Le Noc, P.

Le-noc, D.

Ravisse, P.

Rickenbach, André

Horizon / Pleins textes

40 2 B C L L E T I S  DE LA S O C I p r B  D E  P.4TllOLOGIE EXOTIQUE 
La rareté des cas de chromomycosc décrits jusqu’à ce jour en Afrique 
équatoriale semble indiquer que la u prévalence )I réelle de cette infection 
est très sous-estimée. Ceci tient peut-être à la méconnaissance de la morpho- 
logie des lésions cliniques par les medecins traitants, ou plus sûrement à leur 
manque d’informations concernant les techniques de conservation et  d’expé- 
dition des prélèvements Iliopsiques, le diagnostic sérologique ne pouvant &tre 
réalisé actucllemeiit en dehors de laboratoires très spécialisés. 
Pourtant ces techniques siniples peu\*ent &tre aisément réalisées même dans 
des conditions précaires : chaque biopsie, sufisamment large et profonde, 
pratiquée en périphérie des lisions récentes doit &tre répartie à la fois : 
- dans un tuhe d’ean ph?-siologiqrie glycérinéc sterile pour Ia culture, 
- dans un tubc contenant un fixateur (Bouin ou plus simplcnient formol 
h IO O/O dans l’eau physiologique) pour I‘4tude histologique. 
Le diagnostic de certitude ainsi ol)tenu permettra alors au médecin 
d‘instituer un traitement qui est, aujourd’hui, eficace ( j  fluorocytosine à 
poursuivre pendant plusieurs mois) et sans lequel l’infection s’aggravera 
progressivement. 
BIBLIOGRAPHIE 
I .  BRI-GOO (R.) et DESTOMBES (P.). - Epidémiologie de la chromoblastomycose 
humaine. Bulletin de l‘Institut Pasteur, 1976, 74, 219-243. 
2. DESTOXIJIX (P.), R ~ v i s s e  (P.) et KAZIXOFF (O.). - Bilan des mycoses profondes 
établi en vingt années d’histopathologie à l’Institut Pasteur de Brazzaville. 
Bulletin de la Société de Pathologie Exotique, 1970, 63 (3), 31 5-324. 
ENQU~TE ~BROLOGIQUE 
SUR LES RICKETTSIOSES ANIMA&ES AU CAMEROUN (*) 
I. Bvaluation du seuil de positivité et de la spécificité 
de la réaction de micro-agglutination en fonction de la taille des animaux. 
Par P. LE SOC, A. RICICES\’BhCII, P. RAVISSE e t  D. LE SOC (”) 
Si le rôle des niammilères sauvages dans I’épidéniiologie des rickettsioses 
a déjà é té  démontré dans un certain nombre de pays (I), les enqubtes africaines 
cherchant à détermiiier les espèces animales jouant un r81e possible de réservoir 
de virus sont moins nombreuses, et  en dehors de I’Egypte ( 5 , 6 )  ou du Kenya (4) 
où des études poussées ont été faites, elles ne fournissent souvent que des rensei- 
gnements Iragmentaires. 
(*) Travail rlu L~hnratoire de JIicrobiologie dii Centre Universitaire des Sciences de la 
Salit6 et de l’Institut Pasteur du Cameroun [Directeur : Dr. 1’. RAVISSE). - 1”) SGanco du II octobre 1977. 
BULLETIN D E  L A  SOCII?Tl? D E  P.4TIIOLOCIE EXOTIQUE 403 
Dans le cadre des enqu6tes immunologiqucs pratiquées par l’Institut Pasteur 
du Camerorin sur les arboviroses, de nomhreux sérums de mammifères sauvages 
sont prélevés e t  examinés par le Service de virologie de cet Institut. I1 nous a 
paru in tércssant d’utiliser égaiement ces sérums pour une enquête sur les rickctt- 
sioses animalcs au Cameroun, afin d’essayer de préciser le réservoir animal des 
deux principales rickettsioses humaines rencontrées dans ce pays (Typhus niurin 
et Fièvre boutonneuse) et  de dépister I’éventuelle circulation d’autres espèces 
rickettsienncs. 
La Lechnique de Imse de cette enqubte sérologique a été Ia réaction de micro- 
agglutination, mais comme cette enquête a intéressé des mammilères de taille 
