ALBUQUERQUE, P. S. B. de

ALVES, R. M.

KEMPNER, T.

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14o Seminário de Iniciação Científica da EMBRAPA 10 e 11 de agosto de 2010 Embrapa Amazônia Oriental, Belém-PA     FENOTIPAGEM DE PLANTAS DE CUPUAÇUZEIRO OBTIDAS DA POPULAÇÃO CONTRASTANTE PARA RESISTÊNCIA A Moniliophtora perniciosa.  Tamiris Kempner1, Paulo Sérgio Bevilaqua de Albuquerque2, Rafael Moysés Alves3 1 Acadêmica do 7o semestre do curso de Agronomia da Universidade Federal do Pará; Bolsista da EMBRAPA; e-mail: tamireskempner@yahoo.com.br 2 Pesquisador, ERJOH, CEPLAC, BR 316 Km 17, CP 46, Marituba, PA, CEP 67105-970. E-mail: psbalbuq@oi.com.br 3 Pesquisador da EMBRAPA Amazônia Oriental; Trav.Eneás Pinheiro S/N; CEP 66095-100, Belém-PA; e-mail: rafael@cpatu.embrapa.br    Resumo: Com a expansão da cultura do cupuaçuzeiro aumentaram também os desafios desta cultura como, por exemplo, a vassoura-de-bruxa, principal doença. Com objetivo de identificar QTL´s relacionados com resistência do cupuaçuzeiro à Moniliophtora perniciosa foram avaliadas quatro populações originadas dos cruzamentos entre quatro clones resistentes lançados pela Embrapa Amazônia Oriental: Coari (174), Codajas (186), Manacapuru (215) e Belém (286) e um clone  suscetível (1074). As inoculações e avaliações foram realizadas em casa de vegetação na CEPLAC – ERJOH. Cada plântula foi inoculada com 30 µL de uma suspensão de 1 x 105 basidiósporos de M. perniciosa/ml. Das 269 plântulas avaliadas 49 apresentaram algum tipo de sintoma da doença, perfazendo um total de 18,2%. No cruzamento dos clones 174 x 1074 pode-se observar um maior número de plântulas com sintomas, totalizando 27,6%, enquanto que no cruzamento 186 x 1074 a incidência da doença foi de apenas 1,8%. Dentre os genótipos avaliados, o clone 186 apresentou os maiores níveis de resistência ao patógeno, entretanto, para efeito de mapeamento foram escolhidas as progênies do cruzamento entre os clones 174 e 1074, por apresentarem uma maior segregação dos níveis de resistência em suas progênies.  Palavras-chave: Moniliophtora perniciosa, progênies, resistência, Theobroma grandiflorum  Introdução O cupuaçuzeiro (Theobroma grandiflorum (Willd ex Spreng) Schum), uma das fruteiras nativas da região amazônica mais apreciada na região, tem sua polpa empregada na produção de sucos, sorvetes, geléias, iogurtes, compotas, cremes licores e tortas e as sementes, utilizadas na fabricação de chocolate em pó e em tablete, bem como na produção de cosméticos (LIMA & SOUZA, 1998). Porém, a expansão das áreas cultivadas, devido ao aumento da demanda, tem aumentado os problemas com doenças, principalmente a vassoura-de-bruxa causada pelo fungo Moniliophtora perniciosa causador 14o Seminário de Iniciação Científica da EMBRAPA 10 e 11 de agosto de 2010 Embrapa Amazônia Oriental, Belém-PA     da vassoura-de-bruxa que é considerada a principal doença da cultura, gerando grandes prejuizos econômicos, especialmente em pomares mal conduzidos.  