Almandoz, Gastón O.

Fabro, Elena

Ferrario, M. E.

Krock, Bernd

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Fabro E.1, Almandoz G.O.1, Ferrario M.E.1, Krock B.2DISTRIBUCIÓN DE ESPECIES TOXÍGENAS DE DINOPHYSIS Y PECTENOTOXINAS EN EL MAR ARGENTINO.INTRODUCCIÓNEl género Dinophysis comprende varias especies consideradas productoras de toxinas causantes del envenenamiento diarreico por moluscos (DSP). En la Argentina existen casos documentados de intoxicaciones diarreicas en humanos a causa del consumo de bivalvos (Gayoso et al., 2002), y se ha encontrado relación entre las intoxicaciones y la presencia de D. acuminata y D. caudata (Sar et al., 2010). El género Dinophysis es además productor de Pectenotoxinas (PTXs), una gran familia de toxinas lipofílicas, que inicialmente se hallaban asociadas al complejo de toxinas DSP por su estructura química. Actualmente se sabe que no causan síntomas de DSP pero pueden ser potencialmente hepatotóxicas y promover la formación de tumores en mamíferos (Lee et al., 1989). En este trabajo se analiza por primera vez la presencia de PTXs y sus productores potenciales en una extensa zona del Mar Argentino. REFERENCIAS-LeGresley M., McDermott G. 2010. Counting chamber methods for quantitative phytoplankton analysis-haemocytometer, Palmer-Maloney cell and Sedgewick-Rafter cell. En: Microscopic and molecular methods for quantitative phytoplankton analisis. Karlson B., Cusac C. y Bresnan E. Pag. 25. Unesco. -Sar E. A., Sunsen I., Lavigne A. S., Goya A. B. 2010. Dinophysis spp. asociadas a detección de toxinas diarreicas en moluscos (DSTs) y a intoxicación diarreica en humanos (Provincia de Buenos Aires, Argentina). Rev. Biol. Mar. Oceanogr. 45: 451-460. - Gayoso A. M.,  Dover S., Morton S., Busman M., Moeller P., Fulco V.K., Maranda L. 2002. Diarrethic shellfish poisoning associated with Prorocentrum lima (Dinophyceae) in Patagonian Gulfs (Argentina). J. Shellfish Res. 21: 461–463.-Rodríguez F, Escalera L., Reguera B, Rial P., Riobó P., Silva T.J. 2012. Morphological variability, toxinology and genetics of the dinoflagellate Dinophysis tripos (Dinophysiaceae, Dinophysiales). Harmful Algae 13: 26–33.-Lee J.S., Igarashi T., Fraga S., Dahl E., Hovgaard P. 1989. Determination of diarrhetic shellfish toxins in various dinoflagellate species. Journal of Applied Phycology 1: 147–152.-Miles C.O., Wilkins A.L., Munday R., Dines M.H., Hawkes A.D., Briggs L.R., Sandvik M., Jensen D.J., Cooney J.M., Holland P.T., Quilliam M.A., MacKenzie A.L., BeuzenbergV, Towers N.R. 2004. Isolation of pectenotoxin-2 from Dinophysis acuta and its conversion to pectenotoxin-2 seco acid and preliminary assessment of their acute toxicities. Toxicon 43: 1–9. -Kamiyama T., Nagai S., Suzuki T., Miyamura K. 2010. Effect of temperature on production of okadaic acid, dinophysistoxin-1, and pectenotoxin-2 by Dinophysis acuminata in culture experiments. Aquatic Microbial Ecology 60: 193–202.-Blanco J., Álvarez G., Uribe E. 2007. Identification of pectenotoxins in plankton, filter feeders, and isolated cells of a Dinophysis acuminate with an atypical toxin profile, from Chile. Toxicon 49:710–716.-Takahashi E., Yu Q., Eaglesham G., Connel D.W., McBroom J., Costanzo S., Shaw G.R. 2007. Occurrence and seasonal variations of algal toxins in water, phytoplankton and shellfish from North Stradbroke Island, Queensland, Australia. Mar. Environ 64: 429–442.-Trefault N., Krock B., Delherbe N., Cembella A., Vásquez M.. 2011. Latitudinal transects in the southeastern Pacific Ocean reveal a diverse but patchy distribution of phycotoxins. Toxicon, 58: 389–397.METODOLOGÍADurante la Campaña “Patagonia Austal”, llevada a cabo en otoño de 2012 a bordo del buque Puerto Deseado, se realizaron 46 estaciones de muestreo a lo largo del Mar Argentino (37-55,5ºS). En cada una de ellas se colectaron muestras de superficie, tanto de red (cualitativas) como de botella (cuantitativas) para el estudio del fitoplancton y la determinación de toxinas. Para la identificación de las distintas especies del género Dinophysis se utilizómicroscopía óptica (MO) y electrónica de barrido (MEB), y se estimó su abundancia empleando cámaras Sedgewick-Rafter (LeGresley