Régulation neurohormonale de l'activité et de l'expression de la NO synthase de type I et identification de canaux cibles de cette nouvelle voie de signlisation dans la cellule gonadotrope hypophysaire

Abstract

Afin de rechercher une implication physiologique à la NO synthase (NOS 1) récemment identifiée dans la cellule gonadotrope, nous avons suivi les niveaux d'enzyme et de GMPc hypophysaires au cours du cycle oestrien chez la ratte et montré leur élévation importante, transitoire et GnRH-dépendante au pro-oestrus. "In vitro" (cellule antéhypophysaires en culture) nous avons retrouvé les effets stimulants de la GnRH sur l'expression de NOS I et la production de GMPc et caractérisé ceux d'un autre peptide hypophysiotrope, le PACAP. Enfin, nous avons montré la présence (ARNm et/ou protéines) des sous-unités de canaux CNG (cyclic nucleotide-gated channels) dans les cellules gonadotropes du rat normal et castré et démontré en "patch-clamp" leur fonctionalité. L'ensemble argue en faveur d'un rôle de NOS I et du GMPc dans la signalisation de la GnRH et du PACAP et dans le fonctionnement de la cellule gonadotrope avec une contribution des canaux CNG à l'excitabilité cellulaire et aux flux de calcium.To evaluate the physiological implication of the neuronal type nitric oxide synthase (NOS I) recently identified in gonadotrophs we determined the pituitary levels of this enzyme and of cGMP during the estrus cycle in the female rat thus demonstrating their marked, transient and GnRH-dependent increase at pro-estrus. "In vitro" (cultured anterior pituitary cells) a stimulatory effect of GnRH was similarly observed on NOS I expression and cGMP production whereas the effects of another hypophysiotropic peptide, PACAP, were characterized. Finally, we demonstrated the presence (mRNA and protein) of cyclic nucleotide-gated (CNG) channel subunits (olfactory and retinal type) in gonadotrophs of intact and castrated rat that appeared functional using patch-clamp analysis. Altogether, data argue in favor of a role of NOS I and cGMP in the GnRH and PACAP signaling as well as in the physiology of gonadotrophs with a specific contribution of CNG channels to cell excitability and calcium fluxes.PARIS5-BU Saints-Pères (751062109) / SudocSudocFranceF