Agroindústria Tropical, ³Universidade Federal do Ceará. E-mail: chaveslg@gmail.com  Introdução  A castanha de caju é o produto agrícola mais importante do estado do Ceará com geração de mais de 100 mil empregos diretos e indiretos; sendo também muito relevantes para os estados do Piauí e Rio Grande do Norte (FREIRE et al., 2002; OLIVEIRA, 2002). As epidemias ocasionadas por Colletotrichum spp. em cajueiro (Anacardium occidentalis) destacam-se como uma das principais doenças desta cultura e pode levar a perdas de mais 40% da produção (CARDOSO et al., 1999). Há poucas e desatualizadas pesquisas sobre a doença, havendo grande demanda de informações básicas para os programas de melhoramento e manejo integrado da doença (FREIRE et al., 2002; CARDOSO et al., 1999; BARROS et al., 1995). O agente etiológico da antracnose do cajueiro é descrito como Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. & Sacc (SUTTON, 1992). O gênero Colletotrichum apresenta uma grande variabilidade genética e a literatura vem mostrando relatos de variação na patogenicidade dos fungos deste grupo, dificultando a adoção de procedimentos adequados de manejo, principalmente nos programas de melhoramento (GIBLING et al., 2010; COSTA et al. 2009; DAVID & SOUZA, 2009; MEDEIROS et al. 2008; ANSARI et al., 2004). Mafaciole et al. (2008) observaram diferenças significativas de agressividade dos isolados de C. gloeosporioides em folhas maduras e intermediárias, porem nas folhas jovens, as diferenças de agressividade entre os isolados não foram significativas. Já Giblin et al. (2010) relatam a variação de patogenicidade de acordo com a origem dos isolados de C. gloeosporioides  de abacate e manga, tanto em ensaios de casa de vegetação como no campo. Serra et al. (2008) descreve  uma interessante relação de patógenicidade, demonstrando que isolados monospóricos de Colletotrichum obtidos de cajueiro foram mais agressivos que os multiespóricos, enquanto que isolados de mangueira multiesporicos formam mais agressivos que os nonospóricos. Isso leva a crer que as relações de parasitismos podem variáveis para cada patossitema mesmo se tratando de um patógeno pertencente a um mesmo gênero. Desta forma, torna-se necessária a investigação mais aprofunda da relação existente entre patógeno e hospedeiro, levando a um maior entendimento da antracnose do cajueiro. O objetivo do trabalho foi avaliar a reação de clones de cajueiro a isolados de Colletotrichum sp. provenientes de ecoregiões distintas ajudando a definir os melhores clones para cada uma destas áreas.   Material e Métodos  O experimento foi realizado no laboratório de fitopatologia da Embrapa Agroindústria tropical. Folhas recém destacadas de 4 clones de cajueiro (BRS-226, CCP-76, CCP-09 e LINDOLFO) foram inoculados com discos de meio de cultura contendo estruturas do fungo. Os discos de 6mmø foram obtidos de culturas puras, monospóricas, com 10 dias de crescimento. Foram utilizados 7 isolados (folhas) de diferentes regiões CCJ01, CCJ08, CCJ10, CCJ14, CCJ20, CCJ21, CMM788, provenientes dos municípios Trairi-CE, Goiana-PE, Taquarintinga-SP, São Luís-MA, Serra do Mel-RN, Campina Grande-PB e isolado de Colletotrichum acutatum proveniente de Pimentão da coleção de fungos fitopatogenicos Maria Menezes – UFRPE, respectivamente. O experimento foi montado segundo delineamento inteiramente casualizado com 4 repetições, onde cada repetição constituída de uma folha inoculada sem e com ferimento na face a adaxial do limbo foliar. Os ferimentos foram feitos apenas na porção direita do limbo foliar, com o auxilio de uma almofada de