Factores genéticos y componentes bioquímicos del plasma seminal en el Caballo Criollo Colombiano y su relación con la calidad de semen criopreservado

Abstract

En los últimos años la industria equina mundial se ha expandido de manera considerable, enmarcando la necesidad de desarrollar sistemas productivos eficientes mediante el uso de biotecnologías reproductivas. En la especie equina, la utilización de características de tipo cuantitativo y de criterios objetivos al momento de evaluar el desempeño reproductivo y de realizar la selección de los reproductores, no es frecuente. Además, los procesos convencionales de congelación de semen equino, acarrean limitantes particulares, como son la significativa reducción de la viabilidad y capacidad fertilizante de los espermatozoides, y la extracción del plasma seminal, dado que la mayoría de su capacidad antioxidante se encuentra allí. Actualmente se desconoce en gran medida la función de los componentes del plasma seminal en relación a su aporte a la capacidad antioxidante, a la calidad del semen y la criotolerancia. El objetivo de esta investigación fue evaluar algunos factores genéticos y componentes bioquímicos del plasma seminal en equinos de la raza criollo colombiano y su relación con la calidad del semen criopreservado. Para lo anterior, se evaluaron cuatro polimorfismos (SNP) dentro del gen CRISP-3 en 100 equinos criollos colombianos, mediante la extracción de ADN y secuenciación de los fragmentos de interés. Se colectó el semen de 30 caballos y se recuperó el plasma seminal para ser liofilizado; en este último se hicieron mediciones de algunos componentes como proteínas totales, proteína CRISP-3, iones y vitaminas. El semen fue sometido a criopreservación, para lo cual fue suplementado con 2mg/mL de plasma seminal. Adicionalmente, el semen de cinco caballos fue colectado y suplementado con plasma seminal liofilizado de acuerdo a su capacidad antioxidante total para su posterior congelación. Post-descongelación se evaluaron parámetros de movilidad, cinética, viabilidad e integridad espermática. Para el análisis estadístico se ajustaron modelos lineales generalizados (GLM) y se realizaron correlaciones y regresiones. Se encontró una asociación entre el genotipo para CRISP-3 y la calidad del semen equino criopreservado. Así mismo, un nivel alto de esta proteína en el plasma seminal se relacionó con una mayor calidad espermática post-descongelación. La composición del plasma seminal resultó ser determinante en la calidad del semen fresco y criopreservado; igualmente, la suplementación del plasma seminal de acuerdo a su capacidad antioxidante total, demostró estar correlacionada con la congelabilidad del semen en esta especie.Abstract: In recent years the equine industry worldwide has been expanded considerably, showing the need to develop efficient production systems through the use of reproductive biotechnologies. In the equine species, the use of quantitative characteristics and objective criterias to evaluate the reproductive performance and to select the stallions is not frequent. In addition, conventional freezing process of equine semen, carries particular limitations, such as the reduction in the viability and the capacity fertilization of spermatozoa, and the extraction of seminal plasma, since most of its antioxidant capacity is there. Currently, the role of seminal plasma components in relation to their contribution to antioxidant capacity, semen quality and cryotolerance is largely unknown. The aim of this research is to evaluate genetic factors and biochemical components of seminal plasma in Colombian Creole horses and their relation with cryopreserved semen quality. For the above, four polymorphisms (SNP) within the CRISP-3 gene were evaluated in 100 Colombian creole horses, through DNA extraction and sequencing of the fragments of interest. Semen of 30 horses was collected and the seminal plasma was recovered to be lyophilized; in the latter, measurements of some components such as total proteins, CRISP-3 protein, vitamins and vitamins were made. Semen was supplemented with 2mg/mL of seminal plasma and cryopreserved. Additionally, semen of five horses was collected and supplemented with lyophilized seminal plasma according to its total antioxidant capacity for subsequent freezing. Post-thawing motility, kinetics, viability and sperm integrity parameters were evaluated. For statistical analysis, generalized linear models (GLM) were fitted and correlations and regressions were performed. It was found an association between the genotype for CRISP-3 and the quality of cryopreserved semen. Also, a high level of this protein in seminal plasma was related with higher post-thawing sperm quality. Composition of seminal plasma was determinant in the quality of fresh and cryopreserved semen; similarly, seminal plasma supplementation according to its total antioxidant capacity, proved to be correlated with semen freezability in this species.Doctorad