本文叙述了应用多波长萤光分光光度法测定人工样品中的萤光黄、罗丹明6G和罗丹明B_。于波长502nm直接测量萤光黄的萤光强度,罗丹明6G和罗丹明B均不干扰;罗丹明6G的测定波长λ_1为555nm,参比波长λ_2和λ_3为502nm和660nm,罗丹明B的测定波长λ_1选用585nm,参比波长λ_2、λ_4和λ_3相应为538nm、508nm和494nm,方法的相对误差一般小于6%。作者于前文叙述了多波长萤光分光光度法的原理,为了验证该原理的可靠性,特对萤光黄、罗丹明6G和罗丹明B人工混合样品进行实测。结果表明,方法原理可靠,实验操作和数据处理简便快速,三次测定平均偏差<3%

卢建敏

李文钦

许金钧

黄贤智

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第三卷 第一期 实脸技术与管理 Vo l.3 N o.1 19 86口, . . 勺尸. , 甲尸, 甲甲. . . , , 一-姗收少、多波长萤光分光光度法 (二 )—釜光黄、罗开明 6 G 和罗丹明 B 三组分混合物的侧定黄贤智 许金钧 李文钦‘卢建敏*(厦门大学化 学系)摘 要本文叙述了应用多波长萤光分光光度法测定人工样l钟 1的萤光黄、罗月一明 6G 和罗丹明 B。于波长 6 OZn mt..、l参日口去午直接测量萤光黄的萤光强度.罗丹明 6G 和罗丹明 B 均不干扰 ; 罗丹明 6G 的测定波长 又:为 5 55n m,比波长 孟:和 又:为 5 02n 。 不r万 66 0n m,罗丹明 B 的测定波长 又:选用 58 5n 二,参比波民 又2 、又;和 23应为 5 3 8o m、5 0 8n m 不!1 4 94n m,方法的相对误差一般小于 6 拓。作者于前文叙述了多波长萤光分光光度法的原现 t’1 . 为了验 i正该原理的可_泪生,特对萤光黄、罗 丹明6 G 和罗丹明 B 人工混含样品进行实侧。结淤表明,方法原理可靠,实脸操作和数据处理简便快建,三 次测定平均偏差 < 3呱。实 验 部 分一、仪器和试剂(一 ) 仪器: y F一 1 型、y F一2 型萤光分光光度计 (厦门大学精密仪器厂)(二 ) 试剂:1.蜚光黄标准溶液:称取 10 毫克萤光黄于小烧杯中,用少许 0.I N N a O H 溶解,移入 2 0 毫升容量瓶,用 2.s x lo一 ”N N a OH 溶液稀释至刻度。此溶液萤光黄浓度为 50 微克/毫升 (即 50P p m )。使用时移取上述溶液,用 2.5 x l。“ ’N N a O H 稀释成 SP p m。2.罗丹明 6 G 标淮溶液:50 微克 /毫升 ; 5 微克/ 毫升。配制方法同上。3.罗丹明 B 标准溶液:的 微克/毫升; 5 微克/毫升。配制方法同上。二、条件试验(一) 萤光黄、罗丹明 6 G 和罗丹明 B 萤光发射光谱的测绘。分别移取上述的蜚光黄、罗丹明 6G 和罗丹明 B 的 s p p m 标准溶液 5 毫升于三个 50 毫升容量瓶中,用 2.5 x l。-SN N a O H 溶液稀释至刻度,摇匀。于 y F一2 型萤光分光光度计,以 3 6 5n m 汞线为激发光,自动扫描记录 出它们的萤光发射光谱,所得的谱图如图 l 所示。它们的萤光峰分别为:萤光黄 5 2 0n m、罗丹明 6 G 5 5 5n m 和罗丹明 B 5 8 5n m。(二 ) 萤光黄、罗丹明 6 G 和罗丹明 B 萤光强度加和性试验.多波长萤光分光光度法的重要条件之一,是在不同的波长下,其萤光强度应有良好的加和性。因此有必要对它们分别存在时和它们共存时的萤光强度进行试验。结果列于表 1。显然,它们在不同波长下的蜚光强度均有良好的加和性。* 化学系分析专业 84 届毕业生多波长萤光分光光度法 (二)罗丹明 尸『光登强度2』 :波一{是 (。 m )图1 萤光芡、罗)」·明 6 G 和罗丹明 B 的萤光发射光 i泞(三 ) 测定波长 只,和参比波长 只:(九或 从) 的选择及计算方法1.测定萤光黄时波长的选择由图 1 萤光黄的发射光谱可知,其萤光峰位于 52 0n m,虽在 5 2 0l m 处测量萤光的方法灵敏度最高,可是罗丹明 6 G 有干优。