p.127-130Se describen tres metodologías para la valoración de fósforo en vegetales. Al comparar los valores obtenidos de fósforo para cada técnica y observando la concordancia significativa entre los mismos se propone hacer una mineralización húmeda de la muestra y de terminar el contenido de fósforo mediante la medición espectrofotométrica del complejo amarillo de fosfovanadomolibdeno

Fabrizio de Iorio, Alicia Rosa

Rendina, Alicia Elena

School of Agriculture, University of Buenos Aires

127
De t e r m i n a c i ó n  Ab s o r c i o m e t r i c a  de Fo s f o r o  en Pl a n t a s
ALICIA B. RENDINA y ALICIA F. de IORIO (*)
Recibido: 30-11-88 
Aceptado: 29-12-88
p
RESUMEN
Se describen tres metodologías para la va loración  de fósforo en vegetales.
A l comparar ¡os valores obtenidos de fósforo para cada técnica y  
observando la concordancia s ig n if ica t iv a  entre los mismos se propone hacer una 
m inera lización  húmeda de la muestra y determ inar el contenido de fósforo 
mediante la  medición espectrofotométrica del complejo am arillo  de 
fosfovanadomolibdeno.
Palabras clave: fósforo, vegetales, análisis, aétodos
ABSORCIOMETRIC DETERMINATION OF PHOSPHORUS IN PLANTS 
SUMMARY
Three methodologies for vegetable phosphorus appraisement are described. 
Based on the comparison of obtained phosphorus values for each technique 
and hav ing  observed a s ig n if ican t f it t in g  among them, it is proposed to make 
a wet m inera lization  of the sample and determine the phosphorus contents 
through the spectrophotometric measurement of the yellow  complex of molybdenum 
phosphovenadate.
Key words: phosphorus, vegetable, analysis, methods.
INTRODUCCION
El fósforo es un elemento fundamen­
tal para la vida vegetal y animal, es­
pecialmente el que se encuentra en 
forma orgánica ya que interviene en 
distintas reacciones metabólicas que- 
implican transferencia de energía.
La deficiencia de fósforo en las 
plantas puede conducir a una mala pro­
ducción de semillas, frutos y forra­
jes.
Por otro lado, este elemento es 
considerado esencial para el organismo 
animal siendo su principal función, 
junto con el calcio, la de proporcio­
nar forma y rigidez a los huesos.
El objetivo de este trabajo es ana­
lizar si el contenido de fósforo puede 
evaluarse mediante una mineralización 
húmeda de la muestra y posterior de­
terminación espectrofotomética del 
complejo amarillo de fosfovanadomolib­
deno, como método alternativo a los 
propuestos por la bibliografía consul­
tada. (Burns y Hutsby, 1986).
W  Cátedra de Química Analítica. Facultad de Agronomía. Universidad de Buenos Aires 
San Martín 4453. (1417) Buenos Aires. - Argentina -
Rev.Facultad Agronomía, 9(3):127-130,1988
128 A L I C I A  E .  R E N D I N A  y A L I C I A  F .  de I O R I O
MATERIALES Y METODOS 
Mineralización y Solubilización de la 
Materia Vegetal
Mineralización Húmeda
Se pesa 1,000 g de materia vegetal 
en un erlenmeyer de 125 ml y se agre­
gan 10 m l de una mezcla de ácido per- 
clórico al 70% (d:l,67) y ácido nítri­
co concentrado en la relación 1 a 5, 
respectivamente. Se calienta en plan­
cha eléctrica a 150°C, se retira antes 
de llegar a sequedad.
Se agregan aproximadamente 10 mi de 
agua, se trasvasa a un matraz aforado 
de 50 m l y se enrasa con agua.
Se filtra para retener la sílice, 
recogiendo el filtrado en un frasco 
con tapa.
Calcinación
Se pesa en cápsula de porcelana 
l,000g de muestra finamente molida y 
se humedece con 3 ml de nitrato de 
magnesio al 50% en agua. Se calienta 
en plancha eléctrica elevando lenta­
mente la temperatura hasta que aparez­
can algunas cenizas blancas. Luego se 
introduce en una mufla entre 500 y 
600°C durante una hora, el residuo de­
be ser blanco. (Chapman, 1979).
Ese residuo se extrae con 3 ml de 
ácido nítrico 12N y 2 m l de agua enla 
misma cápsula.
Se lleva a sequedad en baño de va­
por durante media hora, se toma con 
agua y se trasvasa a un matraz aforado 
de 50 m l .
Se filtra y se recoge el filtrado 
en un frasco con tapa.
Evaluación del Contenido de Fósforo
Método 1
Se toma una alícuota del filtrado 
proveniente de la mineralización húme­
da (5 ó 10 m l según el contenido de
fósforo de la muestra), se trasfiere a 
un matraz aforado de 50 mi, se agregan 
2 ml de mezcla reductora y 5 mi de mo- 
