Étude du protéome des cellules souches embryonnaires et des cellules germinales embryonnaires chez la souris à la recherche de nouveaux marqueurs de pluripotence

Abstract

Les cellules souches (ES) et germinales embryonnaires (EG) sont les 2 principales sources de cellules pluripotentes connues chez les mammifères, et sont un modèle d étude intéressant pour une meilleure compréhension des mécanismes de la pluripotence. Leurs propriétés particulières en font des candidats attractifs pour leur utilisation en thérapie de remplacement cellulaire. Afin d étudier les voies de signalisation impliquées dans la pluripotence, une étude protéomique a été réalisée à partir des cellules ES et EG de souris. Une stratégie de soustraction des protéines contaminantes de l environnement de culture a été appliquée pour l étude du protéome spécifique de ces cellules. Cette approche a permis l identification de deux isoformes (acétylée et non-acétylée) d un marqueur de pluripotence connu, nommé DPPA5. Enfin, cette stratégie de soustraction couplée à un sous-fractionnement nucléaire a permis l identification de PRMT7, un nouveau marqueur potentiel de la pluripotence.Embryonic stem cells (ESCs) and embryonic germ cells (EGCs) are the major pluripotent mammalian cells currently known and provide exciting models for understanding the underlying mechanisms that make a cell pluripotent. Furthermore, their particular properties make ESCs and EGCs very attractive candidates for cell replacement therapy. In order to investigate signaling pathways potentially involved in pluripotency, proteomic analyses have been performed on mouse ESC and EGC proteins. A subtractive strategy (subtracting culture environment contaminating proteins) was applied for the study of the specific proteome of these cells. This approach led to the identification of two isoforms (with and without N-terminal acetylation) of a known pluripotency marker, namely DPPA5. Furthermore, we demonstrated the efficiency of our subtracting strategy, in association with a nuclear subfractionation by the identification of a new protein (PRMT7) behaving as proteins involved in pluripotency.STRASBOURG-Sc. et Techniques (674822102) / SudocSudocFranceF