为了避开罗丹明 6G 的干扰,我们改在 50 2n m 处测定萤光黄,虽然方法灵敏度有所下降,但其他两种萤光物质不干扰。2.测定罗丹明 6 G 时波 长对的选择根据罗丹明 6G、罗丹明 B 和萤光黄的发射光诺,我 们选用罗丹 明 6 G 的萤光 峰5 5 5 n m 为它的测定波 长只: ; 为了消除萤光黄的干扰,由萤光黄的发封光讲找出它的与几; 等萤光强度 的 波 长 50 2nl n为 参 比 波长 凡;为 了消除罗丹明 B 的干扰,由罗丹明 B 的发射光谱找它的 与 久,等萤光强度的波 长 6 6 00 m 为参比波一长 只3 (见图 2 )。接着由公式 (1 ) 计算出罗丹明 6 G 的 △ F△卜 F奚5 一 F黔黄一 F器尸明叫+ 罗丹明. 飞(1)式中 △ F 为罗丹 明 6G 于波长 5 5 5n m 和 6 6 On m 测得的萤光强度之差。F 羹。为于波长 5 5 5n m 测得的罗丹 明 6 G、罗丹明 B 及萤光黄三者的萤光强度之和。F 黔黄为于波长soZn m 测得的萤光黄的萤光强度。F 器尹明““ 十 罗丹明 “为于波 长 6 6 On m 测得的罗丹明 “G 和 罗丹明 B 的萤光强度 之和。然后由罗丹明 6 G 的△F 一 C 工作曲线找 出罗丹明 6 G 的含量。3.测定罗丹明 B 时波长对的选择由图 1、2 可知,罗丹明 6 G 和萤光黄对罗丹明 B 的测定都有干扰,共中以罗丹明6 G的干扰最严重。实践表明,只要选择好测定的波一长对,仍能对罗丹明 B 进行测定,我 们选择罗丹明 B 的萤光峰 5 8 5n 二 为它的测定波 长 久, 。为消除罗丹明 6 G 和萤光黄的干扰,分别找出其等萤光强度波长 5 3 8n m 和 码 4n m 为参比波长 只2和 只3 。由于 久:测得的 萤 光强度是罗丹明 6 G 和萤光黄于 几:的萤光强度之和,因此还得 由萤光黄的 只:找出共萤 光 强度波长 5 0 8n m 为只‘ (见图 3 ),接着由公式 (2) 计算出罗丹明 B 于 5 8 5n m 的萤光强度F器尹明乙 = F器。 一 F鑫护炎 一 F黑肥, 以 几+ 萤尤炎 + F凳黔黄 (2 )式中 F嚣护明 ’;为罗丹明 ” 于波 长 5 8 ::l m 的萤光强度l.’嚣。为罗丹明 l‘、罗丹明 。( ; 和萤光黄三者于波 长 5 , 。1, l的萤光强度之和犷罗丹 明 6,肠a 6萤光黄 为罗丹 明 6 G 和萤光黄于波 长 53 8 lJ。的萤光强度之和卖验技术与管理表 l几一萤光物质萤光黄、罗丹明 6 G 和罗丹明 B 萤光强度加和性试验 (三者浓度均为 0.2 0 0P m,介质为 2.5 X lo一N N a o H )·萤光强度波长n m0001049856725萤光黄、罗丹明 6G丹明 B 三者混合物005 18 11 141 703 4D4 384 434 2638 032 228 924 517212 07 13 817nUnU工a仁七J‘旧别目曰叫tr洲钊l屯公护J妇卜灿、J刃f‘L民U几O斤‘丹00甘,UQ工nJ任,‘11,曰勺口QJodn‘,J.‘,工立])日0.尸a丹D.‘区,no口。n‘(亡曰件‘,孟八0nl一污O民dodJ月五,人月.立刁‘上门l八01n曰UU门目F黔黄和 F蕊护黄分别是萤光黄于 s oso m 和 4 o 4n 。 处的萤光强度,最后由罗丹明 B 的工作曲线查出罗丹明 B 的含量。(四 ) 萤光黄、罗丹明 6 G 和罗丹明 B 工作曲线的测绘1.萤光黄工作曲线的测绘移取不同量的萤光黄于 一系列 50 毫升的容量瓶中,用 2.5 x 10一 3入 N a O H 稀 释,配制成含萤光黄 o,0.10, 0.20“ 二 1.0 0 p p m 的标准系列,于萤光分光光度计用 3 65n m 汞线激发,S OZ n m 测量萤光强度,然后由萤光强度对萤光黄浓度绘制成 F 一 C 工作曲线 (见图 4 )。2.罗丹明 B 工作曲线测绘除改用 5 8 5n m 测量萤光强度外,其他步骤同上。结果见图 4。3.罗丹明 以妥工作曲线的测绘标准系列配制步骤和激发波 长同上,于 5 5 5n 。 和 “ OJl m 测量萤光强度,并计算出其萤光强度差值△ F,然 后由八 F对罗丹明 6( ; 浓度绘制成△F ~ C 工作曲线 (见图 5 )。三、萤光黄、罗丹明 6( 二和罗丹明 B 人工混合样品的测定移取已知量的萤光黄、罗丹明 6 G 和罗丹明 B 标准溶液,用 2.5 x 10一“N N o o l 稀释多波长萤光分光光度法 15罗丹明 6‘蜚强光度萤光黄罗J」明 Bl43 0 50 2 5 2 0 。;:。 6 4 0波氏 (。二 )图 2图 3测定罗JU明 6G 日j波长犬J的 选择 又: 55 5 n ,, ‘: 又: 5 02 「, 。 ; 又: 66 0 n n ‘义『/ ll I } / !罗月明 6‘萤光强度‘则 过岁 )」JI{J l; {IJ·廿之L之又, 58 5 :川: : 又: 5 38 1、n , ; ). 刁 4 94 川 , 】; 又. 5 08: , ; : , {{J巡{;:立破 实验技术与管理黄光强度萤萤光黄 △尸强度30 0罗丹明 B2 010~ J‘- - - ~ 一一 - 一- 一‘- 一 L - - sees - ~ - - - ‘- - 一-一0 . 2 5 0 . 50 0 . 75 1 . 0 0 (浓度 (户夕璐 ) 罗丹明 6‘ 浓度 。r仍)图 4 萤光黄 rJ 罗丹明 B 的工作曲线 图 5 罗 lj 妇 6G 的工作曲线成人工样品,而后按 (三 ) 1、2、3节所述的方法分别对萤光黄、罗丹明 6 G 和罗丹 明 B 进行侧定,结果列于表 2表 2 萤光黄、罗丹 明 6( ; 川罗月明 B 人工样品洲定结果人 工 样 品 萤光黄 (p p m ) 罗丹明 6 G (p p m ) 罗 )」f归 B (p p m )0.0 500.0 48n八U叭墩知得已测0.I DD0.0 950.0 100.0 1 10.0 5 00.0 5 2n仲‘二“八Ono3. J.止八UJ已1nUllnU一“从量知得已测0.06 00.0 170.0 100.0 100.10 00.10 0量从知得已测一州川0.02 00.02 00.1000.0 940.0 5 00.0 5 2招川巾知得已测一一~ 翔一 一 -nUn10D98一2n曰U0.10 00.10 210 010。星凤以知得已测nl0.2 000.19 8二1却知得已测1 0 00.T61.0 00.8 7以甲釉知得已测7 *7令 号样品中喜切‘之组分 t’j勺浓度人大 黄 龙黄和罗 J」明 6G 萤光心火显著,测得结果 人人偏低。( 1 9 8 5 年 4 月 2 8 日收 稿 )参 考 文 献〔1」 黄贤日、许 发钧 《’买公.讨乞术, , 管理》 御州 !洲,1 96 5 12 月 )

多波长萤光分光光度法(二)——萤光黄、罗丹明6G和罗丹明B三组分混合物的测定

http://dspace.xmu.edu.cn/bitstream/handle/2288/55426/%e5%a4%9a%e6%b3%a2%e9%95%bf%e8%90%a4%e5%85%89%e5%88%86%e5%85%89%e5%85%89%e5%ba%a6%e6%b3%95%28%e4%ba%8c%29%e2%80%94%e2%80%94%e8%90%a4%e5%85%89%e9%bb%84%e3%80%81%e7%bd%97%e4%b8%b9%e6%98%8e6G%e5%92%8c%e7%bd%97%e4%b8%b9%e6%98%8eB%e4%b8%89%e7%bb%84%e5%88%86%e6%b7%b7%e5%90%88%e7%89%a9%e7%9a%84%e6%b5%8b%e5%ae%9a.pdf?sequence=1&isAllowed=y

多波长萤光分光光度法(二)——萤光黄、罗丹明6G和罗丹明B三组分混合物的测定

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