Synthèse des aloisines immobilisées

Abstract

Des résultats récents ont montré que l aloisine A (7-nButyl-6-(4-hydroxyphenyl) [5H] pyrrolo[2,3-b]pyrazine) est un puissant inhibiteur des kinases dépendantes des cyclines. Une méthode permettant d identifier d éventuelles cibles cellulaires secondaires d un inhibiteur consiste à l immobiliser sur un support solide, afin d identifier les protéines ayant une forte affinité pour l inhibiteur par chromatographie d affinité d un extrait cellulaire. Dans ce but, l aloisine A portant un bras espaceur, ainsi que son analogue N-méthylé servant de contrôle négatif, ont été synthétisés. Nous rapportons ici la préparation de ces nouveaux dérivés de l aloisine conjugués à une chaîne de triéthylèneglycol en diverses positions de la molécule et terminés par une fonction amine permettant son immobilisation sur une matrice d agarose. Par ailleurs, la stratégie d immobilisation de la molécule via une réaction de cycloaddition [3+2] offre la perspective de synthèses de dérivés de l aloisine conjugués à diverses molécules d intérêt biologique telles que la biotine ou encore la tyrosine facilitant son transport à travers la barrière hémato-encéphaliqueRecent results have shown that aloisine A (7-nButyl-6-(4-hydroxyphenyl)[5H]pyrrolo[2,3-b] pyrazine) is a potent inhibitor of CDK. An original methodology aiming at identifying potential secondary inhibition targets relies on the immobilization of the inhibitor on solid matrix, followed by identification of proteins with high affinity for the inhibitor by affinity chromatography of a cellular extract. To this end, both aloisine A and the negative control N-methyl aloisine bearing extended linker chain have been synthesized. We present here the preparation of the new aloisine analogues bearing a triethylene glycol chain at different positions of the molecule, terminated by an amine suitable for the immobilisation on an agarose-based matrix. Furthemore, we show that conjugation of the molecule with the linker via a cycloaddition [3+2] allows efficient coupling to the matrix as well as access to aloisine derivatives conjugated with biologically relevent molecules such as biotine, or a tyrosine residue targeting LAT1 for transport of drugs through the blood-brain barrierLYON1-BU.Sciences (692662101) / SudocSudocFranceF