Developpement d'un modèle d'étude de la toxicité du peptide amyloïde Ab chez la levure saccharomyces cerevisiae

Abstract

La Maladie d Alzheimer (MA) est un des challenges sanitaires les plus importants du XXIème siècle. En effet, elle touche 35,6 millions de personnes en 2010, et en atteindra probablement quatre fois plus en 2050.Cependant, peu d éléments sont à ce jour connus concernant les mécanismes de toxicité de cette maladie. Il semble néanmoins acquis que l agrégation du peptide amyloïde Ab est l élément déclenchant une cascade d événements cellulaires aboutissant à trois types de lésions : les dégénérescences neurofibrillaires, les plaques amyloïdes et une atrophie corticale, révélatrice d une importante mort neuronale.Différents modèles transgéniques d étude de la toxicité du peptide Ab ont été créés au cours des vingt dernières années. Cependant, aucun modèle de levure n a encore vu le jour, alors que cet organisme est utilisé depuis de nombreuses années pour l étude des protéines amyloïdes.J ai donc cherché à créer ce modèle de toxicité au cours de ma thèse. L adressage d une protéine de fusion Ab-GFP à la voie de sécrétion permet de rendre son expression toxique chez la levure. J ai démontré que le trafic intracellulaire était un élément important pour la génération d espèces toxiques. Les orthologues de PICALM, facteur de prédisposition à la MA, sont impliqués dans la toxicité, montrant une conservation des mécanismes de toxicité avec l Homme. Les constructions semblent avoir la capacité de traverser les membranes afin d atteindre des cibles cellulaires comme la mitochondrie.Le modèle ainsi construit nous permettra de mettre en place une étude de la relation entre la structure et la toxicité du peptide Ab et mieux comprendre les mécanismes cellulaires régissant la MA.Alzheimer s Disease (AD) is one of the most important sanitary challenges of the XXIst century. Indeed, 35.6 million people are affected in 2010, and there will be probably four times more in 2050. However, little is known about the mechanisms of toxicity of this disease. Nevertheless, it seems that aggregation of the Ab peptide is the triggering factor of a cascade of cellular events that leads to three characteristic lesions: neurofibrillary tangles, amyloid plaques and a cortical atrophy, revealing an important neuronal death. Different transgenic models for the study of the Ab peptide toxicity have been created during the past twenty years. However, no yeast model has yet seen the light of day, whereas this organism is used for several years to study amyloid proteins.Therefore I worked to create this model during my thesis. Addressing an Ab-GFP fusion to the secretory pathway enable this construction to become toxic in yeast. I proved intracellular pathways are important for generation of toxic species. PICALM orthologs, an AD predisposing factor, are involved in toxicity, showing conservation in the mechanisms of toxicity between yeast and man. The constructions seem to be able to cross membranes and reach cytoplasmic targets as mitochondria.Thus, this model will allow us to set a study of the relationship between structure and toxicity of the Ab peptide and better understand the cellular mechanisms governing ADBORDEAUX2-Bib. électronique (335229905) / SudocSudocFranceF