Caractérisation phénotypique et fonctionnelle de la protéine PA3731 de Pseudomonas aeruginosa

Abstract

Dans le cadre d une recherche de nouvelles cibles contre les biofilms à P. aeruginosa, nous avons identifié une protéine impliquée dans l adhésion bactérienne. Nous avons alors caractérisé le phénotype du mutant pA3731 correspondant. Ce mutant est profondément altéré dans : sa capacité à adhérer, son swarming, sa production de rhamnolipides, sa virulence et sa résistance à la tobramycine. Une analyse du génome a montré que ce gène appartient à un cluster (pA3729-pA3732) codant pour des protéines hypothétiques. Par sa structure secondaire la protéine PA3731 est proche de PspA d E. coli. Néanmoins, des différences avec le cluster psp nous ont conduits à baptiser le cluster bac pour Biofilm Associated Cluster. Pour déterminer la fonction du système bac, nous avons analysé l incidence d un inhibiteur de systèmes d efflux, les sécrétomes et réalisé des études des complexomes. Ces travaux préliminaires n ont pas encore apporté d éléments probants au niveau de la fonction du système bac.Biofilms are prevalent in diseases caused by P. aeruginosa. We previously identified a hypothetical protein of this bacterium that was accumulated by biofilm cells. We showed here that a pA3731 mutant is profoundly impaired in its ability to adhere, in swarming, in the rhamnolipides production, in virulence and in resistance to tobramycin. The protein PA3731 has a predicted secondary structure similar to that of the PspA of E. coli and belonged to a cluster of 4 genes (pA3729-pA3732) not previously described. However, some differences led us to named this locus bac for biofilm-associated cluster. In the aim to provide preliminary hypotheses to bac function, we compared the effect of an inhibitor of efflux systems, on the wild-type and mutant strains. We also initiated analyses of the strain secretomes and performed complexome studies by electrophoresis blue-native. These preliminary investigations have yet to provide evidence in the function of the bac system.ROUEN-BU Sciences (764512102) / SudocSudocFranceF