Évaluation préclinique du potentiel thérapeutique d'un inhibiteur de IKK2 et de FLT3 dans le traitement des leucémies aiguës myéloïdes

Abstract

Fms Like Tyrosine Kinase 3 (FLT3) est le gène le plus fréquemment muté de la Leucémie Aiguë Myéloïde. Ces mutations entraînent une activation constitutive de FLT3. A l aide de lignées porteuses des formes sauvages ou mutantes de FLT3, nous avons montré que l activation normale ou oncogénique de FLT3 activait la voie NF-kB. De façon inattendue, nous avons découvert au cours de cette étude que l inhibiteur de IKK2 AS602868 puisqu il cible deux kinases cruciales pour la pathogénèse de la LAM. Dans le but d évaluer le potentiel thérapeutique de AS602868, nous avons comparé l effet de la molécule dans différentes étapes des processus hématopoïétiques et leucémiques. Au cours d expériences in vitro et in vivo nous avons mis en évidence un ciblage pharmacologique préférentiel de la population souche-progénitrice leucémique. Un traitement identique à celui administré aux échantillons de patients a peu ou pas d effets délétères sur l hématopoïèse normale. Nous montrons pour la première fois le ciblage préférentiel in vivo des CSL par un inhibiteur de IKK2. Les résultats de notre recherche permettent d établir que la signalisation normale ou oncogénique de FLT3 peut être la cause de l activation constitutive anormale de la voie de transcription NF-kB observée dans la LAM. Notre étude identifie une nouvelle cible de l inhibiteur de IKK2 et renforce la perspective d utilisation de AS602868 en essai clinique. Pour finir, ce travail de thèse suggère que le ciblage pharmacologique in vivo de cellules souches leucémiques doit être le but recherché des nouvelles thérapies de la LAM.Fms Like Tyrosine Kinase 3 (FLT3) is the most frequently mutated gene in LAM. Its mutations lead to a constitutive activation of FLT3 which constitute a proliferation and survival advantage for leukemic cells. Using cell lines carrying wild type or mutated forms of FLT3, we have shown that both physiological and oncological activation of FLT3 lead to the NF-kB pathway activation. Surprisingly, we have discovered during this study that the IKK2 inhibitor AS602868 directly interferes with the FLT3 kinase activity. This discovery encourages the therapeutic testing of AS602868, as it is targeting two kinases that play major roles for the pathogenesis of AML. To evaluate the therapeutic potential of AS602868, we have compared its effect on different steps of both the hematopoietic and leukemic process, in different types of experiments. In vitre and in vivo experiments have all demonstrated the existence of a pharmacological targeting of the stem-progenitor leukemic population by AS602868. The identical treatment in the control conditions had no or very few side effects on the normal haematopoiesis. We show for the first time the preferential targeting of the LSCs in vivo with an IKK2 inhibitor. Our results show that both normal and oncogenic activation of FLT3 can lead to the abnormal constitutive activation of the NF-kB pathway, present in AML. Our study identifies a new target of the IKK2 inhibitor AS602868 and reinforces the perspects of its use in the clinic. Finally, this work suggests that the pharmacological targeting of the leukemic stem cells in vivo has to be the main objective of the new therapies of AML.NICE-BU Sciences (060882101) / SudocSudocFranceF