Rôle des inhibiteurs de CDK dans la différenciation conjointe de l'ovocyte et des cellules du cumulus chez le bovin

Abstract

Chez le bovin, l'ovocyte bloqué en prophase méiotique acquière séquentiellement son aptitude à reprendre la méiose, puis à se développer. Cette période de différenciation terminale permet le stockage d'ARN et de protéines, probablement nécessaires au développement embryonnaire précoce. Les ovocytes sortis du follicule reprennent spontanément la méiose. Une étape de pré-culture, mimant le blocage méiotique, pourrait leur permettre d'achever cette différenciation in vitro. Nous avons montré que l'utilisation de la roscovitine, inhibiteur spécifique du MPF, permet de cultiver des ovocytes en arrêt méiotique sans détériorer leur compétence au développement, ni la fonctionnalité des cellules du cumulus. Cette molécule nous a aussi permis d'améliorer notre compréhension des régulations du cycle cellulaire de l'ovocyte bovin et plus précisément de mettre en évidence l'existence d'au moins une voie de signalisation non directement liée à l'activité du MPF. Ces connaissances devraient permettre de définir des conditions de culture optimisées mais aussi la compréhension des mécanismes de reprise de la méiose des ovocytes et le discernement des événements liées à l'activité du MPF durant cette reprise.In bovine, oocytes which are blocked in meiotic prophase acquire sequentially their competence to resume and complete meiosis and the potential for development. This period of oocyte terminal differentiation allows the storage of maternal RNA and proteins necessary for embryos development. In vitro, as son as extracted from their follicular environment, oocytes spontaneously resume meiosis. A preliminary culture allowing the maintenance of oocytes at meiotic prophase might allow them to complete this differentiation step in vitro. We showed that the use of roscovitine allowed maintaining oocytes in meiotic block without loss of developmental potential, nor cumulus cells functionalities. This work will allow improving the culture conditions of bovine oocytes in order to increase their final developmental competence and will allow a better understanding the mechanisms of meiosis resumption control in oocytes and to distinguish between the events that are related to MPF activation or not in this complex process.TOURS-BU Sciences Pharmacie (372612104) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF