CARACTERISATION FONCTIONNELLE DE LA PROTEINE A MOTIF AT-HOOK D1 DE DROSOPHILE

Abstract

LE AT HOOK EST UN MOTIF DE RECONNAISSANCE STRUCTURALE DE L'ADN RICHE EN PAIRES DE BASES DA_DT. DANS LES GENOMES EUCARYOTES, CES ADNS SONT PARTICULIEREMENT ENRICHIS DANS DEUX GRANDES FAMILLES DE SEQUENCES : CERTAINS SATELLITES DE L'HETEROCHROMATINE ET PLUSIEURS DOMAINES FONCTIONNELS DE L'EUCHROMATINE TELS QUE LES SEQUENCES D'ATTACHEMENT A L'ECHAFAUDAGE NUCLEAIRE (SEQUENCES SAR) ET LES ELEMENTS FRONTIERES (BE). LES PROTEINES DE LA FAMILLE HMG-I CONTIENNENT PLUSIEURS MOTIFS AT HOOK, ASSOCIES A UN DOMAINE C-TERMINAL ACIDE. DANS LE BUT D'ABORDER LE ROLE DE CES PROTEINES IN VIVO, NOUS AVONS CARACTERISE EN DETAIL LA PROTEINE HMG-I LIKE D1 DE DROSOPHILA MELANOGASTER. D1 EST EXPRIMEE TOUT AU LONG DU DEVELOPPEMENT DE LA DROSOPHILE, MAIS SA LOCALISATION PRESENTE UN ASPECT PARTICULIEREMENT DYNAMIQUE : DISTRIBUEE DE MANIERE HOMOGENE DANS LES NOYAUX DES CELLULES TRANSCRIPTIONNELLEMENT INACTIVES, ELLE EST RETROUVEE ASSOCIEE A UN NOMBRE RESTREINT DE SITES SUR LES CHROMOSOMES DE CELLULES ACTIVES. CETTE CORRELATION ENTRE ACTIVITE TRANSCRIPTIONNELLE ET LOCALISATION DE D1 SUGGERE UN ROLE DANS LA FORMATION DE STRUCTURE CHROMATINIENNES ASSOCIEES A L'EXTINCTION DE L'EXPRESSION GENIQUE. D1 EST PAR AILLEURS PREFERENTIELLEMENT ASSOCIEE AUX SEQUENCES SATELLITE DE DENSITE 1.688 G/CM 2 RICHES EN DA_DT (SATIII) QUI CONSTITUENT L'HETEROCHROMATINE CENTROMERIQUE DU CHROMOSOME X DE LA DROSOPHILE. L'ETUDE DU PHENOMENE DE VARIEGATION DE L'EXPRESSION DU GENE WHITE PLACE A PROXIMITE DU SATIII NOUS A PERMIS DE DEMONTRER QUE LA SUREXPRESSION DE D1 CONDUISAIT A UNE DIMINUTION DE L'EXPRESSION DE WHITE, ALORS QU'UNE DIMINUTION DE SON EXPRESSION (PAR INSERTION DE L'ELEMENT EP 4 7 3 DANS LA REGION PROMOTRICE DU GENE) INDUIT UN ACCROISSEMENT DE L'EXPRESSION DE WHITE (SUPPRESSEUR DE VARIEGATION) SUGGERANT UNE IMPLICATION DIRECTE DE D1 DANS LA FORMATION D'UNE STRUCTURE CHROMATINIENNE INACTIVE. DE PLUS, L'EXPRESSION D'UNE FORME DE D1 PRIVEE DE SA PARTIE C-TERMINALE ACIDE OU D'UN POLYPEPTIDE COMPOSE DE VINGT REITERATIONS DU MOTIF AT HOOK A UN EFFET OPPOSE, SE TRADUISANT PAR UNE FORTE SUPPRESSION DE LA VARIEGATION DU GENE WHITE. NOS RESULTATS SUGGERENT QUE CET EFFET RESULTE D'UNE COMPETITION POUR LES CIBLES D'ADN QUE CONSTITUENT LE SATIII, SANS LA COMPLEMENTATION FONCTIONNELLE QUI SERAIT APPORTEE PAR LE DOMAINE C-TERMINAL ACIDE DE D1. NOUS AVONS DONC IDENTIFIE D1 COMME UN COMPOSANT A LA FOIS STRUCTURAL ET FONCTIONNEL DE L'HETEROCHROMATINE, ET DONT L'ASSOCIATION AVEC LES SEQUENCES RICHES EN DA_DT DU SATELLITE III PERMETTRAIT DE CIBLER LE RECRUTEMENT DE PARTENAIRES PROTEIQUES PAR INTERACTION AVEC SON DOMAINE C-TERMINAL.TOULOUSE3-BU Sciences (315552104) / SudocSudocFranceF