LAMEIRA, O. A.

NONATO, C. V. de F.

SILVA, G. M. da

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14º Seminário de Iniciação Científica da EMBRAPA 10 e 11 de agosto de 2010 Embrapa Amazônia Oriental, Belém-PA  ELIMINAÇÃO DE CONTAMINANTES MICROBIANOS EM GEMAS DE CURAUÁ (Ananas erectifolius L. B. SMITH)       Carla Viviane de Freitas Nonato¹, Osmar Alves Lameira², Giselly Mota da Silva3  ¹Acadêmico do Curso de Agronomia da Universidade Federal do Rural da Amazônia; Bolsista do CNPq/UFRA; E-mail: carlinha.nonato@yahoo.com.br ²Pesquisador Dr. da Embrapa Amazônia Oriental; E-mail: osmar@cpatu.embrapa.br 3Acadêmico do Curso de Agronomia da Universidade Federal do Rural da Amazônia; Bolsista do PIBIC/CNPq; E-mail: gisellymota@.com.br   Resumo: O presente trabalho teve como objetivo avaliar o comportamento de gemas de curauá utilizando diferentes métodos de desinfestação. Os tratamentos envolverão Derosal á 0,1%, desinfestação de rotina e sulfato de estreptomicina 100 mg.L-1. O meio de cultura utilizado nos ensaios foi o meio MS suplementado com 3 mg.L-1 de BAP, sendo adicionados em tubos de ensaio contendo 10mL de meio de cultura cada e pH ajustado para 5,8 antes da autoclavagem. Foram tiradas taxas médias de cada tratamento para a avaliação de percentagem de contaminação por agentes microbianos e oxidação. Os tratamentos utilizando derosal com a desinfestação de rotina, e sulfato de estreptomicina com desinfestação de rotina foram os mais eficientes com 0% de contaminação. Foi possível observar que em todos os tratamentos as taxas foram elevadas, sendo o primeiro tratamento com maior taxa, 80%. Em gemas axilares de curauá desinfestadas em derosal e desinfestação de rotina, sulfato de estreptomicina e desinfestação de rotina se obteve a menor taxa de contaminação, 0%. Todos os tratamentos apresentaram altas taxas de oxidação, sendo o primeiro tratamento com maior taxa, 80%.  Palavras-chave: Ananas erectifolius, desinfestação, micropropagação  Introdução     O curauá (Ananas erectifolius) é uma planta de origem amazônica pertencente à família Bromiliaceae. Há dois tipos de curauá, um de folhas roxo-avermelhadas, denominadas de curauá roxo, e outro de folhas verdes claras, denominado de curauá branco. Este último apresenta folhas de maior maciez, com fibras mais claras e menos resistentes que as do roxo (ALBIM et al., 2005).       O curauá é de alto interesse econômico, especialmente para a indústria automobilística, pois produz uma fibra de excelente qualidade com resistência semelhante ao vidro, podendo ainda ser 14º Seminário de Iniciação Científica da EMBRAPA 10 e 11 de agosto de 2010 Embrapa Amazônia Oriental, Belém-PA  utilizada como celulose e ração animal. A propagação vegetativa utilizando técnicas de cultura de tecidos pode ser um valioso instrumento na propagação clonal rápida de mudas de curauá, em larga escala (LAMEIRA et al., 2000). A muda micropropagada, produzida por cultura de tecidos, permite alcançar a qualidade desejada, pois, quando de boa procedência tem certificada a qualidade genética e fitossanitária. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o comportamento de gemas de curauá utilizando diferentes métodos de desinfestação na eliminação de contaminantes microbianos.   Material e Métodos O experimento foi conduzido no laboratório de recursos genéticos e biotecnologia da Embrapa Amazônia Oriental, envolvendo plantas de curauá obtidas do banco de germoplasma da instituição. O meio de cultura utilizado nos ensaios foi o meio MS (Murashige e Skoog, 1962), com sacarose a 3 % sendo adicionados em tubos de ensaio de 17 cm, contendo 10mL de meio de cultura cada, e pH ajustado para 5,8 antes da autoclavagem. Com o auxilio de um bisturi, retirou-se gemas axilares do caule desprovido de folhas (‘tolete’) das plantas de curauá, as quais foram lavadas em água corrente e sabão neutro. Em câmara de fluxo laminar fez-se a desinfestação de rotina, onde utilizou-se álcool 70% por um minuto e hipoclorito de sódio a 2,5% durante 15 minutos em agitação, sendo lavadas em água autoclavada por cinco vezes. Para a realização do experimento foram utilizados quatro tratamentos, onde: 1) Imersão em Derosal á 0,1% por 20 minutos, desinfestação de rotina e imersão em sulfato de estreptomicina 100 mg.L-1 por 2 minutos; 2) Imersão em Derosal á 0,1% por 20minutos e desinfestação de rotina; 3) Desinfestação de rotina e imersão em sulfato de estreptomicina 100 mg.L-1 por 2 minutos; 4) Desinfestação de rotina. Em seguida as gemas foram inoculadas ao meio de cultura MS, após esse processo os tubos foram colocados em sala de crescimento sob fotoperíodo de 16h.luz.dia-1 com intensidade luminosa de 25µmol.m2.s-1 de irradiância e temperatura de 25+3°C, pelo período de 20 dias. Foram analisadas taxas médias de cada tratamento para a avaliação de percentagem de contaminação por agentes microbianos e oxidação.   