alfinetes entomológicoS previamente flambados. Bandejas plástica contendo folhas de papel toalha umedecidas com água destilada esterilizada no fundo das mesmas e cobertas com filme plástico transparente foram utilizadas como câmaras úmidas, onde as folhas permaneceram por 3 dias. Os pecíolos das folhas destacadas foram envoltos em algodão umedecido com solução nutritiva de macronutrientes e depositadas nos conjuntos de bandejas. Os conjuntos foram mantidos em sala de crescimento a temperatura de 28ºC ±1ºC e fotoperíodo de 12h. As avaliações foram realizadas a cada 24 horas para estimar o período de incubação (PI), bem como raspagens na face abaxial com o auxilio de estiletes flambados para detecção do período latente (PL). As raspagens foram avaliadas em preparações microscópicas com o uso de microscópio de luz. Também foi observado o surgimento de massas de esporos na face abaxial das folhas com o auxilio de microscopia de luz. No ultimo dia de avaliação todas as folhas foram digitalizadas com uso de scanner de mesa para avaliação da severidade total utilizando o programa computacional ASSESS 2.0 (APS), para obter o percentual de área foliar lesionada. Os valores de severidade foram avaliados por análise de variância (ANOVA) por arranjo fatorial, com o pacote estatístico SISVAR.  Resultados e Discussão  Houve variação entre os isolados e entre clones com relação ao PI e PL (Tabela 1). Apenas os isolados CCJ08, CCJ14 E CCJ21 conseguiram completar o PI em 24h nos clones BRS226 e CCP76. Todos os isolados em 72h completaram o PI com ferimento exceto o isolado CMM788 inoculado no clone CCP76. O gênero Colletototrichum é conhecido por apresentar capacidade de infectar tecidos intactos do hospedeiro, porem observa-se que combinações entre isolados e clones de cajueiro não apresentaram essa situação de forma geral, pois em algumas situações os isolados não foram capazes penetrar os tecidos de alguns clones, levando a suspeita de especializações fisiológicas. Como exemplo no caso do clone CCP76 ser susceptível sem ferimento aos isolados CCJ01, CCJ10 e CCJ14 provenientes de regiões com temperaturas médias acima de 28°C.  Já o BRS226 foi infectado sem ferimento apenas pelos isolados CCJ08, CCJ14, CCJ21 e CMM788, mesmo este ultimo não sendo patógeno de cajueiro e sim de pimentão. Com relação ao clone Lindolfo, tido como muito susceptível a antracnose, foi infectado por CCP08 e CCP14, onde o segundo é proveniente de uma região apresentando temperaturas médias abaixo de 25°C. O clone CCP09 foi o único susceptível a todos os isolados de cajueiro.  O PL foi variável também para todos os clones, sendo observados apenas 72h após a inoculação (Tabela – 1). Os clones BRS226 e Lindolfo não apresentaram PL em até 72h para o isolado CCJ10. Para CCP76 os isolados CCJ08 e CCJ20 não completaram PL no tempo de avaliação do experimento. Já o CCP09 os isolados CCJ01 e CCJ21 também não completar o PL durante a avaliação. Em nem um dos clones foi detectado PL para o isolado CMM788, demonstrando menos compatível com o hospedeiro testado mesmo que tenha conseguido infectá-lo. Formação de massa de esporos só foi observada no clone CCP09 para o isolado CCJ10 e no clone BRS226 para os isolados CCJ14 e CCJ20, detectados no ultimo dia da avaliação.  Tabela 1. Período de incubação e período latente em folhas destacada dos clones de cajueiro com e sem ferimento.  24h 48h 72h Clone Isolado S F S F S F CCJ01 0 0 0 1 0 2 pl CCJ08 1 0 1 2 1 pl 2 pl CCJ10 0 0 0 4 0 1 CCJ14 1 1 3 2 3 pl 3 pl CCJ20 0 0 0 1 0 1 pl CCJ21 1 0 2 4 3pl 4 pl CMM788 0 0 0 3 3 3 BRS226 Testemunha 0 0 0 0 0 0 CCJ1 0 1 0 2 0 2 pl CCJ8 0 3 1 3 4 pl 4 pl CCJ10 0 1 0 2 0 3 CCJ14 0 0 1 1 2 pl 1 pl CCJ20 0 3 0 3 0 4 pl CCJ21 0 3 0 4 0 4 pl CMM788 0 3 0 3 0 3 Lindolfo Testemunha 0 0 0 0 0 0 CCJ1 0 0 2 1 3 pl 1pl CCJ8 0 0 0 0 0 2 CCJ10 0 0 1 2 1 pl 3 pl CCJ14 2 3 3 3 4 pl 4 pl CCJ20 0 0 0 1 0 2 CCJ21 0 1 0 1 0 2 pl CMM788 0 0 0 0 0 0 CCP76 Testemunha 0 0 0 0 0 0 CCJ1 0 0 0 0 1 2 CCJ8 0 0 2 2 2 pl 3 pl CCJ10 0 0 3 3 4 pl 4 pl CCJ14 0 2 3 2 4 pl 4 pl CCJ20 0 0 1 1 2 pl 3 pl CCJ21 0 1 3 3 3 4 CMM788 0 1 0 2 0 2 CCP09 Testemunha 0 0 0 0 0 0 S - sem ferimento; F - com ferimento; 0 a 4 – número de repetições que completaram período de incubação; pl – completou período latente.  Possivelmente as folhas permanecendo em condições experimentais por mais tempo, outros isolados em clones variados apresentarem o mesmo comportamento. Analisando os valores de severidade total com ANOVA em arranjo fatorial foi possível detectar significância (P=0,05) na interação entre isolados e clones para severidade das lesões.  A severidade variou de 99% para o isolado CCJ14 a 0% para o isolado CMM788 ambos no clone CCP76. Usando teste de Tukey (P=0,05) obteve-se os resultados de 10a, 14b, 28c e 28c % de área lesionada, respectivamente para os clones Lindolfo, BRS226, CCP76 e CCP09. As médias por isolados foram de 3a, 16b, 17b, 20b, 21b, 26c, 40d % área lesionada respectivamente para CMM788, CCJ20, CCJ8, CCJ21, CCJ1, CCJ14. Os resultados de PL, PI e severidade total demonstram que o isolado CCJ14 foi o mais agressivo, bem como o clone mais susceptível o CCP09.  Conclusão  Nas condições empregadas neste estudo fica clara a variabilidade patogênica entre os isolados testados. O clone CCP09 foi susceptível a todos os isolados de cajueiro testados no experimento. O clone CCP76 apresentou as maiores amplitudes de severidade, demonstrado um padrão de resistência vertical, típica de resistência governada por um ou poucos genes. Referências  CARDOSO, J. E., CAVALCANTI, J. J. V., CAVALCANTI, M. I. R., ARAGÃO, M. L., FELIPE, E. M. Genetic resistance of dwarf cashew (Anacardium occidentale L.) to anthracnose, black mold and angular leaf spot. Plant Pathology, v.18, p. 23 – 27. 1999 DAVIDE, L.M.C., SOUZA, E.A. Pathogenic variability wthun race 65 of Colletotrichum lindemuthianum and its implicatons for common bean breeding. Crop Breeding and Applied Biothechnology, v.9, p. 23-30, 2009. FREIRE, F.C.O., CARDOSO, J.E., SANTOS, A. A., VIANA, F. M. P. Diseases of cashew nut plants (Anacardium occidentale L.) in Brazil. Crop Protection v.21, p.489 - 494. 2002. GIBLIN, F.R.,COATES, L.M., IRWIN, A.G. Pathogenic diversity of avocado and mango isolates of Colletotrichum gloeosporioides causing anthracnose and pepper spot in Autralia. Autralasian Plant Pathology, v.39, p. 50-62, 2010. MAFACIOLI, R., Tessmann, D.J., Santos, A.F., Vida, J.B.. Variabilidade patogênica e efeito de carboidratos no crescimento micelial, esporulação e agressividade de Colletotrichum gloeosporioides da pupunheira. Summa phytopathologica,  Botucatu,  v. 34,  n. 1, p.18-21, 2008.MEDEIROS, L.A.M., BALARDIM, R. S., COSTA, I.F.D.,GULART, C.A., LENZ, G. Reação de germoplas crioulo de fejoeiro (Phaseoulus vulgaris) a Colletotrichum lindemunthianum. Tropical Plant Pathology, V. 33, n. 4,p. 273-280, 2008. SUTTON, B. L. The genus Glomerella and its anamorph Colletotrichum. In: BAILEY, J. A.; JEGER, M. J. Colletotrichum: biology, pathology and control. Wallingford: CAB International, 1992. p. 1-26. 

Reação de clones de cajueiro a isolados de Colletotrichum sp.

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