目的:研究羟基红花黄色素A(hydroxy safflor yellow A,HSYA)对人胃癌裸鼠皮下移植瘤碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)蛋白以及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA及蛋白表达的影响。方法:采用BALB/C nu/nu裸小鼠接种人胃腺癌细胞株BGC-823右前肢腋部皮下建立裸鼠人癌移植瘤模型,随机分为模型组、阳性对照环磷酰胺组(2 g.L-1)、HSYA组(0.056,0.028 g.L-1),观察抑瘤作用,并采用实时荧光定量PCR(real time-fluorescent quantitation PCR,RTFQ-PCR)检测瘤组织中MMP-9 mRNA表达;酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)检测瘤组织中bFGF,MMP-9蛋白表达。结果:HSYA0.028 g.L-1组抑瘤效果明显,且其MMP-9 mRNA表达及bFGF与MMP-9蛋白表达与模型组比,均明显降低(P<0.05)。结论:一定浓度的HSYA抑制肿瘤生长的机制之一可能与抑制bFGF,MMP-9的表达,减少瘤组织血管基底膜的降解,阻抑血管移行以减少血管生成有关

刘朝阳

奚胜艳

岳利峰

张前

臧宝霞

解华

赵育芳

高学敏

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药理羟基红花黄色素 A对人胃癌移植瘤裸鼠瘤组织 bFGF蛋白及 MMP 9表达的影响奚胜艳1, 张前3*, 刘朝阳2, 解华3, 岳利峰3, 赵育芳1, 臧宝霞4, 高学敏3( 1 厦门大学 医学院 中医系, 福建 厦门 361005;2 中国医学科学院肿瘤医院 肿瘤研究所, 北京 100021;3 北京中医药大学, 北京 100029; 4 北京市心肺血管疾病研究所药理研究室, 北京 100029)[摘要 ] 目的: 研究羟基红花黄色素 A( hydroxy sa fflo r yellow A, H SYA )对人胃癌裸鼠皮下移植瘤碱性成纤维生长因子( basic fib roblast g row th facto r, bFGF )蛋白以及基质金属蛋白酶 9 ( m atr ix m e tallopro te inase 9, MM P 9 ) mRNA及蛋白表达的影响。方法: 采用 BALB /C nu /nu裸小鼠接种人胃腺癌细胞株 BGC 823右前肢腋部皮下建立裸鼠人癌移植瘤模型,随机分为模型组、阳性对照环磷酰胺组 ( 2 g L- 1 )、H SYA组 ( 0 056, 0 028 g L- 1 ), 观察抑瘤作用, 并采用实时荧光定量 PCR ( real tim efluorescent quantitation PCR, RTFQ PCR )检测瘤组织中 MM P 9 mRNA表达; 酶联免疫吸附测定法 ( enzym e linked immunoso rbentassay, EL ISA )检测瘤组织中 bFGF, MM P 9蛋白表达。结果: HSYA 0 028 g L- 1组抑瘤效果明显,且其 MM P 9 mRNA表达及bFGF与 MM P 9蛋白表达与模型组比,均明显降低 ( P < 0 05)。结论: 一定浓度的 H SYA抑制肿瘤生长的机制之一可能与抑制 bFGF, MM P 9的表达,减少瘤组织血管基底膜的降解, 阻抑血管移行以减少血管生成有关。[关键词 ] 羟基红花黄色素 A; BGC 823; 碱性成纤维生长因子; 基质金属蛋白酶 9; 肿瘤血管生成[稿件编号 ] 20100118002[基金项目 ] 国家自然科学基金项目 ( 30572436)[通信作者 ] * 张前, Te:l ( 010) 64287017, E m ai:l zq19881988@163 com[作者简介 ] 奚胜艳, 医学博士, 讲师, Te:l 13616043852, E m ai:lxish engyan13204@ 163 com血管内皮向肿瘤细胞所在的区域迁移是实体肿瘤进展过程中的一种病理生理现象。内皮细胞向瘤组织内移行,实现其血管生成, 可为迅速增长的肿瘤提供充足营养。因而抑制微血管基底膜的降解、削弱血管内皮细胞的迁移是研究药物抗肿瘤血管形成的一个重要方向。羟基红花黄色素 A ( hydroxy safflor yellow A, H SYA )是从活血化瘀药红花中提取的活性成分,前期研究显示具有一定抑瘤作用, H SYA0 056, 0 028 g L- 1组、CTX 组的抑瘤率分别为10 39%, 29 96%, 48 34% ; 0 028 g L- 1剂量H SYA组肿瘤体积及瘤重与模型组比明显减少, 差异有统计学意义 (P < 0 05), 并发现 H SYA能阻抑瘤体血管生成, 可能与其抑制 VEGF 与 bFGF的mRNA表达有关[ 1]。本实验在此基础上,拟从血管内皮迁移与血管基底膜降解角度, 运用酶联免疫吸附测定法 ( ELISA )测裸鼠 BGC 823移植瘤组织血管移行相关因子 bFGF, MMP 9蛋白含量情况; 用 RTFQ PCR法检测瘤组织 MM P 9 mRNA表达, 研究H SYA对肿瘤血管内皮迁移的影响, 进一步探讨H SYA影响肿瘤血管生成的分子机制。1 材料1 1 动物、饲料、肿瘤细胞株 SPF级 BALB /C nu /nu裸小鼠 24只,周龄 4~ 6周, 体重 ( 16  2 ) g, 雌雄各半,由中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所提供, 合格证号 SCXK (京 ) 2004 0001; Co60灭菌饲料由北京科澳协力饲料有限公司提供, 合格证号 SCXK(京 ) 2005 0007。 BGC 823瘤株为人胃低分化腺癌细胞株,购自北京肿瘤防治研究所。1 2 药物 羟基红花黄色素 A对照品 (首都医科大学附属北京安贞医院北京市心肺血管疾病研究所提供 ) ,非极性大孔树脂柱色谱法分离,原液质量浓度 397 2 g L- 1, 纯度为 98 9%。注射用环磷酰胺由江苏恒瑞医药股份有限公司生产,每支 200 m g,批号 08012721。1 3 试剂 培养基 DM EM、胎牛血清为美国 G ibco产品,实时荧光定量 PCR试剂盒 ( L ightCyc ler Fast2877第 35卷第 21期2010年 11月Vol 35, Issue 21N ovember, 2010S tart DNA M asterPLU SSYBR Green!, 德国 Roche公司, LOT: 13828600 ), MMP 9 ( H um an )引物、内参GAPDH (H um an)引物由北京奥科生物技术公司合成。MM P 9 ( H um an ) ELISA试剂盒与 bFGF ( H um an) ELISA试剂盒 (美国 ADL公司 )。1 4 仪器 Eppendorf centrifuge 5417R小型冷冻离心机 (德国艾本德公司 ); F luorChem 凝胶成像系统 (美国 A lpha Innotech公司 ); Tecan全波长多功能酶标仪 ( Tecan Austria GM bH )。 L igh tCycler 2 0实时荧光定量 PCR仪及 L ightCycler Carousel BasedSystem (德国 Roche D iagnostics GM bH ); HERAC ellCO2培养箱 (德国贺力氏公司 ) ; PTC 100TMProg ramm ab le Therm a lContro ller(美国 M J Research公司 ) ;TE 2000倒置显微镜 (日本尼康公司 ); SF2000电子数显卡尺 (桂林广陆数字测控股份有限公司 ) ; 高速冷冻离心机 (德国 Sigm a公司 )。2 方法2 1 细胞培养及动物饲养 将 BGC 823细胞接种于 DM EM培养基 (含 10%灭活胎牛血清、100 UmL- 1青霉素和 100 g L- 1链霉素 )中, 置于 37 ∀ ,5% CO 2饱和湿度的培养箱中培养。裸鼠置于中国医学科学院实验动物研究中心屏蔽系统辅以洁净层流柜的动物室 ( SPF级 )饲养, 适应 1周后供接种用。2 2 药品及主要试剂配制 取 H SYA,用生理盐水配制 0 056, 0 028 g L- 1溶液, 0 22 m微孔滤膜过滤除菌, - 20 ∀ 保存待用。对照品环磷酰胺( CTX)用灭菌生理盐水配成 2 g L- 1的溶液。ELISA用 bFGF, MM P 9标准液, 生物素标记人bFGF, MM P 9抗体工作液,亲和素 过氧化物酶复合物 ( ABC)工作液严格按试剂盒说明书配制。2 3 人癌裸鼠移植瘤模型的建立 参考文献 [ 2]方法, 取处于对数生长期的 BGC 823细胞株, 用0 25%胰蛋白酶 0 2% EDTA D#H anks消化液消化,离心配成 2 15 ∃ 107个 /m L单细胞悬液, 接种于裸小鼠右前腋部皮下, 每只注射 0 2 mL (约含瘤细胞数 4 3 ∃ 106 ) ,建立裸小鼠人胃癌移植瘤模型。2 4 动物分组及给药 将接种瘤株 24 h后的裸小鼠随机分为 4组, 模型组, 阳性药对照组, H SYA( 0 056, 0 028 g L- 1)剂量组。每组 6只, 模型组给予腹腔注射 0 9% 灭菌生理盐水; H SYA组以H SYA溶液腹腔注射,此 3组均每只裸鼠每日注射 2次 (间隔 4~ 6 h) ,每次 0 2 mL,接种次日开始给药。