蛋白质翻译后修饰包括磷酸化、乙酰化、糖基化和泛素化等,其中,磷酸化是目前研究最为透彻并且最重要的一种翻译后修饰。但是,由于磷酸化蛋白的丰度较低,因此对磷酸化肽段进行有效富集是质谱鉴定成功的关键。常用的磷酸化肽段富集方法有免疫沉淀法、TiO2层析技术、IMAC和SIMAC等,随着磷酸化蛋白质组学研究的日渐成熟,许多研究小组比较了上述磷酸化肽段富集技术的优劣势。SCX是最早建立的多维液相分离技术,其原理是根据肽段的带电量不同,逐步提高盐溶液浓度梯度洗脱SCX柱得到逐级分离的样品。近年来,不少实验室将SCX和IMAC两种方法结合起来,在全细胞磷酸化蛋白组的研究中取得了很好的效果。本论文将详细介绍如何...Mass spectrometry (MS) is an important tool to investigate protein phosphorylation. The success in profiling the phosphoproteome by MS-based proteomics has been intimately related to the availability of methods that selectively enrich for phosphopeptides. Strong cation exchange chromatography (SCX) and immobilized metal affinity chromatography (IMAC) are two main phosphopeptides enrichment steps. ...学位:理学硕士院系专业:生命科学学院生物学系_微生物学学号:2452009115300