y McDermott, 2010). Los resultados se expresaron en células por litro de muestra de red (NT).La detección y cuantificación de toxinas se realizó mediante cromatografía y espectrometría de masa. 020000400006000080000100000120000140000160000I1 NTI2 NTI3 NTI4 NTI5 NTI9 NTI14 NTI10 NTI11 NTI12 NTI13 NTI15 NTC18 NTC17 NTC16 NTC25 NTI22 NTC19 NTC20 NTC21 NTC24 NTI31 NTI30 NTC27 NTC29 NTC35 NTC36 NTC37 NTI34 NTI32 NTI34B NTS38 NTI38B NTC39B NTS40 NTC43 NTC44 NTC45 NTC43 N-NTP45 BI46 NTI47 NTI48 NTI49 NTI50 NTI52 NTCels. /NT0100200300400500600700ng/NTD.acuminata PTX-2RESULTADOSSe identificaron 7 especies del género Dinophysis, de las cuales 3 son reconocidas como potencialmente tóxicas a nivel mundial: D. acuminata, D. tripos y D. caudata. D. acuminata fue la especie de más amplia distribución en el área (37-55,5°S), hallándose en el 78% de las estaciones de muestreo. Por el contrario, D. caudata y D. tripos se hallaron solo en una o dos estaciones de muestreo, ubicadas al norte de los 37-40ºS (Mapa 1). Se detectaron dos análogos del grupo de las PTXs, la PTX-2, en la fracción de 20 a 50 µm;  y la PTX-2sa, en la fracción de 50 a 200 µm. La toxina más frecuente fue la PTX-2, observándose en el 61% de las muestras analizadas y acompañando la distribución de D. acuminata (Gráfico). La correlación entre la abundancia celular y la cantidad de toxinas fue baja (R² = 0,35). Los valores máximos de concentración de toxina se hallaron en estaciones con temperaturas entre los 8,7 y 9,6 ºC. Tanto dichos valores como los máximos producidos por célula se encontraron al sur del área de muestreo, entre los 51 y 55º S (Mapas 2 y 3). En una única estación se detectó un pico de PTX-2sa junto a una gran abundancia de D. tripos. D. caudata no estuvo asociado a la presencia de PTXs. En todas las estaciones en las que no se hallaron individuos de las especies tóxicas, tampoco se detectaron PTXs.CONCLUSIÓN Y DISCUSIÓNLos resultados obtenidos evidencian una amplia distribución de PTX-2 a lo largo del Mar Argentino, asociadas con la presencia de D. acuminata. Esta extensa distribución de PTX-2 coincide con lo observado recientemente en Chile (Trefault et al. 2011), donde su producción ha sido además corroborada en cultivo para D. acuminata (Blanco et al. 2007). La relación entre la concentración de toxinas y la abundancia celular fue baja, lo cual sugiere una producción diferencial de toxinas dentro de la misma especie. En este sentido, la toxicidad celular de D. acuminata fue mayor al sur del Mar Argentino, lo cual podría relacionarse con la presencia de aguas más frías que favorecen la producción de PTX-2 (Kamiyama et al. 2010). El hallazgo conjunto de PTX-2sa y gran cantidad de células de D. tripos es un dato novedoso, ya que no existen antecedentes que relacionen al organismo con la toxina, aunque sí se le ha adjudicado a D. tripos la producción de PTX-2 (Rodriguez et. al., 2012). La PTX-2sa se origina a partir de la metabolización de la PTX-2 en moluscos (Miles et al., 2004), aunque también se ha detectado en muestras de fitoplancton (Takahashi et al.,2007). Estudios adicionales permitirán incluir a D. tripos dentro de las especies toxígenas del Mar Argentino.Mapa 1 Mapa 2 Mapa 3Gráfico: Abundancia de D. acuminata y cantidad de PTX-2.1 D. acuminata, MEB. 2 D. acuminata, MO de interferencia. 3 D. tripos, MO de contraste de fase. 4 D. caudata, MO de contraste de fase. 5 D. caudata, MO de interferencia. 6 D. tripos, MEB.76 74 72 70 68 66 64 62 60 58 56Longitud Oeste575553514947454341393735Latitud SurDinophysis acuminataDinophysis triposDinophysis caudata76 74 72 70 68 66 64 62 60 58 56Longitud Oeste575553514947454341393735Latitud SurPTX-2 10.1-31 pg/cel.PTX-2 1.1-10 pg/cel.PTX-2 0.1-1 pg/cel.PTX-2sa 1.33 pg/cel.76 74 72 70 68 66 64 62 60 58 56Longitud Oeste575553514947454341393735Latitud SurPTX-2sa 2400 ng/NtPTX-2 100-615 ng/NTPTX-2 11-99 ng/NTPTX-2 0.1-10 ng/NTNo detectado1 División Ficología, Facultad de Ciencias Naturales y Museo, UNLP; 2 Alfred Wegener Institute, Alemania.1 2 34 5 6Estaciones de muestreo

DISTRIBUCIÓN DE ESPECIES TOXÍGENAS DE DINOPHYSIS Y PECTENOTOXINAS EN EL MAR ARGENTINO

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