A determinação de loci controladores de características quantitativas (QTLs) associada ao uso de mapas genéticos obtidos por marcadores moleculares permite identificar, mapear e quantificar o efeito dos QTLs (FERREIRA & GRATTAPAGLIA, 1998). No caso do patossistema cacaueiro x M. perniciosa, QRLs (loci quantitativos de resistência), foram localizados nos grupos de ligações I e IX de uma população F2 do cruzamento entre os clones „SCA 6‟ e „ICS 1‟ (QUEIROZ et al., 2003; BROWN et al., 2005). No entanto, a resistência do parental „SCA 6‟, tem sido sistematicamente “quebrada” pelo M. perniciosa em países como Equador, Peru e região Norte do Brasil (BARTLEY, 1981; RIOS-RUIZ, 2001). Esse trabalho teve o objetivo de realizar a primeira etapa para a identificação de QTL´s relacionados com resistência do cupuaçuzeiro à M. perniciosa, separando duas populações: uma susceptível e outra resistente a essa doença.  Material e Métodos Foram avaliadas plântulas, oriundas de polinização controlada, sendo 127 plântulas do cruzamento entre os clones 174 e 1074, 55 plântulas do cruzamento 215 e 1074, 57 plântulas do cruzamento 186 e 1074 e 30 plântulas do cruzamento 286 e 1074, onde o clone 1074 é suscetível a vassoura de bruxa e os demais são considerados resistentes a M. perniciosa. As inoculações e avaliações foram realizadas entre julho e outubro de 2009, em casa de vegetação da CEPLAC – ERJOH, situada na BR-316 Km 17, Marituba, Pará. Com o auxílio de uma micropipeta, cada plântula foi inoculada com 30 µL de uma suspensão de 1 x 105 basidiósporos/mL do fungo. A suspensão foi distribuída nos ramos jovens na região das axilas das folhas e nas brotações terminais. Após as inoculações, as plantas foram transferidas para uma câmara com 100 % de umidade relativa durante 24 horas. Em seguida, foram transportadas para casa-de-vegetação, onde permaneceram até serem avaliadas. As avaliações dos níveis de resistência das progênies foram realizadas após 60 dias das inoculações. Foram utilizadas as seguintes variáveis: incidência de plântulas com sintomas (SINT), incidência de plântulas com vassoura terminal (VT), vassoura axilar (VA), pecíolo inchado (PI), engrossamento (ENG) e pulvilo inchado (PuI).  14o Seminário de Iniciação Científica da EMBRAPA 10 e 11 de agosto de 2010 Embrapa Amazônia Oriental, Belém-PA     Resultados e Discussão A Tabela 1 apresenta o número e porcentagem de plantas com sintomas de vassoura-de-bruxa em progênies de cupuaçuzeiro. Nela pode-se observar que, das 127 plântulas do cruzamento 174 x 1074,  35 (27,6%) apresentaram sintomas da vassoura-de-bruxa, das 55 plântulas do cruzamento 215 x 1074, 11 apresentaram sintomas, das 57 plântulas do cruzamento 186 x 1074, apenas uma apresentou sintoma e das 30 plântulas do cruzamento 286 x 1074, duas apresentaram sintomas. Em todo o experimento, das 269 plântulas estudadas, 49 apresentaram sintomas da vassoura-de-bruxa, perfazendo um total de 18,2%. Os sintomas de vassoura terminal, pecíolo inchado e engrossamento foram os que tiveram maior incidência, considerados boas variáveis para a avaliação, enquanto que os sintomas de vassoura axilar e pulvilo inchado apresentaram valores insignificantes para a avaliação de resistência.  Tabela 1 Número e Porcentagem de Plantas com sintomas de vassoura-de-bruxa.  Plantas   Variáveis 1 (174x1074) 2 (215x1074) 3 (186x1074) 4 (286x1074) TOTAL nº de plantas % nº de  plantas % nº de  plantas % nº de  plantas % nº de  plantas % Plantas 127  55  57  30  269  Inc. Sintomas 35 27.6 11 20.0 1 1.8 2 6.7 49 18.2 VT 35 27.6 11 20.0 1 1.8 2 6.7 49 18.2 VA 7 5.5 0 0.0 0 0.0 0 0.0 7 2.6 PI 32 25.2 11 8.7 1 0.8 2 1.6 46 17.1 ENG 33 26.0 11 8.7 0 0.0 2 1.6 46 17.1 PUL I 0 0.0 0 0.0 0 0.0 0 0.0 0 0.0 Legenda: VT: vassoura terminal; VA: vassoura axilar; PI: pecíolo inchado; ENG: engrossamento; PUL i: Pulvilo inchado.    