阳性对照组从接种第 3天开始给药, 每 2 d每只腹腔注射 2 g L- 1环磷酰胺 1次,每次 0 2 mL。2 5 抑瘤观察 裸鼠腋下肿瘤块生成肉眼可见时,即用电子数显卡尺每 3 d测量 1次移植瘤的最长径( a )和最短径 ( b ), 按公式 V= 1 /2ab2( mm3)计算肿瘤体积。末次给药后 24 h称重 (第 20天 ), 颈椎脱臼处死裸小鼠,完整剥离裸鼠右前腋皮下肿瘤,用电子天平称取瘤重,计算抑瘤率 ( IR )。 IR = (模型组平均瘤重 -给药组平均瘤重 ) /模型组平均瘤重 ∃100%。2 6 取材及样品准备 每只裸鼠剥离后的瘤组织用手术刀切取火柴头大小多块, 装入冻存管并迅速投入液氮冷冻,再于 - 70 ∀ 低温冰箱中储存待用;ELISA实验按每 50 m g组织加入 500 L的匀浆液进行匀浆,离心去沉淀。2 7 实时荧光定量 PCR检测 总 RNA提取:将最佳抑制浓度的 H SYA组以及模型组瘤组织, 按照TRIzo l试剂说明,采用异硫氰酸胍一步法抽提所取瘤组织总 RNA,所提总 RNA经 1%的琼脂糖凝胶电泳确定其完整性,并经紫外分光光度计测样品 RNA含量和纯度。PCR扩增: 分别取 3 g总 RNA为模板, 在加入O ligo( dT )和 M MLV逆转录酶后以 50 L体系在 42∀ 下反应 1 h合成 cDNA第 1链,之后 94 ∀ 加热 2m in以灭活逆转录酶。按照 PCR使用说明, 采用 20L反应体系, 取上述反应物 2 L, 加入 dd H 2O 12L, PCR M ix 4 L, 并加入 MM P 9( 246 bp )引物 2L: 上游引物 5#GGGGAAGATGCTGCTGTTCA 3#,下游引物 5#TGCAGGATGTCATAGGTCACG 3#。内标基因选择 GAPDH, 上游引物 5#CCACAGTCCATGCCATCACT 3#, 下游引物 5#GCCTGCTTCACCACCTTCTTG 3#( 268 bp)。PCR循环参数:退火时间设为 6 s,退火温度分别设为 MM P 9 59 6 ∀ , GAPDH 59 0 ∀ ,延伸温度72 ∀ 的延伸时间 ( s)依据引物 bp数 /25而定, 45个循环,其余严格按试剂盒说明书设定。样品加完后,放入 PCR仪卡盘, 运行 L ightCyc ler2 0系统,检测并记录 C t值,所有目标基因表达水平的差异均用治疗组基因相对于内标基因的比值 CR来表示, 同时做溶解曲线确认是否是单一峰。检测结果重复 3次。琼脂糖凝胶电泳确认 RTFQ PCR扩增产物: 随机选取模型组和 H SYA 0 028 g L- 1组样品的2878第 35卷第 21期2010年 11月Vol 35, Issue 21N ovember, 2010MM P 9 PCR扩增产物各 5 L,上样后在 100 V恒压下进行电泳, F luor Chem 凝胶成像系统进行 DNA电泳条带拍照, 对 MMP 9的扩增结果进行抽样验证。ELISA法测瘤组织 bFGF, MMP 9蛋白表达:经加样, 孵育 120 m in;加待检因子抗体,温育 60 m in;加入 ABC 工作液, 温育 30 m in; 加显色液显影,读板。2 8 统计方法 实验所得成组资料数据均用  x  s表示, 采用 SPSS 13 0软件统计,两组间比较运用独立样本 t检验, P < 0 05时为有统计学意义。3 结果3 1 总 RNA提取结果 总 RNA样品经琼脂糖凝胶电泳之后,紫外灯下观察可见 18S, 28S 2条清晰的条带[ 1], RNA样品保持完好, 未被降解。紫外分光比色测定显示, 所有 RNA样品 A 260 /A 280在 1 8~2 0,表明纯度符合要求。3 2 H SYA对 BGC 823移植瘤 MMP 9 mRNA表达的影响 肿瘤组织总 RNA RT产物经 RTFQ PCR检测显示 MMP 9、内参 GAPDH mRNA均有表达; 凝胶电泳确认其扩增片段大小分别与理论扩增大小246, 268 bp一致 (图 1) ;模型组和 H SYA 0 028 gL- 1组样本 MM P 9各自扩增过程中荧光达到阈值时所需的循环数 C t值分别为 25 12  0 62和 26 06  0 78。熔解曲线分析表明所测基因各自的熔解温度一致, 为单一峰。数据结果显示, H SYA 0 028 gL- 1组与模型组 MM P 9 mRNA的表达水平相比明显降低 (P < 0 05) (表 1)。1 M arker; 2 模型组; 3 HSYA 0 028 g L- 1组。图 1 mRNA实时荧光定量 PCR产物凝胶电泳表 1 裸鼠 BGC 823移植瘤 MM P 9 mRNA的表达 (  x  s, n = 6)组别 剂量 / g L- 1 C t CR (mRNA level)模型 - 25 12  0 62 4 23  0 79H SYA 0 028 26 06  0 78 3 18  0 661)注: 与模型组比较 1) P < 0 05 (表 2同 )。