libdato de amonio al 2,5%. Se lleva a 
volumen con agua.
La absórbemela (Chapman, 1979), se 
mide a los 20 minutos a 680 nm.
Los patrones de fósforo se preparem 
a partir de 2, 4, 6 y 8 ml de la su- 
ciÓn de 2Cu gP/ml obtenida por dilución 
de otra de lOOOug P/ml.
Reactivos
Solución de molibdato de amonio al
2,5%. (Chapman, 1979).
Disolver 25 g de (NH4)2Mo7o24 .
24H20 en 200 ml de agua tibia. Agregar
500¿'ml de H2 SO ION y llevar a un litro  4en matraz aforado.
Mezcla reductora. (Chapman, 1979).
Pesar 6,5g de Na2HSO3 , 0,3g de 
Na2SO3 y 0,075g de ácido 1 -amino- 
2naftol -4sulfónico, mezclar y homoge- 
neizar en un mortero.
Pesar 6,5g de la mezcla y disolver 
en 50 m l de agua, dejar en reposo 30 
minutos antes de usar.
Patrón de fósforo
Disolver 4,394g de KH2PO4 y agregar 
10 m l de ácido sulfúrico ION llevar a 
un litro en matraz aforado con agua.
Método 2
Se toma una alícuota del filtrado 
proveniente de la calcinación (aproxi­
madamente 10 m l según el contenido de 
fósforo de la muestra) y luego se pro­
cede según el método 1.
Método 3
Se toma una alícuota de filtrado 
proveniente de la mineralización húme­
da, de la misma forma que en el método 
1.
Rev.Facultad Agronomía, 9(3): 127-130,1988
Determinación absorciométrica de fósforo en plantas 129
Se agregan 10 ml del reactivo mo- 
libdato de amonio y vanadato de amonio 
y se lleva a volumen con agua.
La absorbancia se mide luego de 30 
minutos en un espectrofotómetro a 470 
nm.
Los patrones se preparan a partir 
de 0,5, 10, 15 y 20 mi del estándar de 
50 /ug P/ml.
Reactivos
Solución de molibdato de amonio y 
vanadato de amonio.
Disolver 22,5 g de 
24H2 0 en 400 m l de agua y 1,25 g de 
NH4 §03 en 300 ml de agua hirviendo.
Se agrega la segunda solución a la 
primera y se deja enfriar a temperatu­
ra ambiente.
Se agregan 250 ml de ácido nítrico 
concentrado y se enrasa a un litro con 
agua.
Patrón de 50 u g de P/ml
Se disuelven 0,219 g de KH2PO4 y se 
lleva a un litro con agua.
Preparación de las muestras
Para la comparación de las tres 
técnicas se utilizaron las siguientes 
especies:
1- Lactuca sativa
2- Raphanua sativus
3- Cichorium intybus
Para 1 y 2 se usaron hojas y para 3 
se usaron semillas, raíces y hojas.
Se tomaron 15 muestras de cada es­
pecie y cada parte, habiéndose deter­
minado cada una por triplicado, lo que 
representa un total de 225 determina­
ciones.
Rev.Facultad Agronomía, 9(3): 127-130, 1988
130 ALICIA E. RENDINA y ALICIA F. de TORIO
RESULTADOS Y DISCUSION CONCLUSIONES
El estudio éstadístico se realizó 
sobre latotalidad de los datos obteni­
dos por cada método.
La relación entre los valores 
(mgP/lOOg de materia seca) dados por 
el método 1 y los obtenidos por el mé­
todo 2 tiene un coeficiente de corre­
lación altamente significativo; la 
recta de regresión Z2 en función de Z^ 
y la desviación estándar SD señalan 
una muy buena concorda’ncia entre ambos 
métodos.
La relación entre los valores dados 
por el método 1 y por el método 3 acu­
san iguales resultados.
La Figura 1 muestra el gráfico de 
correlación entre el método 1 y el mé­
todo 2.
La Figura 2 muestra el gráfico de 
correlación entre el método 1 y el mé­
todo 3.
El contenido de fósforo estimado 
por el método 1 está expresado por Z2 
y el estimado por el método 2 y 3 por 
Z1 en los gráficos respectivos.
La figura 1 y el estudio del mismo 
muestran que no hay diferencias signi­
ficativas de los valores obtenidos de 
fósforo al hacer una disgregación hú­
meda de la muestra o seguir la técni­
ca de calcinación, aunque desde un 
punto de vista estrictamente práctico 
esta última insume mucho más tiempo, 
además del hecho de tener que disponer 
de una mufla con un buen control tér­
mico para evitar posibles pérdidas de 
fósforo.
El análisis de la figura 2 demues­
tra una muy buena correlación entre 
los valores de fósforo obtenidos por 
el método 1 (mineralización húmeda y 
medición de la absorbancia del comple­
jo azul de molibdeno) y los obtenidos 
por el método 3 (mineralización húmeda 
y medición de la absorbancia del com­
plejo amarillo de fosfovanadomolibde- 
no) siendo este último más rápido y 
simple que la reducción a azul de mo­
libdeno, evitando la inestabilidad de 
dicho complejo.


Determinación absorciométrica de fósforo en plantas

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