No cruzamento dos clones 174 x 1074 foi possível observar um maior número de plantas com sintomas, totalizando 27,6%, enquanto que no cruzamento 186 x 1074 apenas 1,8% das plantas apresentaram sintoma. A partir disso, pode-se inferir que o clone 186 possui mais genes de resistência em relação aos outros clones resistentes, por isso suas progênies demonstraram-se mais tolerantes. Como o primeiro cruzamento deu origem a  plantas com uma maior segregação dos níveis de resistência, foi considerada mais adequadas para estudos de mapeamento genético.  Conclusões As variáveis vassoura terminal, pecíolo inchado e engrossamento foram as que melhor discriminaram as duas populações (resistente e susceptível), podendo ser consideradas boas variáveis 14o Seminário de Iniciação Científica da EMBRAPA 10 e 11 de agosto de 2010 Embrapa Amazônia Oriental, Belém-PA     para a avaliação de resistência a M. perniciosa. Por outro lado, as variáveis pulvilo inchado e vassoura axilar foram insuficientes para a avaliação de resistência.  As plântulas do cruzamento 186 x 1074 apresentaram uma menor incidência de vassoura-de-bruxa, o que pode estar relacionado a um maior número de genes de resistência do clone 186 (Codajas) em relação às outras progênies.  Pela segregação que apresentaram as plântulas do cruzamento 174 x 1074 se mostraram mais adequadas ao processo de mapeamento genético que será realizado.  Referências Bibliográficas BARTLEY, B.G.D. Status of genetic resistance in cacao to Crinipellis perniciosa (Stahel) Singer. In: INTERNATIONAL COCOA RESEARCH CONFERENCE, 6.,  1981, Cartagena. Proceedings… Lagos: Cocoa Producers`Alliance, 1981, p.56-69.  BROWN, J.S.; SCHNELL, R.J.; MOTAMAYOR, J.C.; LOPES, U.; KUHN, D.N.; BORRONE, J.W. Resistance gene mapping for witches`broom disease in Theobroma cacao L. in an F2 population using SSR markers and candidate genes. Journal of the American Society for Horticultural Science, St. Joseph, v.130, n.3, p.366-373, 2005.  FERREIRA, M.E.; GRATTAPAGLIA, D. Introdução ao uso de marcadores moleculares em análise genética. 3ª ed. Documento. Embrapa – Cenargen, Brasília, n.20, 220p., 1998.  LIMA, M.I.P.M.; SOUZA, A.G.C. Diagnose das principais doenças do cupuaçuzeiro (Theobroma grandiflorum (willd. Ex spreng. Schum.) e seu controle. Manaus: EMBRAPA-CPAA, 1998. 18p.  QUEIROZ, V.T.; GUIMARÃES, C.T.; AHNERT, D.; SCHUSTER, I.; DAHER, R.T.; PEREIRA, M.G.; MIRANDA, V.R.M.; LOGUÉRCIO, L.L.; BARROS, E.G.; MOREIRA, M.A. Identification of a major QTL in cocoa (Theobroma cacao L.) associated with resistance to witches‟ broom disease. Plant Breeding, Berlin, v.122, n.3, p.268-272, 2003.  RIOS-RUIZ, R.A. Melhoramento para resistência a doenças. In: DIAS, L.A.S. (Ed.). Melhoramento genético do cacaueiro. Viçosa: FUNAPE, UFV, 2001. cap.7, p.290-324. 

Fenotipagem de plantas de cupuaçuzeiro obtidas da população contrastante para resistência a Moniliophtora perniciosa.

http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/bitstream/doc/880049/1/TAMIRESKEMPNER.pdf

Fenotipagem de plantas de cupuaçuzeiro obtidas da população contrastante para resistência a Moniliophtora perniciosa.

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