不同生态型芦苇叶片蛋白质双向电泳系统的筛选和优化

Abstract

通过优化组合植物蛋白质提取方法及与之匹配的蛋白质裂解液，采用改进的O′Farrel 双向电泳系统，以自然生境野 生芦苇叶片为材料，筛选出一种适合纤维含量高、革质化明显的4 种不同生态型芦苇(水生芦苇、轻度盐化草甸芦苇、重度 盐化草甸芦苇、沙丘芦苇)叶片蛋白质分析的双向电泳系统，即以饱和酚- 醋酸铵/ 甲醇沉淀法提取叶片蛋白质样品，经裂解 液[8 mol/L 尿素，2 mol/L 硫脲，4% CHAPS，65 mmol/L DTT，2% Ampholine(pH3.5~10∶pH5~8 = 1∶4)] 裂解后按80 !g 上样，银染后获得背景清晰、蛋白质分辨率较高的双向电泳图谱. 该系统用于水稻等植物叶片蛋白质双向电泳分析，同样获 得较好的电泳图谱和分辨率.国家自然科学基金(30470164), 厦门大学新世纪优秀人才支持计划资助项目(NCETXMU)和福建省自然科学基金(C0410001)资助项