CARON, L.

SCHAEFER, R.

SCHIOCHET, M. F.

SILVA, V. S.

SILVEIRA, S.

ZANELLA, J. R. C.

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JINC – 4ª Jornada de Iniciação Científica Embrapa/UnC – 21 de outubro de 2010 – Concórdia, SCDETECÇÃO DE ANTICORPOS CONTRA O VÍRUS DA INFLUENZA SUÍNA EM REBANHOSSUÍNOSSilveira, S.1; Schaefer, R.2; Schiochet, M. F.2; Silva, V. S.2 ; Caron, L2; Ciacci-Zanella, J. R.21Graduanda em Ciências Biológicas pela Universidade do Contestado, Concórdia, Estagiária da Embrapa Suínos eAves,  Bolsista CNPq/ PIBIC; 2Embrapa Suínos e Aves, Concórdia, SC. E-mail: rejane@cnpsa.embrapa.brPalavras-chaves: influenza suína, ELISA, HI.IntroduçãoO vírus da influenza suína (SIV) é um patógeno altamenteinfeccioso, que acomete suínos no mundo inteirocausando uma infecção respiratória aguda. O SIV éendêmico em suínos onde, atualmente, circulam trêssubtipos virais, A/H1N1, A/H3N2 e A/H1N2 (1). Os suínossão considerados agentes de mixagem do SIV porpermitirem a recombinação do vírus de influenza deorigem aviária e humana, uma vez que apresentamreceptores celulares para ambos os tipos de vírus (2),possibilitando, dessa forma, o surgimento de novos vírus.Por isso, é importante realizar o monitoramento dos vírusinfluenza circulantes em suínos. Testes sorológicos sãofrequentemente utilizados para a detecção de atividadeviral em rebanhos suínos, onde muitas vezes, o víruspode circular com pouca ou nenhuma evidência de sinaisclínicos nos animais. No Brasil, em 2002, Brentano et al.(3) avaliaram 1419 soros de suínos (coletados entre 1996e 1999) provenientes de 51 granjas comerciais de oitoestados brasileiros (RS, SC, PR, SP, MG, MT, MS e GO).Foram identificados nestes soros, anticorpos contra ossubtipos H1N1 e H3N2, sendo o subtipo H3N2 o maisprevalente em suínos naquela ocasião.O objetivo do presente trabalho foi detectar a presença deanticorpos contra o SIV em amostras de soro suínoarmazenadas na soroteca da Embrapa Suínos e Aves,identificando os subtipos virais mais prevalentes.Material e MétodosPara este estudo, foram selecionadas 394 amostras desoros suíno, coletadas nos anos de 2002 e 2008,provenientes  de 21 granjas comerciais de suínos, com ousem problemas respiratórios. Foram analisados 19 sorospor granja. Para triagem dos soros foi utilizado um kit deELISA comercial (Laboratórios Hipra ® - Porto Alegre, RS,Brasil), cedido para fins de pesquisa, para detecção deanticorpos contra o SIV, sendo o ensaio realizado deacordo com o protocolo recomendado pelo fabricante.Para identificação dos subtipos virais de SIV foi realizadoo teste de Inibição da Hemaglutinação (HI), como segue:todos os soros foram previamente tratados com periodatode potássio e tripsina, conforme protocolos padrãoconhecidos, resultando numa diluição inicial de 1:10. Emseguida, os soros foram testados em microplacas defundo em “V”, em diluições duplas, de 1:20 a 1:20480,contra 4 unidades hemaglutinantes dos vírus de influenzaH1N1 (A/sw/IA/31) e H3N2 (A/sw/IA/8548-2), importadosdo National Veterinary Services Laboratories (NVSL/USDA/ Estados Unidos). Soros com títulos iguais ouinferiores a 1:20 foram considerados negativos (reaçãoinespecífica).Resultados e DiscussãoOs resultados da sorologia de SIV são demonstrados naTabela 1. Anticorpos contra o SIV foram identificados em6/394 soros (1,52%), pelo teste de ELISA. No teste de HI,foram identificados anticorpos contra o subtipo H3N2 em5/6 soros testados (títulos de anticorpos de 1:320 a1:2560). Uma amostra de soro apresentou título deanticorpos contra os dois subtipos virais (H1: 1:40 e H3:1:320).Uma das amostras consideradas positivas peloteste de ELISA apresentou um resultado muito próximo doponto de corte do teste, sendo confirmada como negativapelo teste de HI (para os dois subtipos virais). Entretanto,alguns soros considerados negativos pelo teste de ELISAforam positivos pelo teste de HI, para os dois subtiposvirais (dados não apresentados). Diferenças antigênicasentre o vírus utilizado no teste de ELISA e amostrascirculantes no Brasil poderiam justificar este achado (4).Tabela 1. Resultados do teste de ELISA e HI para Influenza.Nº soros positivos/testados (% positivos)Ano ELISA HI/ H3N2 HI/ H1N1 HI/ H1N1+H3N22002 02/38(5,26%) 2/2 0/2 0/22008 04/356(1,12%) 3/4 1/4 1/4Total 06/394(1,52%) 5/6 1/6 1/6ConclusõesO vírus influenza é endêmico em suínos fazendo parte docomplexo respiratório suíno. Para um estudo mais amplo,visando avaliar os subtipos de SIV predominantes emsuínos é necessário testar um número maior de amostrasde soro, utilizando como antígeno, no teste de HI,amostras de vírus representativas de cada regiãogeográfica, evitando assim o surgimento de resultadosfalso-negativos.Referências1. REETH, K.V. et al. Seroprevalence of H1N1, H3N2and H1N2 influenza viruses in pigs in seven Europeancountries in 2002-2003. Influenza and OtherRespiratory Viruses, v.2, p.99-105, 2008.2. BROWN, I.H. The epidemiology and evolution ofinfluenza viruses in pigs. Veterinary Microbiology,v.74, p. 29-46, 2000.3. BRENTANO, L. et al. Levantamentosoroepidemiológico para Coronavírus respiratório e daGastroenterite Transmissível e dos Vírus da InfluenzaH3N2 e H1N1 em rebanhos suínos no Brasil.Concórdia: Embrapa Suínos e Aves, 2002. 6p.(Embrapa Suínos e Aves. Comunicado Técnico,306).4. ERICKSON, G.A et al. How to evaluate herds usingswine influenza sorology. Journal of Swine Healthand Production,13(4),p.222-224,2005.

Detecção de anticorpos contra o vírus da influenza suína em rebanhos suínos.

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Detecção de anticorpos contra o vírus da influenza suína em rebanhos suínos.

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