variahle (dcj singcs a u s  petits muridés sauvages), il nous a scmlilé indispcnsable 
d’évaliter, dans une étude préliminaire, les titres de positivité en micro-aggluti- 
nation h consirlitrcr comme significatifs selon la taille des animaus, et de con- 
tralei la spécificité de cette réaction en testant nn certain nomlire de sérums 
positifs par réaction de fixation du compldinent et d’immunofluorcscence indi- 
recte, ceci devant nous permettre ultérieurement une interprétation correcte 
des résultats de notre enqucte. 
. 
I 
603 sérums ont été étudiés, 149 provenant de mammifères de taille moyenne 
(singes, lémuriens, petites antilopes), 454 provenant de petits mammifères (ron- 
geurs, écureuils, chauve-souris...). 
Les animaux, capturés par les equipes du service d’Entomologie de 
l’O. R. S. T. O. M., ont été saignés sur place. Les sérums, immédiatement décantés, 
ont été conservés au  froid jusqu’i leur retour à l’Institut Pasteur, les tournées 
de capture pouvant durer plusieurs ‘jours. 
“Ces sérums ont  été étudiés de la manière suivante : 
- Par micro-agglutination sur lame (M. A.) : 
Les antigènes utilisés (R. protvazeki, R. mooseri, R. conori et R. burneti) 
. sont les antigènes commercialisés par Institut Pasteur Production (Paris), 
et  la technique suivie est celle qui est préconisée pour l’emploi de ces antigènes. 
Les sérums déeomplénicntés ont été testés en réaction qualitative d’abord 
(criblage au 1/20), puis en réaction quantitative (1/40 à 1/j20) pour les sérums 
trouvés positifs au criblage. 
- Par  réaction de f ia t ion  du complément (R.’F. C.) : 
Un certain nombre de sérums positifs cn M. A. ont été testés, lorsque leur 
qualité le permettait, en R. F. C. vis-i-vis de l’antigène pour lequel avait été 
obtenue une réponse. Les antigènes utilisés sont les antigènes solubles pour 
R. F. C. (antigène Protvaze~i-ilIooseri, antigène Conori et antigène Buineli) 
commercialisés par Institut Pasteur Production. Les réactions ont été pratiquées 
en microniéthode, sur plaques h usage unique, par Ja technique de Kolmer à 
chaud, Ics réactifs étant distribués à la micropipette dc Coolie. Les passages 1 
370 ont été effectués au bain-marie. 
, 
404 EULLETLV D E  L A  SOCI&T8 DE PATHOLOGIE EXoTIQUE 
- Par réaction d’inznzciizolluoresceizce iizdirecte (I. F. I.) : 
Cette réaction a été pratiquée sur un certain nomlire de sérums dc rats e t  
de singes trourés positifs en M. A .  
- Les frottis de rickettsies (R. noo ose ri, R. conori, R. borneti) ont d t é  préparés 
par apposition sur lame de fragments de mem1)ranes \-itellines riches en riclretLsics, 
fournies par le serrice des Riclrettsies de l’Institut Pasteiir de Paris (Dr C.wPonI) 
et  conservées congelées i - ;oOC. Les frottis, fixés h l’acétone, ont été  conservés 
i~ la mème température. 
- Les conjuguks utilises ont &ti. les globulines de lapin (antig!ohulincs de 
rat ou  antigloliulines de singe) marqiiécs à I’isothiocyanate de fluorescéine 
e t  commercialisées par Institut Pasteur Production. La ciilution clcs conjugués 
a été laiLe a u  I/IOO. 
- Les sérums ont été testés à trois dilutions (I/~o, 1/40: I/SO). Quelques 
réactions d’I. F. I. xis-i-vis de R. proci-azeki ont 618 effcctuérs par le Service 
des Riclcettsioses de l’Institut Pasteur de Paris. 
R ~ S U L T A T S  
I. - R6sultckt des inicro-ccgålutinatioizs q~ic~/ilnt¿ves. 
Le tableau I indique le résultat de  celles-ci : 
Sur 60; sérums testés, 469 (77, j O/O)  n’ont agglutiiié aucun antigène ricliettsicn 
