张颂恩

罗琪

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云南白药对外科手术患者血小板活化的影响张颂恩, 罗  琪(福建省厦门中山医院、厦门大学医学院第一临床学院 普外科, 福建 厦门, 361004)  关键词: 云南白药; 血小板活化; 流式细胞术  中图分类号: R 28516   文献标识码: A   文章编号: 1672O2353( 2004) 02O0073O02  云南白药的止血功能主要作用于血小板。作者 2001年 1月~ 2003年 1月应用抗血小板单克隆抗体法, 观察了云南白药对 206例住院手术患者血小板活化状态的影响,现将结果报告如下。1  临床资料本组住院手术的 206 例男性腹股沟斜疝患者,年龄 14~ 72岁, 平均( 3612 ? 516)岁。入院时检查血液生化、血小板数、凝血功能、纤维蛋白原含量等均正常, DO二聚体( - )。206例按入院顺序编号, 单号为用药组 ( A组) , 双号为对照组( B组) , 每组 103例。检测指标: 抗 PO选择素( CD62p)、抗凝血酶敏感蛋白 ( P10)、血小板数、凝血功能 ( 4 项指标)、纤维蛋白原含量、DO二聚体、阴囊根部周径、伤口肿胀情况等。服药方法: A组口服/云丰0牌云南白药胶囊015 g/次, 4次/ d, 连服 3 d; B组口服空胶囊,用法同 A 组。异硫氰酸荧光素( F IT C)标记的鼠抗人PO选择素( CD62pOFIT C)及阴性对照羊抗鼠IgG1( IgG1OFIT C) ; RO藻红蛋白( PE)荧光标记抗人凝血酶敏感蛋白( P10OPE)和阴性对照羊抗鼠抗体( IgG1PE ) , 均由法国国际免疫公司生产。美国 EpicsOXL 型流式细胞仪, 由美国 Coulter 公司提供。2  方  法取样: 患者入住当天及出院前 1 d上午 8时各用肝素化塑料注射器抽动脉血 2 ml进行血气分析,同时各抽肘静脉血 3 ml, 加入2%依地酸二钠( EDTAO2Na)抗凝,抗凝剂与血量比为 1B9, 正常对照组于早 8~ 9时空腹采肘静脉血 3 ml, 标本处理同上。多血小板血清制备:抽肘静脉血3 m l, EDTAO2Na 1B9抗凝, 离心( 800 转/ min, 5 min)取上层血清即为富含血小板血清,调整血小板数106/ m l,4 e 保存时间不超过 24 h。取2支试管,均加多血小板血清 500 Ll, 再分别加入异硫氰酸荧光素( PITC)标记的鼠抗人 PO选择素( CD62POFIDC)和 RO藻红蛋白( PE)荧光标记抗人凝血酶敏感蛋白( P10OPE)工作液各 20 Ll;另取 2支试管,均加多血小板血清500 Ll, 也各加入阴性对照羊抗鼠单抗 IgG1OFITC、IgG1OPE工作液各 20 Ll, 均避光反应 30 min, 2 000 r/ m in离心 15 min, 磷酸缓冲液( PBS) 2 ml漂洗,再离心漂洗1次,均弃上清液, 最后加入 PBS 500 Ll待测。流式细胞仪检测:上机前以标准荧光微球调整仪器,使其变异系数稳定在 2%以内, 上机后收集 2万个血小板,荧光强度以对数放大,光散射数据收软盘,测试完后在 Macintosh 650计算机上用CELL QUEST 软件 ( Coulter 公司产品 )分析数据。血小板 CD62p及 P10 含量以其阳性血小板百分率表示,计算方法如下:血小板 CD62P(或 P10)含量= CD62P 或 P10阳性血小板/ ( CD62P 或 P10阳性+ 阴性血小板)@ 100%- 非特异法合细胞的百分比血小板计数、凝血 4项、纤维蛋白酶原含量、DO二聚体,于服药前、服药后 3 d抽血检测。伤口出血情况: 用软皮尺于术前、术后 1 d测量阴囊周径。观察伤口肿胀情况, 分为 1度(伤口轻度肿胀)、2 度(伤口明显肿胀)、3度(伤口重度肿胀,缝线内陷看不见)。3  结  果服药组血小板明显活化, CD62p和 P10与安慰剂组比较有显著意义( P < 0105) , 见表 1。收稿日期: 2004- 03- 10作者简介: 张颂恩( 1977- ) , 男, 福建省南安人, 住院医师。2004 年第 8 卷第 2 期实 用 临 床 医 药 杂 志Journal of Clinical Medicine in Practice# 73 #  服药组 103例中伤口出血肿胀 1、2、3 度分别为 81、22、0例,对照组则分别为 42、58、3例,2组差异明显 ( P < 0105) ; 阴囊周径术前为(1415 ? 