为探讨实验性糖尿病大鼠血清细胞因子与肾功能不全的相关性 ,用链脲佐菌素 (streptozotocin ,STZ)复制糖尿病动物模型 ,用放射免疫分析法测定血清肿瘤坏死因子 (tumornecrsisfactor,TNF α)和白细胞介素 6(interleukin 6 ,IL 6)含量 ,用比色法测定血清肌酐 (creatinine ,Cr)和尿素氮 (bloodureanitrogen ,BUN)含量。结果表明 ,实验性糖尿病大鼠血清TNF α与Cr和BUN的含量随病程进行性增加 ,TNF α和IL 6与Cr和BUN均明显正相关

付秀云

陶惠然

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  文章编号: 1004-4337( 2003) 05-0464-02    中图分类号: R58711   文献标识码: A实验性糖尿病大鼠血清细胞因子与肾功能不全的相关性研究陶惠然    付秀云*(厦门大学医学院  厦门 361005)摘  要:  为探讨实验性糖尿病大鼠血清细胞因子与肾功能不全的相关性,用链脲佐菌素 ( streptozotocin, STZ)复制糖尿病动物模型,用放射免疫分析法测定血清肿瘤坏死因子( tumor necrsis factor, TNF-A)和白细胞介素-6( interleukin-6, IL-6) 含量,用比色法测定血清肌酐( creat inine, Cr)和尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)含量。结果表明,实验性糖尿病大鼠血清TNF-A与Cr 和BUN的含量随病程进行性增加, TNF-A和 IL-6与 Cr 和 BUN均明显正相关。关键词:  实验性糖尿病;  肿瘤坏死因子;  白细胞介素-6;  肾功能不全  糖尿病肾功能不全是常见的糖尿病微血管并发症, 其病因尚未确定。有文献报道[ 1] , 是在家族聚集性等因素的基础上,诱发免疫机制紊乱而发病。本实验用 STZ复制糖尿病动物模型,旨在观察细胞因子与糖尿病肾功能不全的关系, 从免疫病理学的角度分析其在糖尿病肾功能不全发生中的作用。1  材料与方法111  药品与试剂STZ系 sigma公司产品; TNF-A和 IL-6 放免试剂盒由北京帮定公司提供; Cr检测药盒由北京中生生物工程技术公司提供; BUN检测药盒为上海科信生物技术研究所产品。112  动物分组和模型制备Wistar雄性大鼠 22 只,体重 250350g, 由本校实验动物中心提供。随机分为正常对照组、糖尿病一周组和糖尿病四周组。糖尿病组均在乙醚麻醉下,于腹腔注射STZ 60mg/ kg ( 0. 1mol/ L枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液 pH4. 2) , 术后 72 小时测定空腹血糖,血糖 1630mmol/ L者纳入糖尿病组; 正常对照组一次性腹腔注射与 STZ等量的生理盐水。113  血糖测定采用邻甲苯胺法。114  血清TNF-A和 IL-6 含量测定分别按药盒说明书提供的方法进行。115 血清 Cr 和 BUN含量的检测分别按药盒说明书的方法进行。116 统计学处理数据以均数 ? 标准差( x ? s )表示, 各组间差异的显著性检验采用 t检验; TNF-A、IL-6 与 Cr、BUN 的相关性用直线相关直接法计算相关系数, 用直接查表法进行相关系数的显著性检验[ 2]。2 结果211 血糖浓度的变化正常对照组大鼠血糖 6. 36 ? 0. 59mmol/ L, 糖尿病一周组25. 04 ? 4. 29mmol/ L, 糖尿病四周组 21. 59 ? 3. 07mmol/ L , 糖尿病组大鼠血糖明显高于正常对照组( P < 0. 01)。212 血清 TNF-A、IL-6 和 Cr、BUN含量的变化血清TNF-A随病程的延长而明显升高, 第一周和第四周组均明显升高( P < 0. 01) ; IL-6 随病程延长而增加, 但无显著性差异( P> 0. 05)。血清 Cr 和 BUN 的含量在糖尿病的早期(第一周)时升高不明显( P> 0. 05) , 晚期(第四周)时明显增高( P< 0. 05) , 见表 1。213 糖尿病大鼠血清 TNF-A、IL-6与 Cr、BUN的相关性分析各组内TNF-A和 IL-6 与 Cr和 BUN都有明显的正相关, 见表 2。表 1 糖尿病大鼠血清 TNF-A、IL-6 含量和 Cr、BUN含量变化组别 动物数 TNF-A( mg/ dl) IL-6( pg/ ml) Cr( mg/ dl) BUN( mmol/ L)正常对照组 8 1. 85? 0. 18 118. 6? 23. 7 0. 67 ? 0. 05 3. 38 ? 0. 27糖尿病一周组 8 3. 89? 0. 93* * 123. 7? 28. 7v 1. 66? 0. 45v 7. 98 ? 0. 65v糖尿病四周组 6 5. 27? 0. 48* * 149. 7? 36. 5v 3. 10? 0. 30* 12. 02 ? 0. 96*    注:与正常对照组比较 * P< 0. 05, * * P< 0. 01, v P> 0. 05。