Resultados e Discussão Para a percentagem de contaminação, foi observado que os tratamentos utilizando derosal com a desinfestação de rotina, e sulfato de estreptomicina com desinfestação de rotina foram os mais 14º Seminário de Iniciação Científica da EMBRAPA 10 e 11 de agosto de 2010 Embrapa Amazônia Oriental, Belém-PA  eficientes, 0% de contaminação (Tabela 1). Os demais tratamentos mostraram-se menos eficientes com 33,33% de perdas causadas por contaminantes. Segundo Grattapaglia & Machado (1998) recomenda-se o uso de fungicidas e antibióticos tanto para a desinfestação quanto, adicionados ao meio de cultura, para o controle da contaminação por fungos e bactérias.   Tabela 1 Percentual de contaminação por bactérias e fungos em gemas de curauá.  Embrapa Amazônia Oriental, 2010.  Tratamento Contaminação (%) Derosal, desinfestação de rotina e sulfato de estreptomicina 33,33  Derosal e desinfestação de rotina 0 Desinfestação de rotina e sulfato de estreptomicina 0 Desinfestação de rotina 33,33   Avaliando-se o percentual de gemas oxidadas foi possível observar que em todos os tratamentos as taxas foram elevadas (Tabela 2), sendo o primeiro tratamento com maior taxa, 80%.  Tabela 2 Percentual de oxidação em gemas de curauá.  Embrapa Amazônia Oriental, 2010.  Tratamento Contaminação (%) Derosal, desinfestação de rotina e sulfato de estreptomicina 80 Derosal e desinfestação de rotina  60 Desinfestação de rotina e sulfato de estreptomicina 73,33 Desinfestação de rotina 73,33  Tal oxidação pode ser resultante da liberação de compostos fenólicos in vitro, precursores da síntese de lignina pelo tecido injuriado. Os compostos fenólicos sofrem oxidação pelas enzimas polifenases, produzindo substâncias tóxicas que normalmente inibem o crescimento dos explantes, ocasionando, não raramente, a morte dos mesmos (COSTA et al., 2006). A oxidação fenólica pode ser minimizada pela redução de danos mecânicos e químicos nos explantes, pela modificação de ambientes, e/ou pelo uso de antioxidantes (BASSAN et al., 2006). 14º Seminário de Iniciação Científica da EMBRAPA 10 e 11 de agosto de 2010 Embrapa Amazônia Oriental, Belém-PA   Conclusões Gemas axilares de curauá desinfetadas em derosal e desinfestação de rotina, sulfato de estreptomicina e desinfestação de rotina apresentaram a menor taxa de contaminação, 0%. Todos os tratamentos apresentaram altas taxas de oxidação, sendo o tratamento utilizando derosal, desinfestação de rotina e sulfato de estreptomicina apresentaram maior taxa, 80%.  Agradecimentos Ao CNPq pela bolsa de Iniciação Científica.  Referências Bibliográficas ALBIM, E.M.S.; LAMEIRA, O.A.; REIS, I.N.R.S.; PANTOJA, S.S.P. Assepsia e estabelecimento em vitro de gemas axilares de curauá (Annanas erectifolius L.B, Smith)- Bromeliaceae. Rev. Ciênc. agrár., Belém, n. 43, p.18, 2005.  BASSAN, J.S.; REINIGER, L.R.S.; ROCHA, B.H.G.; SEVERO, C.R.P.; FLÔRES, A.V. Oxidação fenólica, tipo de explante e meios de cultura no estabelecimento in vitro de Canafístula (Peltophorum dubirum (SPRENG/TAUB). Ciência Florestal, Santa Maria, v.16, n.4, p.381-390, 2006.  COSTA, F.H. da S.; PEREIRA, J.E.S.; PEREIRA, M.A.A.; OLIVEIRA, J.P. de. Efeito da interação entre carvão ativado e n6-benzilaminopurina na propagação in vitro de bananeira, cv. grand naine (AAA) Rev. Bras. Frutic., Jaboticabal - SP, v. 28, n. 2, p. 280-283, 2006.  GRATTAPAGLIA, D.; MACHADO, M.A. Micropropagação. In: TORRES, A. C.; CALDAS, L. S.; BUSO, J. A. Cultura de tecidos e transformação genética de plantas. Brasília, DF: Embrapa-SPI, v. 1, p. 183-260. 1998.  

Eliminação de contaminantes microbianos em gemas de Curauá (Anonas erectifolius L. B. Smith).

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