Effets de peptides vecteurs sur le cytosquelette d'actine après internalisation dans les cellules tumorales

Abstract

Trois peptides vecteurs ont été criblés pour leur capacité à réorganiser le cytosquelette d actine dans des fibroblastes tumoraux (cellules EF). Les peptides vecteurs sont des peptides chargés positivement capables de traverser les membranes plasmiques des cellules. Dans un premier temps, une étiquette stable permettant la quantification de l internalisation et l étude du processus de dégradation de peptides vecteurs via une méthode de quantification du peptide basée sur la spectrométrie de masse MALDI-TOF a été synthétisée. Ainsi, un nouveau peptide vecteur : msr(R/W)9 est capable d entrer et peut s accumuler dans des cellules CHO. Dans une deuxième étude, nous avons testé trois peptides vecteurs sur des fibroblastes tumoraux qui n expriment pas la Zyxine, entraînant alors une désorganisation du cytosquelette d actine. Leurs effets potentiels sur la réorganisation du cytosquelette d actine et la ré-expression de la Zyxine ont été évalués à partir d études de la polymérisation d actine in vitro dans des lysats cellulaires par anisotropie de fluorescence, de la morphologie des fibroblastes par immunomarquage de l actine, de la motilité cellulaire par vidéomicroscopie et enfin de la capacité à croître en indépendance d ancrage. Les résultats obtenus montrent que ces trois peptides semblent réverser le phénotype tumoral des cellules EF alors qu ils sont inactifs sur les fibroblastes sains. Enfin, des expériences de pontage chimique entre ces trois peptides et l actine, nous ont permis de mettre en évidence une zone d interactions, identifiée et caractérisée par spectrométrie de masse, entre ces différents partenaires.PARIS-BIUSJ-Thèses (751052125) / SudocPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF