Étude des réponses lymphocytaires T à l'antigène de mélanome Melan-A/MART-1

Abstract

La protéine Melan-A exprimée par la majorité des mélanomes contient deux épitopes chevauchants de forte antigénicité restreints HLA-A2. Ces épitopes sont donc souvent ciblés dans les immunothérapies de ce cancer. L efficacité clinique de ces traitements reste décevante. Au moins deux causes peuvent l expliquer: l incapacité de ces approches à induire une présentation croisée des épitopes CD8 par des cellules dendritiques et/ou la non stimulation de réponse CD4 helper. Mon travail de thèse aborde ces questions par la recherche de nouveaux épitopes de Melan-A et par l étude de la capacité d un glycociblage à induire la présentation croisée de cet antigène. J ai montré 1) l existence, dans la région 51-73 de Melan-A, d un nouvel epitope CD4 et d un épitope CD8, 2) l internalisation de glycoconjugués liés au peptide Melan-A16-40 27L par les récepteurs au mannose et DC-SIGN exprimés à la surface des cellules dendritiques, 3) que cette internalisation induit la présentation croisée par les cellules dendritiques de l épitope 26-35 et l expansion de lymphocytes T CD8+ spécifiques de forte avidité. Enfin, j ai observé la capacité intrinsèque du peptide 16-40 à induire la présentation croisée de l épitope 26-35 et l expansion de T CD8 et CD4 spécifiques de Melan-A. La stimulation de PBMC par ce long peptide devrait permettre de caractériser les réponses CD4 spécifiques et de déterminer l intérêt potentiel en vaccination de ce peptide seul ou conjugué à un système de ciblage aux cellules dendritiquesThe Melan-A protein, expressed by a majority of melanoma tumor cells, contains two highly antigenic HLA-A2 restricted epitopes. So, these epitopes are frequently targeted in melanoma immunotherapy. The clinical efficiency of these treatments is still disappointing. At least two major reasons can explain that: the incapacity of these strategies to induce CD8 epitope cross-presentation by dendritic cells and/or the non-stimulation of CD4+ helper T cell responses. My PhD work addressed these questions by looking for new Melan-A epitopes and by studying the ability of a glycotargeting to induce antigen cross-presentation. I demonstrated 1) the presence, in Melan-A 51-73 region, of a novel CD4+ epitope and of a CD8+ epitope, 2) the internalization of glycoclusters conjugated to Melan-A16-40 27L via Mannose Receptor and DC-SIGN expressed on dendritic cells, 3) that this internalization induce the epitope 26-35 cross-presentation by dendritic cells and the expansion of high avidity specific CD8+ T lymphocytes. Finally, I observed the intrinsic capacity of the long peptide Melan-A16-40 to induce epitope 26-35 cross-presentation and the expansion of specific CD4+ and CD8+ T lymphocytes. PBMC stimulation by this long peptide should allow to characterize Melan-A specific CD4+ T cell responses and to determine the potential interest to use this peptide in vaccination, either alone or combined with a system to specifically target dendritic cellsNANTES-BU Sciences (441092104) / SudocSudocFranceF