Etude de ligand de l'ADN G-quadruplexe sur la transcription et la prolifération dans des lignées cellulaires humaines

Abstract

Le@ simple brin télomérique peut adopter une structure en G-quadruplexe. Des composés qui stabilisent ces structures sont capables de bloquer la réplication du télomère et d'induire la sénescence et/ou l'apoptose de lignées tumorales. Plusieurs séquences dans le génome sont potentiellement capables d'adopter une structure en G-quadruplexe. Nous avons mis au point un test PCR permettant d'évaluer la stabilisation du G-quadruplexe du promoteur du gène c-myc par des ligands décrits pour stabiliser le quadruplexe télomérique. A l'aide d'une amorce mutée incapable de former le G-quadruplexe, nous avons déterminé la sélectivité de ces ligands. Le 12459 stabilise la formation de G-quadruplexes de l'intron 6 du gène hTERT dans la lignée A549 et inhibe l'activité télomérase par une altération de l'épissage alternatif de ce gène. Nous avons aussi étudié l'effet de l'insertion d'un quadruplexe dans la séquence codante du gène POT1. Dans ce modèle, les ligands n'inhibent pas la transcription/traduction couplée de la protéine. Par contre, la télomestatine inhibe la traduction et des expériences in vitro suggèrent que la transcription pourrait être inhibée par la présence de ces G-quadruplexes. Enfin, nous avons étudié les effets des ligands dans des cellules ALT régulant leurs tailles de télomère par recombinaison génétique. Ces ligands induisent une cytotoxicité à court terme et un arrêt de la prolifération cellulaire à plus long terme. La télomestatine induit un raccourcissement de la taille du simple brin télomérique à court terme et la réexpression de l'activité télomérase dans une lignée ALT induit une résistance partielle à l'entrée en sénescence par les ligands.REIMS-BU Santé (514542104) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF