Expression von Reduktasen in kontinuierlichen Saeugetierzellkulturen und ihre Bedeutung fuer die Aktivierung von Nitroaromaten am Beispiel des 1,6-Dinitropyrens

Abstract

The aim of the first part of the work was to establish the metabolism of 1,3- and 1,6-DNP in intact cells. This gave rise to the following questions. What metabolites are formed in cell lines with different enzyme outfits? What influence does the induction of P450 have on the metabolism of the two nitroaromates? Does the metabolism found in the different test cell lines permit any conclusions as to the activating mechanism of 1,6- and 1,3-DNP. In the second part these test cell lines were studied with respect to the expression of the reductases that might be involved in the metabolism of aromates. The following questions were of focal interest: Are cytochrome reductase, DT diaphorase and xanthine-oxidase expressed in the cell lines? If so, to what extent? Can these enzymes be induced in the test cell lines? In the last part the enzymes that reduce 1,6-DNP to gene-toxic products were identified. This required clarifying the following: What role do the above-mentioned reductases play in the activation of 1,6-DNP in individual cell lines? Are there other enzymes responsible for the activation of 1,6-DNP? (MG)Der erste Teil der Arbeit hatte zum Ziel, den Metabolismus von 1,3- und 1,6-DNP in intakten Zellen aufzuklaeren. Dabei stellten sich folgende Fragen: -Welche Metabolite werden in Zellinien mit unterschiedlicher Enzymausstattung gebildet? - Welchen Einfluss hat die Induktion von P450 auf den Metabolismus der beiden Nitroaromaten? - Lassen sich anhand des Metabolismus in den verschiedenen Testzellinien Aussagen ueber die Aktivierungsmechanismen von 1,6- und 1,3-DNP treffen? Im zweiten Teil wurden diese Testzellinien auf die Expression der Reduktasen, die am Metabolismus von Nitroaromaten beteiligt sein koennen, untersucht. Im Vordergrund des Interesses standen die Fragen: - Werden die Cytochrom c Reduktase, DT-Diaphorase und Xanthin-Oxidase in den Zellinien exprimiert? Und wenn ja, in welchem Ausmass? - Sind diese Enzyme in den Testzellinien induzierbar? Im letzten Teil wurden die Enzyme, die 1,6-DNP zu ihren gentoxischen Produkten reduzieren, identifiziert. Dabei galt zu klaeren: -Welche Rolle spielen die oben genannten Reduktasen bei der Aktivierung von 1,6-DNP in einzelnen Zellinien? - Gibt es weitere Enzyme, die fuer die Aktivierung von 1,6-DNP verantwortlich sind? (MG)SIGLEAvailable from TIB Hannover: RO 2674(1993,25) / FIZ - Fachinformationszzentrum Karlsruhe / TIB - Technische InformationsbibliothekDEGerman