3 3 H SYA对 BGC 823移植瘤瘤组织 bFGF, MM P9蛋白表达的影响 血管迁移相关因子的蛋白表达是反映 H SYA对肿瘤血管作用的另一分子层面的指标。ELISA法测定结果显示: H SYA 0 028 g L- 1治疗组瘤组织中的基质金属蛋白酶 MM P 9及碱性成纤维生长因子 bFGF蛋白表达减少, 与模型组相比,差异均有统计学意义 (P < 0 05) (表 2)。表 2 H SYA对裸鼠 BGC 823移植瘤 bFGF,MM P 9蛋白表达的影响 (  x  s, n= 6)组别 剂量 / g L- 1 bFGF /ng g- 1 MMP 9 / g g- 1模型 - 710 78  90 32 4 12  0 90H SYA 0 028 629 18  60 901) 3 07  0 561)4 讨论肿瘤血管生成受血管内皮细胞外基质影响。基底膜 ( basem ent m em brane, BM )是一种特殊的胞外基质。血管内皮基底膜是血管内皮细胞基底面的一附着膜层。基底膜的降解和间质组织的调整主要由内皮细胞特异的基质金属蛋白酶诱导。肿瘤产生的促血管生成因子作用于血管内皮细胞表面的受体诱导内皮细胞变形, 从基底膜降解部位穿出向血管生成促进方向增殖、迁移。羟基红花黄色素 A ( H SYA )为红花中提取的活血功效成分,本研究首次将 H SYA用于人胃腺癌裸鼠皮下移植瘤,观察其对肿瘤血管生成的作用,结果见文献 [ 1] ,由于实验中 H SYA高剂量组 ( 0 056 gL- 1)抑瘤率太低, 后续研究意义不大, 因此后续基因与蛋白研究主要是对抑瘤率较好的低剂量组进行探讨,通过实时荧光定量 PCR, ELISA法对瘤组织中血管生成相关因子 MM P 9基因及蛋白、bFGF蛋白进行检测,初步探讨了 H SYA对肿瘤新血管迁移形成的作用机制。碱性成纤维细胞生长因子 bFGF是继 VEGF外另一强力促血管形成多肽, 是多种肿瘤发生发展以及瘤体新血管化过程中不容忽视的因素; bFGF可促2879第 35卷第 21期2010年 11月Vol 35, Issue 21N ovember, 2010进细胞的有丝分裂,与受体 FGF R结合刺激多种来源的细胞增殖与分化; 并可刺激内皮细胞产生胶原酶和血浆素原激活物, 使血管 BM降解、消失;诱导血管内皮向三维胶原基质中迁移, 形成与毛细血管类似的管腔结构[ 3]。深入研究 bFGF对肿瘤抗血管治疗具有重要意义。本实验 ELISA法检测结果显示, 0 028 g L- 1H SYA治疗的移植瘤中 bFGF蛋白表达明显较生理盐水治疗的降低,表明其对瘤组织中 bFGF蛋白的表达有所阻抑,从而减弱 bFGF对血管内皮迁移、成管的刺激作用。肿瘤细胞可释放多种基质降解酶,其中基质金属蛋白酶最为重要。MMP 9是基质金属蛋白酶家族中相对分子质量最大的酶,以酶原形式分泌,被激活后形成 IV型胶原酶发挥降解基质效能[ 3]。研究证实: MMP 9与血管内皮生长因子 VEGF有很好的正相关性[ 4 5]。从而使得 MM P 9在肿瘤生长过程中可有诱导肿瘤血管生成的作用。有研究显示MMP 9在正常胃黏膜组织无表达, 胃癌组织中却呈不同程度表达,表达较强的部位在癌巢浸润前缘;胃癌组织内微血管密度较正常组织明显增高; 且肿瘤生长活跃的浸润缘密度大于中心密度,微血管高密部位亦是 MMP 9高表达部位[ 6]。因此,本实验也着眼于基膜降解环节,通过 RTFQ PCR实验观察到 H SYA可明显抑制裸鼠人胃腺癌 BGC 823移植瘤组织 MMP 9基因表达, 表明MM P 9蛋白的形成在转录水平即受到干扰; 通过ELISA检测发现给药组瘤组织中 MMP 9蛋白含量有所减少,提示经 H SYA治疗后肿瘤细胞直接分泌或诱导宿主细胞合成 MM P 9的能力有降低, 表明H SYA通过抑制 MMP 9的 mRNA表达, 而抑制了MM P 9的蛋白表达, 因为遗传信息是从 DNA到mRNA再到蛋白质的。因而使得 MMP 9对肿瘤血管基底膜的降解受阻,妨碍了内皮细胞的迁移,使新血管芽生减少; 佐证了前期实验[ 1]的病理观察结果,与陈学东等[ 7 ]观察到的活血化瘀药地龙蛋白组分 III可通过抑制 MM P 9蛋白的表达活性、抑制瘤旁微血管的生长而抑制鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤有类似结论。目前发现降解胞外基质和血管基底膜、直接参与肿瘤血管生成的 MM Ps家族成员还有很多,H SYA抑制血管生成是否部分也通过对其他基质蛋白酶产生抑制作用来实现尚有待研究。综上所述, H SYA不仅能通过前期实验所发现的抑制人胃腺癌 BGC 823裸鼠移植瘤 VEGF 及bFGF mRNA表达抑制血管形成[ 1],而且还可通过减少 bFGF蛋白表达,阻抑血管移行; 通过降低 MM P 9对血管基质的降解, 削弱移植瘤血管的生成, 证实H SYA在干预血管生成方面具有多靶点效应。