Rôle des voies de signalisation de deux protéines kinases, Erk et Akt, dans l effet anti-œdémateux de l érythropoïétine

Abstract

Notre équipe avait montré que l érythropoïétine (EPO) diminuait significativement l œdème cérébral (OC) des rats soumis à un traumatisme crânien diffus (TC). Cette diminution était accompagnée de modifications intracérébrales précoces de phosphorylation des protéines kinases Erk et Akt. Dans cette étude, nous avons tenté de mettre en évidence un lien causal entre les modifications de phosphorylation observées et la diminution de l œdème cérébral, par inhibition de ces protéines kinases. Afin d inhiber Erk et Akt directement en intracérébral, un modèle d injection intracérébroventriculaire a été validé par injection intracérébrale d encre de Chine et visualisation en microscopie optique. L inhibiteur de Erk, U0126 ou d Akt, LY294,002 ont été injectés juste avant le traumatisme crânien. L EPO (5 000 UI/kg) a été administrée par voie intraveineuse 30 minutes après le TC. La phosphorylation des protéines kinases était mesurée à 1 heure (H1) et l œdème cérébral était évalué par gravimétrie à 2 heures (H2). L inhibition de Akt n a pas modifié l OC post-TC et l administration d EPO est demeurée sur l OC. Akt ne semble donc pas jouer de rôle dans l effet anti-œdémateux de l EPO. Après inhibition de Erk, la diminution de l OC a été comparable à celle observée avec l EPO sans effet additif. Ces données suggèrent que l effet anti-œdémateux cérébral de l EPO après TC diffus pourrait être médié par l inhibition précoce de la phosphorylation Erk.Our team found that erythropoietin (EPO) significantly reduced the development of brain edema in a rat model of diffuse traumatic brain injury (TBI). This reduction was associated with early changes of brain phosphorylation of two protein kinases, Erk and Akt. In this study, we investigated the possible causal link between phosphorylation changes and brain edema. To specifically inhibit Erk and Akt, we developed a model with intracerebroventricular injection by using intracerebral injection of Indian ink and optical microscopy visualization. The ERK-1/-2 inhibitor, U0126, or the Akt inhibitor, LY294002 were administered before traumatic brain injury. EPO (5,000 IU/kg body weight) was intravenously administrated 30 mins after injury brain. Phosphorylation of Erk and Akt was measured 1 hour after insult (H1) and brain water content were measured 2 hours (H2) after insult by gravimetric technique. The inhibition of Akt pathway did not result in significant differences in brain water contain (BWC); the addition of post injury treatment with EPO significantly decreased BWC. Inhibition of Erk reduced BWC, no further reduction of brain edema was found when Erk was combined with EPO treatment. These results suggest that the anti-edematous effect of EPO after diffuse TBI could be mediated through an early inhibition of ERK phosphorylation.GRENOBLE1-BU Médecine pharm. (385162101) / SudocSudocFranceF