alors que 134 ( 2 2 , ~  O / O )  ont donné une réponse en criblage. Parnii ceux-ci, 
114 donnaient une réponse pour un seul antigène, I O  donnaient une réponse pour 
2 antigènes. 
L’étude ultbrieure des sérums retcnus après criblage a 816 faite en 2 fractioris, 
le lot des sérums répondant Q u n  seul antigbne (124) et  le tot des sérums répon- 
dant à deus  antigènes (IO). 
 TABLE.^^ I 
Résultats d u  criblrqe OLL 1/20. 
- 
I 
SomLrc 
de shrums 
tes16s 
3Inmni i l i . r~~  dc taille moyenne . 149 
?hnmili.rcs dc pct i tc  taille . . I- 4 j4  
Total . . . . . . . .[ 603 
S6rnms rCpondent BU 1/20 h 
SBrurns 
n6gntifs 
I an l ighe  I 2 nnligèncs I Total 
I------- I--- 
2. - Resultats de lu nzicro-riS~luLiiiatioii qrianlitalioe des skums 
agglufimznt un seul unligine et éculuution de Ia réponse. 
Les r6sultats de la niicro-agglutiriatioii quantitative des 124 sdrums, olJtenus 
pour chaque type d‘anligèrie, sont clétaill6s an tableau l i .  
BULLETIN DE L A  SOCIXTI? DE PM7IIOLOGW ESOTIQUE 4% 
Chez I P S  ina1nn2ifii-e~ de  taille moyenne : les titres habituellement considérés 
comme significatifs en micro-agglutiiiatioii sont ceus retcnus chez l’homme, soit 
I /;?O pour R. protvazeki, I /160 pour R. mooseri et R. conori, I / I ~ O  pour R. burneti. 
Dans nolre enquête, aucun sérum de ce groupe animal n’agglutinait R. protvazeki 
au-delà du I /40, e t  devant ce titre trop faible, l’étudc de ces sérums .n’a pas été 
poursuivie. Par contre, trois des quatre sérums agglutinant R. rnooseri et les 
cinq sérnnis agglutinant R. conori b partir du 1/80 (titre juste inrérieur au titre 
considéré comme valable), le sérum agglutinant R. burneti au 1/70 ont été 
contr61és en li. F. C. et  I. F. 1. (talileau III) .  
Ce contr6le montre que la micro-;igrglutination peut effectivement ètre consi- 
dérée comme positive et  spécifique d‘unc atteinte rickettsicnne, dans ce groupe 
animal, à partir du  1/160 pour I?. nzooseri et R. conori, et h partir du 1/20 pour 
R. burneti. C’est i partir de ces titres qu’on observe des réponses ‘positives en 
R. I;. C. o11 I. F. I. confirmant la micro-aggrlutination. 
Clic; les pctits inammifères : les titres de AI. A. pouvant etrc considdrés comme 
significatifs étant moins bien dhfinis, un ccrtain nomlire dc sérums agglutinant 
:i partir du 1/20 I’un ou l‘autre des antigènes rickettsiens a également été contròlé 
par (l’autres tcchniques sfrologiques : douze sérums de rats ont ainsi été étudids 
en R. F. C. et I. F. I. (tableau IV), cinquante-trois sérums d’autres petits mammi- 
ihres en R. F. C. uniqucment (tableau I’), soit 6 j  des gj sérums positiFS au  cri- 
hlage au 1/10. Les autres sérums ont  clù ètre éliminés pour quantité insuffisante, 
héniolyse o11 pouvoir anticompldnicntairc. 
Les talileaux IV et  V montrent que la M. A. peut ètre considérée chez les 
petits mammifères comme positive et  spécifique cl’unc atteinte rickcttsienne 
à partir du 1/40 pour R. mooseri et R. conori ; B partir de ces titres, on observe 
chez les rats des réactions positives en R. F. C. et I. F. I. confirmant la A l .  A., 
et des rfponses en R. F. C. chez les autres petits mammifères. Quelques sérums 
positifs eri BI. A. au 1/40 ou 1/80 restent négatifs en R. F. C., niais il peut s’agir 
dans ces cas d’infections anciennes. On soit en effet que la M. A. peut rester 
selile positive dans les infections anciennes ou même dans les infections chroniques 
ou inapparentes ( 2 ) .  
Le seul sérum agglntinant R. burneti au  1/70 était également positic en R. F. C. 