#464#Journal of Mathematical Medicine                 Vol. 16  NO. 5  2003* 黑龙江省宾县医院表 2 糖尿病大鼠血清 TNF-A和 IL-6 与 Cr和 BUN的相关性组别 TNF-A与 Cr 的C TNF-A与 BUN的C IL-6与 Cr 的C IL-6 与 BUN的C正常对照组 0. 796(P < 0. 05) 0. 869( P< 0. 05) 0. 853( P < 0. 05) 0. 812( P < 0. 05)糖尿病一周组 0. 832(P < 0. 05) 0. 846( P< 0. 05) 0. 796( P < 0. 05) 0. 805( P < 0. 05)糖尿病四周组 0. 936(P < 0. 05) 0. 895( P< 0. 05) 0. 883( P < 0. 05) 0. 889( P < 0. 05)3  讨论胰岛素依赖型糖尿病是遗传与环境因素共同作用的复杂病。糖尿病肾功能不全是糖尿病慢性并发症之一。有研究表明其发生机制涉及糖、脂代谢障碍, 血液动力学、血液流变学异常,遗传因素, 细胞免疫功能紊乱等多个环节。细胞因子是细胞免疫的主要效能分子,TNF-A和 IL-6 是细胞因子家族中的重要成员,TNF-A由激活的单核-巨噬细胞系统产生, 可刺激血管内皮细胞增殖, 诱导新生血管形成, 促进微血管病变的发生。IL-6 由活化的单核细胞、巨噬细胞、T 淋巴细胞和内皮细胞等合成,其合成和分泌受 TNF-A的调节, IL-6的过度合成, 可使机体内环境紊乱而引发和加重某些疾病。本实验证实, 糖尿病大鼠血糖持续升高; 血清 TNF-A在病程的不同时期均有明显升高; IL-6 随病程呈增高之趋势 ,但无显著性差异。血清Cr和 BUN随血清 TNF-A和 IL-6 呈同步性增高, 在糖尿病的一周内无明显差异, 在第四周时明显增高, 表明已有明显的肾功能不全,且 TNF-A和 IL-6与 Cr 和 BUN均呈明显正相关。说明TNF-A和 IL-6与糖尿病肾功能不全的发生密切相关,其中起主要作用的是TNF-A。参  考  文  献1 沈雅舟,主编 1 糖尿病慢性并发症 1 上海:上海医科大学出版社,1999, 412 四川医学院主编1 卫生统计学1 北京:人民卫生出版社, 1985, 6772.收稿日期: 2003- 05- 22  文章编号: 1004-4337( 2003) 05-0465-02    中图分类号: R59516   文献标识码: A微量酒精对体内外部分血清酶的影响尹斯利   袁汉尧   李少华(广东医学院附属医院检验科  湛江 524001)摘  要:  为了探讨微量酒精对体内外部分血清酶活性的影响,观察了 28名健康志愿者口服 52 e 白酒前后不同时间检测血液中酒精浓度及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶( AST)、C-谷氨酰转肽酶 ( GGT)、碱性磷酸酶( ALP)、淀粉酶( AMS)、脂肪酶( LIPA)活性的变化;同时在血清中加入与体内浓度相近的酒精,以观察酒精对酶活性的直接影响。结果显示,微量酒精对酶活性均有直接抑制作用,但在体内则可使部分血清酶活性增高。因此在常规血清酶学检测中,应避免酒精在体内外对待检样品的污染。关键词:  酒精中毒;  血清学;  酶类  由于受中国传统酒文化的影响, 我国饮酒人群居多, 有关酒精中毒导致机体损伤和相关疾病的报道很多, 过量饮酒可引发脂肪、蛋白质、糖代谢紊乱,心血管疾病、胃、十二指肠、糖尿病及脂肪、酒精肝等多种疾病的发生。酒精摄入机体后, 通过循环吸收入血液,在血液中能够存留一定时间, 因此对血清酶活性测定产生一定的影响, 同时酒及其代谢产物可致组织细胞通透性增加甚至坏死,使细胞内酶过量释放入血。目前,虽然已有酒精中毒导致血清酶活性改变的报道, 但微量酒精对血液酶活性测定直接影响的报道不多。为探讨饮酒后或食用含酒精食品,甚至在采血过程中酒精对血液样品污染所致血清酶科学研究性测定结果的影响, 我们对微量酒精的体内外所致 ALT、AST、GGT、ALP、AMS、LIPA活性测定结果的影响同时进行了观察探讨。1 材料和方法111 受试对象健康志愿者 28例 ,男16名, 女12 名,年龄 4555 岁,志愿者入选前查体排除肝、肾、心血管和神经系统疾病, 血液生化指标检查均在正常范围内, 1 周内无饮酒史, 且无长期酗酒史。112 样品采集受试者正常饮食后 3h 采静脉血 3ml作对照。采血后立即饮贵州茅台液 52e ( 1ml/ kg 体重) , 开始计时,并分别于 0. 5、1、#465#数理医药学杂志                  2003年第 16 卷第 5 期

实验性糖尿病大鼠血清细胞因子与肾功能不全的相关性研究

http://dspace.xmu.edu.cn/bitstream/handle/2288/17944/%e5%ae%9e%e9%aa%8c%e6%80%a7%e7%b3%96%e5%b0%bf%e7%97%85%e5%a4%a7%e9%bc%a0%e8%a1%80%e6%b8%85%e7%bb%86%e8%83%9e%e5%9b%a0%e5%ad%90%e4%b8%8e%e8%82%be%e5%8a%9f%e8%83%bd%e4%b8%8d%e5%85%a8%e7%9a%84%e7%9b%b8%e5%85%b3%e6%80%a7%e7%a0%94%e7%a9%b6.pdf?sequence=1&isAllowed=y

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