Caractérisation des liens fonctionnels entre la protéine RhoGap Rgd1 et les protéines Wsc1 et Mid2, deux senseurs de l'état de la paroi chez la levure Saccharomyces cerevisiae (étude de la régulation post-traductionnelle de la protéine Rgd1)

Abstract

La protéine Rgd1 est la RhoGAP de Rho3p et Rho4p chez la levure S cerevisiae. Un crible génétique a permis de mettre en évidence des interactions létales-synthétiques entre les gènes RGD1 et WSC1 ou MID2. La caractérisation de l'interaction génique entre RGD1 et WSC1 a révélé l'implication des protéines Rho3 et Rho4 dans les mécanismes conduisant à la létalité-synthétique du double mutant wsc1deltargd1delta. Les interactions géniques associant d'une part les gènes RGD1 et WSC1 et d'autre part les gènes RGD1 ET MID2 font intervenir des mécanismes différents. Nous proposons un modèle dans lequel Wsc1p et Rgd1p sont impliqués dans la régulation de la sécrétion polarisée. L'étude des mécanismes de régulation post-traductionnelle de Rgd1p a montré que cette protéine est phosphorylée de manière dynamique sur différents acides aminés. La phosphorylation de la protéine Rgd1 permet de réguler sa capacité à dimériser, à interagir avec les phospholipides et son activité RhoGAP.Rgd1p is a RhoGAP for Rho3p and Rho4p, two GTPases involved in a polarized growth in the yeast S. cerevisiae. Using a genetic screen, synthetic lethal interactions between the RGD1 gene and WSC1 or MID2 were discovered. The WSC1 and MID2 genes code for cell sensors that regulate the activity of the cell integrity pathway. Characterization of the genetic interaction between RGD1 and WSC1 revealed the implication of Rho3p and Rho4p in the synthetic lethality. Functional interactions between RGD1 and WSC1 or RGD1 and MID2 where shown to be different. We propose a model in which Wsc1p and Rgd1p act together to regulate polarized secretion. Post-translational regulation studies of Rgd1p showed that this protein is multi-phosphorylated in a dynamic way. Phosphorylation of Rgd1p regulates its ability to form a dinner, to bind phospholipids and also modify its RhoGAP activity toward Rho3p and Rho4p.BORDEAUX2-BU Santé (330632101) / SudocSudocFranceF