BOSSU, C. M.

FERREIRA, E. C.

NOGUEIRA, A. R. de A.

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DETERMINAÇÃO DE TANINO HIDROLISÁVEL EMPREGANDOANÁLISE POR INJEÇÃO EM FLUXOCarla M. Bossu 1,2 (IC), Edilene C. Ferreira 1,2  (PQ), Ana Rita A. Nogueira2 (PQ)Grupo de Análise Instrumental Aplicada1Departamento de Química, Universidade Federal de São Carlos, São Carlos, SP.2Embrapa Pecuária Sudeste, C.P. 339, 13560-970, São Carlos, SP.Os taninos hidrolisáveis constituem uma classe de taninos que em geral apresentamum carboidrato, normalmente a D-glicose, no centro de sua estrutura. Os gruposhidroxila dessas moléculas de carboidratos apresentam-se parcialmente ou totalmenteesterificados com grupos fenólicos como ácido gálico (galotaninos) ou ácido elágico(elagitaninos), os quais são denominados ácidos fenolcarboxílicos. Os taninoshidrolisáveis ocorrem na natureza em cascas de madeira, folhas, frutos e galhos e sãoapontados como responsáveis por diferentes efeitos anti-nutricionais1. Por outro lado,os efeitos biológicos causados por taninos hidrolisáveis são diferentes dos relatadospara outras classes de taninos, revelando, portanto, a importância de métodosespecíficos para a determinação dessa classe de taninos2. São poucos os métodosdescritos na literatura para a determinação de taninos hidrolisáveis. Dentre os métodoscolorimétricos, destaca-se apenas o método do iodato de potássio, descrito inicialmentepor HASLAM em 1965, mas só utilizado para fins analíticos em 1977 por BATE-SMITH3. Baseia-se na reação dos taninos hidrolisáveis (galotanino e/ou elagitanino)com uma solução de iodato de potássio a temperaturas próximas à 30oC. O produtodessa reação é um complexo colorido transiente com absorção máxima a 550 nm.Modificações foram propostas ao método original no sentido de melhorar a qualidadedos resultados analíticos produzidos4,5. No presente trabalho, um planejamentoexperimental foi empregado visando a mecanização do método colorimétrico baseadona reação entre o iodato de potássio e taninos hidrolisáveis empregando análise porinjeção em fluxo. Os parâmetros considerados mais importantes para a reação foram: ofluxo do KI, o volume de amostra, o fluxo transportador e a bobina reacional. Essesparâmetros foram avaliados em dois níveis utilizando método multivariado, baseado emum planejamento experimental do tipo 24. Os níveis máximo e mínimo avaliados foram:0,30 e 3,4 mL min-1 para o fluxo transportador, 0,88 e 6,0 mL min-1 para fluxo do KI, 50e 250 µL para o volume de amostra e 500 e 1500 µL para bobina de reação. Para todosos experimentos a temperatura foi fixada em 300C e o fator considerado como respostafoi o valor de absorbância. Após a conclusão dos experimentos delineados peloplanejamento 24, os parâmetros, volume de amostra e fluxo do KI foram apontadoscomo os mais importantes. Assim, utilizando planejamento experimental 22 estendidoem estrela com face centrada, esses parâmetros foram reavaliados. Os níveis máximoe mínimo considerados foram: 0,62 e 1,14 mL min-1 e 150 e 350 µL para o fluxo do KI eo volume de amostra, respectivamente. Os resultados mostraram que os maioresvalores de absorbância foram obtidos nas seguintes condições: 0,30 mL min-1 de fluxotransportador, 0,88 mL min-1 de fluxo de KI, 350 µL de volume de amostra e 500 µL debobina reacional com a reação catalisada por uma temperatura de 30oC. Nas condiçõesotimizadas o sistema apresentou boa repetibilidade, sendo os desvios entre as medidasinferiores a 3% (n=10), linearidade para a curva analítica entre 0 e 1000 mg L-1 de ácidotânico (R2 = 0,997), freqüência analítica de 15 amostras/hora e limite de quantificaçãode 24 mg L-1 de ácido tânico. Assim, destaca-se o aumento da freqüência analítica dosistema proposto, três vezes maior que a do método manual e a redução no consumode reagentes, com a conseqüente redução da produção de resíduos químicos. Essasvantagens tornam o sistema uma alternativa viável para a determinação de taninoshidrolisáveis em laboratórios de rotina. O sistema foi aplicado com sucesso emamostras de Stryphnodendron barbatimão, Eucalyptus citriodora and Phyllanthus niruricomumente utilizadas na medicina popular.PET, Embrapa[1] Mueller-Harvey, I. Anim. Feed Sci. Technol. 91(2001)3.[2] Amaral, A.C.F., Kuster, R.M., Gonçalves, J.L.S., Wigg, M.D. Fitoterapia 70(1999)293.[3] Bate-Smith, E. C. Phytochem. 16(1977)1421.[4]Willis, R. B. & Allen, P. R. Analyst, 123(1998)435.[5] Hartzfeld, P. W.; Forkner, R.; Hunter, M. D. & Hagerman, A. E. J. Agric. Food Chem.;50(2002)1785.

Determinação de tanino hidrolisável empregando análise por injeção em fluxo.

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