Pour les z sérums agglutinant R. prowazeki seul le sérum positif au 1l16o pré- 
sentait également des anticorps déviant le complément. 
. 
3. - Résultats de la nricro-c~~glutiizntion quantitative des sérun~s 
agglutinant deux antigènes et évaltiatiora de la réponse. 
Des réponses à deux antigènes ric1;ettsicns ont été observées dans I O  sdrtms 
provenant de petits mamniifbres. Des contrfilcs en réaction de fisation du com- 
pl6mellt ont égalemerit bté pratiqués sur ces sérums agglutinant chaque antigène 
au nioins a u  1/30 (ta1,leai.i VI). 
Ce tahleau montrc quc pour ICS sérums de pet,it.s mammifères répondant à 
d e u s  ant igèiies, on rctrouvc le mcnic titre sigrnificalil qlle précédemment pour 
N. riLooseri ct. R. conori ( I / ~ o ) .  Pour R. protru:aki,- c’est seulcmcnt i partir ries 
reactions d e  micro-aggrlutiiiatioii positives 11 I /SO qu‘on oliserve des réactions 
(le lisatiori du complément positives. C‘est donc ce chiffre que nous rctirnclroris, 
par priidence, conimc titrc significatif pour cet ant.igènc:. . 
. -  . 
a 
I 
I 
I- - * 
Contrùle cn R. F. C. C0ntr6lc C I 1  I. F. I. 
hniigi.no RCsultats en >I. A. 
Somhrc I Xomhrc I 
dc serums I Titrc de serums Titre 
406 BULLETI-V DE LA SOCIPYX? DE PXrIIOLOCIE EXOTIQUE 
R. mooseri 
t--- R. conori 
TABLEAU 
Résultats de la 
O 1-1 3 serums + i 1/20 7 serums + Q 1/40 
I serum + Q 1/90 
112 6 118 5 
I serum + h 1/80 I I  1 18 I4 : -1+i ¡ I  
TABLEAU I I I  
Résiiltnts d e  la R. F. C. et de I'l. F .  I .  chez les JIaniini/ërcs 
de taille iiioyenne. 
i Contrùls c n  R. F. C. Contròlc en I. 1:. I .  I ~111tig&nC R~sol i ; i ia  t.11 JI. A. Snmhrc Sornlirc de serums Titre de serums T i 1 r . C  
positirs 
I- 
R. aioosrri 
1/20 i 1/80 
I sêrum + R I / I& I 
I sêrum + A 1/80 
4 sérums 4- 6 11160 3 1 r/8 i 1/16 
O I  R. conori 
Parmi les neuf sérums présentant une d o u l h  réponse à des titres significa- 
tifs, uti répond à clcs t a u s  identiques en BI. A. et R. F. C. pour  R. protvazeki 
et R. mooseri. Du fait des réactions croisées existant entre ces deus espèces, 
et  du  fait de l'utilisation en II. F. C. d'un antighne coiriinun, la niponse de ce 
sérum doit plutBt dtrc rapportée, dans le contexte épidémiologique de notre 
enqudte, h une infectiotl uniquement h R. mooseri. 
Les huit autres cloul~les réponses seront retenues dans les résultats d'cnscinl~le 
et disciltées dans la secoiide partic de ce travail. 
Cette étude pr6Iiiiiinait-e stir I'é\-aIua.tioii du seuil de positivité de Ia iiiicro- 
agglutiiiatioii et siir I C  contri,Ie de spécificité du cette réaction cI111z Ivs n i : i t i i i i i i -  
I I  
N. í l .  qucmtitutive. 
I R .  mooseri I R. conori 1 R. birrneli I I  
'rABLEAG IV 
Re'sultats de la R. F .  C. et  de I'I.  F.  I .  sur les se'runis de ruts 
II 
l! I I I I i II 
408 BULLETIN D E  L A  SOCIeTl? DE PATIIOLOGIE Ic.YOTlqUl3 
T . \ B L e . \ c  v 
Résultats de la R .  F.  C.  sur les sériirris des autres p ~ t i t ~  marririiirhs. 
i s h i m s  + B 1/30 
s si.n,ms + Q 1/40 
O 
6 
5 
7 
I 
I /+  h 1/16 
114 i, 1/16 
g sPrun,s + p 1/50 
7 si tn~ns + il 1/160 
Il R. 
ll- R. birrneli I sfrirm + i 1/20 1 I I4 
TABLEAU \'I 
Titre e n  -11. A.  et R. F .  C. des sériarris aggliitinan/, i1i~ic.z wiiigèrles. 
R. prowzeki I r ) .  R. inonsrri [ a )  I 1/80 
12. prowz;c/ri [ I ) ,  R .  conori (2) I 140 
1/40 
6 1/80 
1/80 
1/160 
il160 
Tiirc Titre 
I 
en R. F. C. CII 31. A. 
Pour neur sérums agglutinant deux antigènes différents, la spécificité dcs 
tleiis lypcs d'anticorps devra être discutée dans le conteste général des résultats 
de l'enquête: du fait de la prirsence possible de coagglittininrs csntre crrtairies 
c~sp8ces de rickettsies. 
Par rapport ailx résultats di t  crihlage ail  1/20 (tal)leatl I )  ct co~npte  tenu des 
409 BULLETIN DE L A  SOCIL?l'L? D E  PATIIOLOGIE E.XOTIQUE 
~ 
titres que nous considérons comme significatifs, les résultats globaux de notre 
enquête s'établissent de la façon suivante : 
- Sur I49 sérums de mammifères de taille moyenne, 7 répondent h un anti- 
gène rickettsien. 
-Sur 454 sérums de petits mammifères, 65 répondent à un antigène, 
S à deux antigènes rickettsiens. 
L'interprétation détaillée de ces résultats sera effectuk dans la seconde 
partie dc ce travail. 
I. CAPPOST (M.). - I?pidemioIo&c des Ricltettsioses. Cak. rricd. vet., 191 j, 44, 47-70. 
3.  apros si (AI.). - InterprktaZon dcs rQponses skrologiques ilans les riclwttsioscs. 
N e d .  Trop., 1969, 29, jo4-jo7. 
5.  CAPPOSI (AI.). - Applications de la techniqiie d'immunofluorl~sc.ence au diagnostic 
des rickettsioses. d r c h .  Inst. Pnsleiir d'Algérie, 1964, 42, j2- jg. 
4. HEISCII (R. B.), GRAINCER (W. E.), I ~ A R W E Y  (A. E.), LISTETI (G.). - Feral aspects 
of rickettsial infections in Kenya. Tramctc¿ion of Ure Roy. Soc. Trop. Merl 
and Hyg., 1962, 5 6 ,  172-286. 
j. I-Ioocs.rna,\r. (FI.), I<AISER ( A I .  N.), OiisxisET; (R. A.), OSUOIIX (D. J.), HELIIY (I.), 
GABER (S.). - Hyalomma (I-Iyalommina) r)lipicepholnitlrs Neumann (Ixo- 
doidea : Ixodidae): its identity, hosts and ecology, and I?. conori, R. protwzeki 
and C. biwrieli infections in rodent hosts in Egypt. J .  d,fed. En¿., 1967, 4, 391- 
400. 
Wacrrr ATALLA. - Evidence for estrahuman epidemic typhus in the wild 
animals of Egypt. J .  IIyg. Epidern. illicrobiol. Irizinunol., 1968, 12, 226-231. 
6. ORSMBEE (R. ty.), HOOGSTRAAL (FI.), LABIB B O T R O U S  (y.), 1.IILDEBRASDT (P.), 
Discussion. 
P. GIROUD. - Depuis de très nombreuses années, nous nous étions rendu 
compte expérimentalement que le lapin répondait i des taux très importants 
sur Ics soucl~es les plus diverses montrant les rapports des différentes rickettsies 
entre elles. 
Par contre, le cobaye, le mérion, la souris, répondaient IC plus souvent sur 
une souche e t  à des t a u s  peu éleves. Si bien que le diagnqstic du type de l'infec- 
tion &tait mieux fait sur la souris que sur des animaux plus grands. 
Ayant envoyé en IgjO i P~LISSIER les rdsultats des lapins faits avec la souche 
de ßrazzaville (canin Peslin), celui-ci avait ccjnclu que cettc souche était la 
souche de fièvre rouge congolaise e t  noli une fièvre boutonneuse comme nous le 
pensions. I1 ignorait que le lapin comme les animaus dc grande taille avait 
des anticorps très étendus lors de leur infection et  que le typage devait être 
réalis6 sur de petits animaux, ce qu'ont depuis confirmé les essais d'immuno- 
fluorescence que j'avais demandés i CAPPONI. 
Bull. Soc. Path. Ex., no 4, 1977. 27 


Enquête sérologique sur les rickettsioses animales au Cameroun. I : Evaluation du seuil de positivité et de la spécificité de la réaction de micro-agglutination en fonction de la taille des animaux

Enquête sérologique sur les rickettsioses animales au Cameroun. I : Evaluation du seuil de positivité et de la spécificité de la réaction de micro-agglutination en fonction de la taille des animaux

Abstract

Similar works

Full text

Available Versions

Horizon / Pleins textes