013) cm, 术后 1 d 为( 1418 ? 013) cm;对照组则分别为( 1413 ? 014)、( 1516 ? 016) cm,术后 1 d阴囊周径明显大于对照组( P < 0105)。凝血物质和降解产物服药组与对照组比较无差别( P > 0105)。表 1  治疗前后 CD62p、P10表达比较( x ? s )n CD62p( % ) P10( % )服药组  治疗前 103 1165 ? 0157 0197 ? 0136    治疗后 103 9128 ? 4116* 2130 ? 1182*对照组  治疗前 103 1155 ? 0162 0196 ? 0148    治疗后 103 1160 ? 0133 0199 ? 0121   与对照组比较, * P < 01054  讨  论血小板活化后释放出多种分子标志物。近年研究发现 CD62P、P10是最具特异的血小板活化的分子标志物[ 1]。CD62P 抗原分子量 140 kDa,它介导中性粒细胞和单核细胞对活化血小板和内皮细胞的黏附。P10 分子量是 450 kDa, 参与血小板凝集反应。正常情况下, 它们存在于静止血小板的 A颗粒膜表面或内部, 血小板活化时则表达于血小板表面并释放入血浆。本研究发现服用云南白药后 3 d, 患者血小板明显活化, CD62P和 P10明显提高。说明云南白药能活化血小板,对凝血功能起到很好的促进作用。活化血小板含有更多的致密颗粒,更具有活性,能更多释放出 5O羟色胺和 BO血栓蛋白等物质[ 2] , 使血小板之间的聚集和粘附功能加强, 易于发生血小板凝集, 形成血栓或加快血栓形成。本研究对凝血物质和分解产物进行了检测,发现用药前后凝血物质变化不大。降解产物 DO二聚体是纤溶酶作用于交联后纤维蛋白的特异分子标志物,是继发性纤溶的有效指标, 检测 DO二聚体对评估纤溶系统、筛查深静脉血栓等有重要作用[ 3]。本组患者血浆 DO二聚体为阴性, 说明服用云南白药血浆 DO二聚体不增加, 无血栓形成的倾向[ 4]。云南白药止血作用主要作用于损伤的局部。云南白药对损伤有止血、愈伤、消炎、消肿之功。本组服药组患者局部出血、肿胀明显轻于对照组。阴囊处组织疏松稍有出血即引起局部明显肿胀,服药组阴囊肿胀轻,对照组比较有显著意义( P < 0105)。伤口的肿胀情况亦表明服药组明显轻于对照组( P < 0105)。云南白药除了增强局部止血作用外,对炎症过程的介质释放、毛细血管通透性增强、白细胞游走等均有抑制作用,从而发挥抗炎、消肿作用。参考文献[1 ]  Wu Giuoxin. Detention of activaled platelet s using act ivat iondependent monoclonal ant ibody ( s2 ~ 51) in clinical disorders[ J] . Nouv Rev Fr Iiematal , 1992, 34( 1) : 31.[2]  周润香, 徐功杰, 杨建文. 急性脑血管患者血小板四项参数的变化[ J ] . 临床神经病学杂志, 1998, 11( 1) : 58.[ 3]  阮长耿. 血栓与止血[ M ] . 南京: 江苏科学技术出版社,1997. 62.[4]  Verst raete M . Clinical applicat ion of inhibition of f ibrinolysis[ J] . Drugs, 1995, 236( 29) : 261.5实用临床医药杂志6/大肠癌专题0征稿通知  5实用临床医药杂志6/大肠癌专题0正在向全国有关方面的专家征稿。论文的形式不拘, 以研究性论文为主,综述、讲座等亦可, 也欢迎介绍国内外糖尿病研究的新技术、新方法、新进展等方面的论文。论文完成后请通过电子邮件发送至编辑部。论文格式请参照本刊格式。论文一经采用, 即致丰厚稿酬。论文截止时间: 2004年 9月底编辑部地址: 江苏省扬州市淮海路 11路    邮编: 225001电话: 0514- 7978917, 7978807        EOmail: jcm@ yzu. edu. cn#74# 实 用 临 床 医 药 杂 志 第 8 卷

云南白药对外科手术患者血小板活化的影响

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