Analyse fonctionnelle de mutations du gène CLN5 impliquées dans la maladie de Dent

Abstract

La maladie de Dent est une maladie rénale héréditaire liée au chromosome X. Elle apparait dès l enfance ou à l âge adulte et se traduit par une protéinurie de bas poids moléculaire accompagnée le plus souvent d une hypercalciurie, d une hyperphosphaturie et d une néphrocalcinose. Cette atteinte du tubule contourné proximal conduit régulièrement à une insuffisance rénale terminale, elle est due à la mutation du gène CLCN5 codant le transporteur ClC-5. L ensemble du travail a permis de classer les mutants ClC-5 en trois types. Les ClC-5 mutants de type 1 (16% des mutations) présentent une maturation N-glycosidique et une localisation subcellulaire normale mais une conduction altérée voire abolie. Les mutants de type 2, les plus courants (75% des mutations), démontrent une altération de leur maturation N-glycosidique, ainsi qu une absence d adressage à la membrane plasmique et aux endosomes précoces en raison de leur rétention dans le réticulum endoplasmique par les systèmes contrôle-qualité. Enfin, les mutants de type 3 voient la stabilité de leur forme mature diminuer par rapport à la protéine sauvage, provoquant ainsi une réduction de leur expression à la membrane plasmique. En revanche, leur adressage aux endosomes précoces n est pas altéré. En conclusion, ce travail de thèse aura permis de mieux comprendre l impact fonctionnel de mutations dans le gène CLCN5 en vue d une éventuelle intervention pharmacologique adaptée en fonction du type de défaut observé. Il aura aussi permis d identifier des zones clés de la protéine pour la conduction ionique et servira de point de départ à d autres études plus poussées sur les conductances de H+ et de Cl- des mutants de type 1.PARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF