Interactions des sous-unités protéasomales et de la protéine Tat du VIH-1

Abstract

Etant la source centrale de production de peptides antigéniques, le protéasome, un complexe multiprotéique qui est un constituant majeur de la voie protéolytique non-lysosomale, semble être une des cibles principales pour les virus. En réponse à une production d'interféron-y lors d'une infection virale, les nouveaux immunoprotéasomes produisent des peptides provenant de la dégradation de protéines virales qui vont alors interagirent avec les molécules de classes I du CMH afin de déclencher une réponse cytosolique en vue d'éliminer les cellules infectées. La réponse immunitaire cellulaire à une infection par le VIH est inhabituelle. Ce phénomène serait dû à la protéine Tat du VIH. Un des buts précis de ce projet était de démontrer les interactions entre les différentes sous-unités alpha du protéasome 20S qui n'ont pas été prédictes auparavant dans l'étude de la structure crystal du protéasome 20S de levure. A l'aide de la technique du double hybride nous avons pu montrer que la sous-unité alpha7 intéragit fortement avec la sous-unité alpha4 ainsi qu'avec les 5 autres sous-unités alpha. Ces résultats ont été également justifié par l'interaction des sous-unités alpha-radiomarquées, aux protéines de fusions GST-alpha. L'autre but de ce projet était de déterminer quelles sous-unités du protéasome 20S interagissaient avec la protéine Tat. Utilisant la technique de chromatographie d'affinité nous avons pu montrer que la protéine Tat intéragissait avec les sous-unités alpha4 et alpha7 ainsi qu'avec 8 pro-sous-unités bêta. En outre, la protéine Tat inhibe partiellement l'interaction entre ces deux sous-unités. D'autre part la protéine Tat inhibe l'activité chymotrypsine du protéasome 20S in vivo. La protéine Tat peut ainsi, d'une part, interférer avec l'assemblage du protéasome 20S et, d'autre part, inhiber la production de peptides antigéniques et donc leurs présentations aux molécules de classes I des cellules infectéesCLERMONT FD-BCIU Sci.et Tech. (630142101) / SudocSudocFranceF