BRITO, L. G.

CHAGAS, A. C. de S.

FERREZINI, J.

GIGLIOTI, C.

GIGLIOTI, R.

OLIVEIRA, M. C. de S.

SCHIOVONE, D.

As miíases produzidas pelos estágios larvais da mosca Cochliomyia hominivorax representam grave problema econômico para a pecuária no Brasil

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Análise da atividade proteolítica dos produtos de excreção e desecreção de larvas de Cochliomyia hominivoraxRodrigo Giglioti1, Carolina Giglioti2, Daniele Schiavone2, Jenifer Ferrezini3, Luciana G. Brito4, AnaCarolina de Souza Chagas5 e Márcia Cristina de Sena Oliveira51 Aluno de graduação do Curso de Ciências Biológicas do Centro Universitário Central Paulista, SãoCarlos, SP; estagiário e bolsista da Embrapa Pecuária Sudeste.2 Aluna de graduação do Curso de Ciências Biológicas da Universidade Federal de São Carlos, SãoCarlos, SP; estagiária da Embrapa Pecuária Sudeste; bolsista do PIBIC do CNPq.3 Aluna de graduação do Curso de Ciências Biológicas do Centro Universitário Central Paulista, SãoCarlos, SP; estagiária da Embrapa Pecuária Sudeste.4 Pesquisadora da Embrapa Rondônia, Porto Velho. RO.5 Pesquisadora da Embrapa Pecuária Sudeste.As miíases produzidas pelos estágios larvais da mosca Cochliomyia hominivoraxrepresentam grave problema econômico para a pecuária no Brasil. Em estudos comvários dípteros cujas larvas produzem miíases, verificou-se que o estabelecimentodas larvas é facilitado pela produção de quantidades consideráveis de enzimas quesão secretadas e/ou excretadas pelas larvas para digerir proteínas integrais dostecidos, o que auxilia o estabelecimento e a nutrição das larvas. Estas enzimasconstituem elemento-chave para a sobrevivência larval e para o desenvolvimento dadoença. O interesse de investigar enzimas proteolíticas em diferentes sistemasbiológicos tem se intensificado ultimamente, porque elas podem fornecerinformações importantes sobre a relação parasita? hospedeiro e também porquepodem constituir alvo potencial na produção de drogas e de imunógenos para ocontrole dessa enfermidade. Estes estudos são ainda incipientes em grande partedos dípteros causadores de miíases, principalmente a C. hominivorax, queapresenta distribuição restrita à América Central e à América do Sul. Este trabalhotem por objetivo iniciar a caracterização dos produtos de excreção e de secreção(PES) das larvas de primeiro e de segundo estágio (L1 e L2) dessa mosca. Para essefim, foi estabelecida uma colônia em laboratório e os PES foram obtidos das L1 e dasL2, utilizando meio RPMI adicionado de antibióticos. A atividade proteolítica dos PESfoi investigada, aplicando-se as amostras nativas em gel de poliacrilamida (gradientede 5% a 12,5%) copolimerizado com gelatina a 0,2%. A natureza da proteólise dosPES de L1 e de L2 foi avaliada nesses mesmos géis, aplicando-se amostras nativaspreviamente incubadas com cada um dos seguintes inibidores de proteases: PMSF,TPCK, TLCK, EDTA e DCI. O perfil de proteólise dos PES de L1 e de L2 revelou apresença de hidrólise difusa na faixa que se estende desde a região de massamolecular aparente de >220 kDa até regiões de baixa massa molecular. Nos ensaioscom inibidores específicos, a maior intensidade de inibição foi obtida pelo tratamentodas amostras dos PES de ambos os estágios larvais com DCI, o que indica apredominância de enzimas do grupo das serinoproteases nesses extratos.

Análise da atividade proteolítica dos produtos de excreção e de secreção de larvas de Cochliomyia hominivorax.

Análise da atividade proteolítica dos produtos de excreção e de secreção de larvas de Cochliomyia hominivorax

Análise da atividade proteolítica dos produtos de excreção e de secreção de larvas de Cochliomyia hominivorax

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