H SYA药理研究以往多集中于在抗心肌缺血, 脑缺血等心血管药理活性上, 在抑制肿瘤血管方面研究少有。因而本研究对于 H SYA新药理作用的阐明,研究新型抗肿瘤辅助治疗药物具重要指导价值。[参考文献 ][ 1] 奚胜艳, 张前, 解华, 等 羟基红花黄色素 A对裸鼠人胃腺癌 BGC 823移植瘤血管及其 VEGF, bFGF mRNA表达的影响[ J] 中国中药杂志, 2009, 34( 5) : 605[ 2 ] 贺岩, 李莹杰, 王齐敏, 等 建立胃癌实验动物模型方法的研究 [ J] 中国实验动物学报, 2006, 14( 4 ) : 251[ 3 ] 廖子君, 雷光焰 肿瘤转移学 [M ] 西安: 陕西科学技术出版社, 2007: 97[ 4] Zam an K, D riscol lR, H ahn D, et al M on itoring mu ltip le ang iogen es is related mo lecules in the blood of can cer patients show s acorrelat ion betw een VEGF A and MMP 9 levels before treatm entand d ivergent changes after surgical vs conservat ive therapy[ J]In t JC ancer, 2006, 118( 3 ): 755[ 5] Gao Z L, Zhang C, Du G Y, et al C l in ical sign ificance of changes in tum or m arkers, extracellu lar matrix, MM P 9 and VEGF inpatients w ith gastric carcinom a [ J ] H epatogastroen terology,2007, 54( 77) : 1591[ 6] 王爱东, 吕光成 胃癌组织中 MMP 9表达、微血管生成与胃癌侵袭与转移 [ J] 肿瘤杂志, 2002, 22( 1 ) : 57[ 7] 陈学东, 田道法, 孙虹 地龙蛋白组分 III对鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤血管密度和 MMP 9表达的影响 [ J] 中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志, 2007, 15( 5 ) : 3262880第 35卷第 21期2010年 11月Vol 35, Issue 21N ovember, 2010Effects ofHSYA on expression of bFGF protein andMMP 9in BGC 823 transplantation tumor of nude m iceX I Shengyan1, ZHANG Q ian3* , L IU Chaoyang2, X IE H ua3, YUE L ifeng3, ZHAO Yufang1, ZANG Baox ia4, GAO Xuem in3( 1 D ep ar tm ent of T rad itional ChineseM ed icine of M ed ical Co llege of X iam en University, X iam en 361005, China;2 T um or R esearch C enter of Cancer H osp ital of Chinese A cademy of M ed ical Sciences, B eij ing 100021, China;3 B eijing Un iver sity of ChineseM edicine, B eijing 100029, Ch ina;4 Beijing Institu te of Cardiopu lm onary Vascular D isease, B eij ing 100029, China )[ Abstract] Objective: To investigate the effects of hydroxy safflor ye llow A ( HSYA ) on the expression o f bFGF prote in andMM P 9 mRNA or prote in of transp lantation tum or of gastr ic adenocarc inom a ce ll line BGC 823 in nudem ice Method: The