1 póster presentado en las III Xornadas de Investigación BioIntegraSaúde 2015, Vigo 16 xuño 2015.-- E. López-Senra ... et al.FP7/REGPOT-2012-2013.1 (nº 316265, BIOCAPS); UE-INTERREG 2011-1/164 MARMED; Ministerio de Ciencia e Innovación (Project MAT2010-18281)Peer reviewe

González Sotelo, Carmen

González, P.

López-Senra, E.

Pérez Martín, Ricardo Isaac

González, Pio

Digital.CSIC

 1Grupo Novos Materiais, Dpt. Física Aplicada, Escola de Enxeñaria Industrial, Instituto de Investigación Biomédica (IBI), Univ. de Vigo. 23B´s Research Group-Biomaterials, Biodegradables and Biomimetics, University of Minho, Headquarters of the European Institute of Excellence on Tissue Engineering and Regenerative Medicine, AvePark-Parque de Ciência e Tecnologia GMR, Portugal. 3Instituto de Investigacións Mariñas (CSIC), Eduardo Cabello 6, 36208-VIGO (Spain)  Andamios porosos (apatita/colágeno) de origen marino para aplicaciones biomédicas E. López-Senra1, G.S. Diogo2, R. Canadas2, T.H. Silva2, J. Moreira-Silva2, R.L. Reis2, R. P. Martín3, C.G. Sotelo3, M. López Álvarez1, J. Serra1, P. González1   INTRODUCCION MATERIAL Y MÉTODOS Molienda  (molino de bolas) Pirolización Tamizado Apatita marina (HA) <63 µm Digestión con NaOH + Extracción Ac. acético Diálisis Colágeno Soluble Ácido (ASC) Prionace glauca Valorización de subproductos  Colágeno ASC Bioapatita  (granulado < 63µm) Reticulador Mezcla Pocillos Congelación a -80ºC Liofilización  Andamio Poroso Formulaciones ASC/HA 30% HA – 70% ASC 50% HA – 50% ASC 70% HA – 30% ASC Agente Reticulante EDC/NHS 25 % 12,5% HMDI 5%   1% Fabricación de scaffolds  Viabilidad para la obtención de scaffolds HA/Colágeno a partir de la valorización de subproductos pesqueros.   Distribución homogénea de las partículas de apatita en la matriz de colágeno contribuyendo a su estabilidad y tamaño de poro de los scaffolds dentro del rango de interés para la regeneración de tejido óseo.   Los resultados preliminares de los ensayos in vitro mostraron ausencia de citotoxicidad. Las estructuras reticuladas con 12,5% EDC/NHS promovieron mayor mineralización en SBF y sus características morfológicas (tamaño de poro, porosidad e interconectividad) lo convierten en el mejor candidato para los estudios de diferenciación celular.  RESULTADOS FP7/REGPOT-2012-2013.1 (nº 316265, BIOCAPS) Ministerio de Ciencia e Innovación  (Project MAT2010-18281) UE-INTERREG 2011-1/164 MARMED  CONCLUSIONES Reticulante HA/ASC Tamaño de poro (µm) Porosidad (%) Interconectividad (%) 12.5%EDC-NHS  30/70 83.4 ± 11.8 78.3 ± 5.7 54.3 ± 1.9 50/50 126.3 ± 22.5 85.4 ± 3.2 96.8 ± 1.8 70/30 104.4 ± 15.7 73.9 ± 1.9 85.4 ± 2.4 Caracterización de esponjas HA/ASC de origen marino reticuladas con EDC/NHS,  mediante Microscopio electrónico de Barrido (SEM) y análisis micro-CT.  A) Micrografías obtenidas mediante SEM de esponjas HA/ASC reticuladas con 12,5%, tras haber sido sumergidas en medio corporal simulado (Simulated Body Fluid SBF). B) Micrografías obtenidas mediante análisis micro-CT de las mismas esponjas HA/ASC. La imagen en color amarillo se corresponde con el material de menor densidad (colágeno ASC), mientras que las imágenes en color azulado/violeta corresponden al material de mayor densidad (HA).  Valores de densidad óptica de proliferación celular de SaOS-2 tras realización de ensayo de citotoxicidad por contacto directo con esponjas HA/ASC de origen marino reticuladas con 12,5% ED/NHS, mediante siembra en fondo de pocillo a  1, 3 y 7 días de cultivo.      Ingeniería de Tejidos Valores dentro del rango de interés para regeneración de tejido óseo Las esponjas han mostrado ausencia de citotoxicidad  Nuestro objetivo Biomineral Matriz orgánica Esponja o Andamio Fabricar un scaffold biomimético, bioactivo y biocompatible para regeneración de tejido óseo. Regeneración total o parcial de tejido vivo Ca10-x (PO4) x(HPO4) 6-x(OH) 2-x HIDROXIAPATITA Tejido óseo Colágeno Tipo I Análisis micro-CT B) 30% HA 50% HA 70% HA Inicial Después de 14 días  en SBF A) Scaffolds bioactivos después de 14 días en SBF Distribución homogénea de la bioApatita en la matriz de colágeno 30% HA 50% HA 70% HA En la tabla se muestran los resultados obtenidos tras la realización del análisis micro-CT . 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1 day 3 days  7 days Metabolic Activity (abs) Time Point 12,5% EDC/NHS Live cells 70HA-30ASC 50HA-50ASC  30HA-70ASC Dead cells 

Andamios porosos (apatita/colágeno) de origen marino para aplicaciones biomédicas

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