Etude de P450s impliqués dans la biosynthèse des furocoumarines chez Ruta graveolens

Abstract

Ruta graveolens est une plante présentant des fortes teneurs en 5-méthoxypsoralène (5-MOP), une furocoumarine particulièrement intéressante d'un point de vue médical. Nous avons choisi d'étudier les étapes enzymatiques clés de la biosynthèse de cette molécule. Ces étapes sont catalysées par des cytochromes P450. Les travaux effectués au cours de cette thèse ont porté sur le clonage et la caractérisation de plusieurs de ces P450s (la Cinnamate 4-hydroxylase (C4H) et deux psoralène monooxygénases). Un ADNc complet codant pour la C4H a été isolé, et exprimé dans la levure. Après avoir caractérisé l'enzyme recombinante, nous avons mis en évidence un phénomène d'inactivation auto-catalytique de la C4H par le psoralène et le 8-MOP. Nous avons par ailleurs mis en évidence que les C4Hs de R.graveolens et de P.crispum - deux plantes productrices de furocoumarines - sont moins sensibles à l'inactivation par les furocoumarines que la C4H de H.tuberosus.NANCY/VANDOEUVRE-INPL (545472102) / SudocSudocFranceF