BGC 823ce lls w ere subcutaneou ly injected into the right an terior arm pit o f BALB /C nu /nu nudem ice, and the an im al model o f transplanta tiontumo rw as established The exper im enta l groups were trea ted w ith H SYA a t concentra tion o f 0 056 and 0 028 g L- 1 and cyc lophospham ide a t 2 g L- 1, or w ith physiolog ic sa line The tum or inhib itory e ffect w as observed, and the mRNA expression o fMM P 9 oftransp lantation tum or was de tected by real tim e fluo rescent quantitation PCR and the prote in expression ofMM P 9 and bFGF w ere detected by enzym e linked imm unosorbent assay R esult: The IR in the group w ith HSYA at the concentration o f 0 028 g L- 1 is h igherthan in the g roup w ith no rma l sod ium A fter treatm ent w ith HSYA, the mRNA expression o fMM P 9 has s ignificant diffe rence at theconcentration o f 0 028 g L- 1 as compared w ith physio log ic sa line treated group ( P < 0 05), but the pro te in expression o fMM P 9and bFGF is obv iously less than that in the physio log ic saline treated g roup ( P < 0 05) Conc lu sion: The possib le m echan ism ofHSYA in g iven concentration to antagon ize tumo r ang iogenesis m ay be related w ith inhib iting the prote in expression o f MM P 9 andbFGF o r the mRNA expression ofMM P 9 in tum or tissue to reduce the deg radation of blood vesse l basilar m em brane, and to restrainthe m igration of b lood vesse l and decrease the tum or vasculariza tion[ Key words] hydroxy sa fflo r ye llow A; BGC 823; bFGF; MM P 9; tumo r ang iogenesisdo:i 10. 4268 /cjcmm20102119[责任编辑 张宁宁 ]2881第 35卷第 21期2010年 11月Vol 35, Issue 21N ovember, 2010

羟基红花黄色素A对人胃癌移植瘤裸鼠瘤组织bFGF蛋白及MMP-9表达的影响

http://dspace.xmu.edu.cn/bitstream/handle/2288/18566/%e7%be%9f%e5%9f%ba%e7%ba%a2%e8%8a%b1%e9%bb%84%e8%89%b2%e7%b4%a0A%e5%af%b9%e4%ba%ba%e8%83%83%e7%99%8c%e7%a7%bb%e6%a4%8d%e7%98%a4%e8%a3%b8%e9%bc%a0%e7%98%a4%e7%bb%84%e7%bb%87bFGF%e8%9b%8b%e7%99%bd%e5%8f%8aMMP-9%e8%a1%a8%e8%be%be%e7%9a%84%e5%bd%b1%e5%93%8d.pdf?sequence=1&isAllowed=y

羟基红花黄色素A对人胃癌移植瘤裸鼠瘤组织bFGF蛋白及MMP-9表达的影响

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