Production de virus de l'hépatite C infectieux en culture primaire d'hépatocytes humains adultes

Abstract

L infection par le Virus de l Hépatite C (VHC) représente un grave problème de santé publique à travers le monde. Bien que la production de virus en culture cellulaire (VHCcc) ait été rendue possible en utilisant des sous clones de la lignée Huh7 issue d un hépatocarcinome humain, les recherches basiques et appliquées sur le virus restent pénalisées par l absence d un modèle de culture cellulaire capable de reproduire le cycle viral complet dans les cellules hôtes naturelles du VHC, c'est-à-dire les hépatocytes humains primaires, cellules normales, quiescentes et hautement différenciées. Ici nous avons développé un système permettant de cultiver le VHC en culture primaire d hépatocytes humains adultes. Tout en maintenant l expression de leurs marqueurs de différenciation, les hépatocytes humains primaires inoculés avec des particules virales VHCcc permettaient une réplication intracellulaire forte du génome viral. Surtout, ces hépatocytes normaux produisaient de nouveaux virions infectieux (appelés VHCpc, pour virus produits en culture primaire) avec des titres comparables à ceux obtenus avec les cellules transformées Huh7. Cependant, les VHCpc présentaient une meilleure infectiosité spécifique et une densité plus faible que les VHCcc, reproduisant plus précisément les caractéristiques des complexes virus/lipoprotéines produits durant l infection in vivo. Ces deux propriétés étaient perdues après re-culture en cellules Huh7, suggérant que les virions authentiques ne peuvent être produits qu en culture d hépatocytes normaux. En conclusion, nous avons établi un système de culture cellulaire simple mais robuste permettant de reproduire le cycle viral complet du VHC dans des hépatocytes humains hautement différenciés, constituant ainsi un modèle in vitro plus pertinent pour l étude des interactions du VHC avec sa cellule hôte naturelle et permettant la validation de traitements antiviraux candidats dans le contexte d une physiologie hépatocytaire authentique.PARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF