Etude d'une collectine, la MBL (Mannan Binding Lectin), au niveau intra-hépatocytaire

Abstract

La Mannan Binding Lectin (MBL) est une lectine complexe présentant une dualité : une partie lectine spécialisée dans la fixation sur des polysaccharides et une partie de type collagène responsable d'autres interactions. Le but de ce travail a été d'analyser la MBL intracellulaire au cours de sa synthèse par des cellules hépatocytaires ; les résultats principaux concernent les formes de MBL de faible poids moléculaire. Le premier volet de l'étude a concerné l'obtention de matériel biologique et la mise au point de techniques indispensables pour l'expérimentation envisagée : une technique de purification de la protéine MBL à partir du sérum humain, un test fonctionnel basé sur le clivage de C4 par le complexe MBL/MASP-2. L'intérêt potentiel de ce test a été illustré dans le suivi de patients atteints d'hépatite C chronique. L'essentiel du travail a concerné l'étude de la MBL intracellulaire dans l'hypothèse d'un rôle en relation avec la structure de ses formes intracellulaires. Les résultats obtenus basés sur une compétition avec du D-mannose indiquent une fixation de certaines formes de MBL intracellulaire de faibles poids moléculaires (60 kDa) par leur partie lectine ; ceci évoque une fonction de type chaperon. Les résultats obtenus après ajout de collagénase ou d'un plasma déficitaire en MBL, utilisé comme source de MASPs, suggèrent l'association d'un ligand à la partie collagène de la MBL de faible poids moléculaire. Une relation entre le polymorphisme du gène de structure de la MBL et la réactivité de la partie collagène de cette protéine a été observée après action de la collagénase. Des mutations présentes au niveau des codons 54 ou 57 du gène de la MBL pourraient conduire à une modification de la structure du collagène et à une perturbation de sa réactivité. Un autre point de ce travail a été de tenter d'identifier une protéine associée à la MBL, mais ces essais avec des ligands potentiels de localisation hépatique, n'ont pas été concluants dans les conditions expérimentales choisies. En fonction de la complexité de cette lectine bifonctionnelle, les éléments acquis lors de ce travail posent de nombreuses questions et nécessiteront des études plus approfondies au niveau circulant et intracellulaire.GRENOBLE1-BU Sciences (384212103) / SudocSudocFranceF