Etude in vitro et in vivo des propriétés anti-inflammatoires, anti-infectieuses et épithéliotrophiques de la membrane amniotique sur la surface oculaire

Abstract

Nous avons étudié ses propriétés anti-inflammatoires (AI), anti-infectieuses et épitheliotrophiques de la Membrane Amniotique (MA) sur la surface oculaire (SO). Nous avons évalué les effets de la greffe de MA (GMA) dans les abcès cornéens sévères. Dans une étude prospective sur 12 patients, nous avons montré que la GMA soulageait la douleur, diminuait l inflammation de la surface oculaire (ISO), prévenait les perforations cornéennes et améliorait l épithélialisation. Nous avons étudié les effets AI de la GMA, lors d une étude prospective, chez 24 patients présentant des brulures oculaires graves, après une GMA à la phase aigue de la maladie. Nous avons évalué l ISO, en mesurant les variations d HLA-DR par les empreintes conjonctivales, couplées à la cytométrie de flux; 2 à 24 mois après la brûlure. Nous avons étudié la corrélation entre l expression d HLA-DR et les modifications anatomo-pathologiques de la conjonctive exprimées par le score de Nelson. La GMA aida à diminuer l ISO. On observa une corrélation entre score de Nelson et expression d HLA-DR jusqu à 6 mois après la brûlure. L expression d HLA-DR demeurait up-régulée jusqu à 18 mois. Le contenu de la MA en facteur de croissance épidermique (EGF) joue un rôle clé dans l expansion ex vivo de progéniteurs limbiques. Nous avons étudié dans 15 MA, fraiches et congelées, les variations inter et intra-donneuses (entre les différentes régions de la MA) de l expression génique et du contenu protéique en EGF (respectivement par la PCR en temps réel et dosage ELISA). Le contenu en EGF varie considérablement entre donneuses et entre chaque région. Il sera ensuite affectées par la préparation et la conservation des MA.We investigated the anti-inflammatory, anti-infective and epitheliotrophic properties of the Amniotic Membrane (AM) on the ocular surface (OS). We evaluated the effect of AM transplantation (AMT) in severe bacterial keratitis. In a prospective study on 12 patients, we showed that AMT provided pain relief, lowered OS inflammation (OSI), prevented corneal perforation and improved epithelial healing. We studied the anti-inflammatory effects of AMT in patients with severe ocular burns; in a prospective study on 24 patients, who underwent AMT during the acute phase of the disease. We assessed the OSI, through the variations of HLA-DR; measured with impression cytology, combined with flow cytometry; from 2 to 24 months after the burns. We studied the correlation between HLA-DR expression variations and the anatomo-pathological modifications of the OS; assessed with the Nelson s classification. AMT helped in lowering OSI. A correlation between HLA-DR expression and Nelson s score was observed up to 6 months after the burn. HLA-DR expression remained up-regulated up to 18 months. Epidermal Growth Factor (EGF) content is playing a key role in supporting limbal progenitors expansion, ex vivo on the AM. We studied inter and intra-donor (between different regions of the AM) variations of the EGF gene expression and protein content (by real-time polymerase chain reaction and ELISA, respectively) in 15 AM, both fresh and preserved. There was a considerable variation of the EGF content between and within donors. This was further affected by handling and preservation of the AM.AMIENS-BU Santé (800212102) / SudocSudocFranceF