Rôle de la protéine CFTR et du canal K+ TASK2 dans les phénomènes de régulation du volume des cellules du tubule proximal de rein de souris

Abstract

Le but de cette étude était de comprendre d une part le mécanisme d activation du canal K+ TASK2 au cours de la RVD et d autre part le rôle de TASK2 et de CFTR dans un autre phénomène de régulation cellulaire intervenant durant l apoptose : l AVD (Apoptotic Volume Decrease). Pour cela, nous avons utilisé des lignées de cellules proximales provenant de rein de souris sauvages ou invalidées respectivement pour les gènes codant pour ces 2 protéines d intérêt (TASK2 et CFTR). Lors de l étude du mécanisme de régulation de TASK2 pendant la RVD (Regulatory Volume Decrease), nous avons montré que le choc hypotonique induit un flux de Cl- à travers du canal Cl- de type VRCC qui serait une driving force pour la sortie de HCO3- par l échangeur Cl-/HCO3- entraînant l alcalinisation du pH externe indispensable à l activation du canal TASK2. Lors de l étude du rôle de TASK2 et de CFTR dans l apoptose des cellules proximales, nous avons montré que l application d un agent apoptotique provoquerait un efflux de glutathion relié à l activité de CFTR ce qui permettrait une augmentation des ROS. Au final, cette élévation activerait, par un mécanisme encore inconnu, l augmentation des conductances Cl- de type VRCC et K+ de type TASK2 induisant ainsi une diminution du volume cellulaire indispensable à l entrée des cellules en apoptose. Par contre, dans les cellules task2 -/-, incapables de réguler leur volume lors d un choc hypotonique, nous avons pu mesurer une AVD et une activité de la caspase-3 réduites de 60% comparées aux cellules sauvages. Nous avons mis en évidence une compensation du canal TASK2 par un canal K+ de large conductance sensible au calcium, Maxi-K channel.NICE-BU Sciences (060882101) / SudocSudocFranceF