Immunité anti-Trichinella (étude de l'activation mastocytaire par les antigènes parasitaires et application à une stratégie vaccinale)

Abstract

L épithélium intestinal est la porte d entrée de Trichinella lors de l invasion de l hôte. Parmi les cellules immunitaires du GALT (gut associated lymphoid tissue), les mastocytes jouent un rôle clé dans la phase innée d expulsion de Trichinella. Cependant leur rôle dans l initiation de la réponse spécifique reste mal connu. Dans ce cadre, différents antigènes du stade intestinal du cycle de T. spiralis ont été produits. L analyse in vitro de la stimulation par l antigène 411 de mastocytes murins génère la libération du TNF-a et de l histamine. De plus, ces cellules montrent une régulation positive d ARNm pour des molécules de co-stimulation, des molécules du CMH I et II et des cytokines (IL-1a, IL-1b, CXCL-1, CCL-5). Ces résultats indiquent que les mastocytes stimulés pourraient communiquer avec les lymphocytes T. Afin de mieux comprendre le rôle des mastocytes et de 411 dans la protection, des études in vivo d efficacité vaccinale après test d épreuve ont été effectuées avec évaluation de la charge parasitaire musculaire finale. Les souris vaccinées avec l antigène 411, présentent un taux de protection d environ 25 % par rapport aux souris non vaccinées. Lorsque ce même vaccin contient l adjuvant Montanide ISA 70 VG, ce taux augmente à 40 %. Le suivi sérologique démontre en outre, une bonne réponse anticorps IgG1 et IgG2a amplifiée en présence d adjuvant. L analyse des coupes de tissus intestinaux n a pas révélé de mastocytose après vaccination, comme cela peut être observé lors d une infection naturelle. Ces résultats montrent un rôle protecteur de 411 dans un vaccin anti-Trichinella avec induction d une fonction immunostimulante modérée des mastocytesThe intestinal epithelium is the gateway of Trichinella during host infection. Among immune cells of the gut associated lymphoid tissue, mast cells play a key role in the expulsion of T. spiralis. However, mast cells roles in the initiation of the specific immune response against T. spiralis remains poorly understood. Here, different antigens of the intestinal stage of T. spiralis were generated. Murine bone marrow mast cells (mBMMC) stimulated with antigen 411 induced the release of TNF- a and histamine. Moreover, stimulated mBMMC showed an upregulation of mRNA for several costimulatory molecules, MHC class I and II molecules and cytokines (IL-1a, IL-1b, CXCL-1, CCL-5). These results indicate that stimulated mast cells could directly communicate with T cells. In vivo studies based on vaccine trials with challenge, were also performed to explore the role played by mast cells and antigen 411 in protection. Mice vaccinated with antigen 411 exhibited a protection rate of 25 % compared with unvaccinated mice. When vaccine containing 411 and the adjuvant Montanide ISA 70 VG were tested, the protection rate reached 40%. Serological analysis demonstrates a good IgG1 and IgG2a response amplified in adjuvanted group. Intestinal tissue sections did not show mastocytosis after vaccination, as observed in a natural infection. These results demonstrated that 411 antigen induced both a protective role in anti-Trichinella vaccine and a moderate immunostimulation of mast cells in vivoPARIS-BIUSJ-Biologie recherche (751052107) / SudocSudocFranceF