Brenière, Simone Frédérique

Tibayrenc, Michel

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Activité 
glutamate deshydrogénase Nadp’ 
d’une fraction 
antigénique immunogénique 
de Trypnnosoma cruai (l) 
Frédérique BRENIÈRE @), Michel TIBAYRENC (3) 
Les a.uteu.rs mettent en évidence une forte a,ctivité GDH Nadp+ chez un arc cathodique précipitad (immu- 
nrrodect,roph.orèse) de Trypanosoma cmzi, réagissa.nt avec les sérums de certain pcltielats chagasi~tces chroniques. 
Mots-clés : Trgpa.nosoma cruzi - Glutamate deshydrogénase Nadpf - Antigène cat,hodique immuno- 
gkique - Immunoélectrophorèse. 
Summary 
A GLTJTAMATE DESHPDROGENBSE NADP+ ACTIVITY IN AN ANTIGENIC IMMUNOGENICZ FRACTION OF TRY- 
PANOSOMA CRUZI. The authors show a stron.g GDH Nnclp-/- actiuity in cc precipiting cathodic antigen (immu- 
noelectrophoresis) of Trypanosoma cruzi, rvhich reacts with the sera, of sonze chron.ic cha.gasic patients. 
rcey woras : Trypanosoma cruzi - Glutamate deshydrogenase Nadp+ - Cat,hodic immunogenic antigen - 
Immunoelectrophoresis. 
Introduction 
Dans un travail récent (Tibayrenc, 1952), nous 
avions émis l’hypothèse que l’enzyme glutamate 
deshydrogénase Nadp+ de Trypa,nosoma, cru.& 
était susceptible de présenter des propriétés anti- 
géniques intéressantes, et ce pour les raisons sui- 
vantes : 
- très forte act.ivité (bien visible en klectropho- 
rèse sur acétate de cellulose) ; 
- génétiquement monomorphe chez toutes les 
souches de T. cruzi, et donc ne semblant pas pré- 
senter de variations de structure d’une souche h 
l’autre (Tibayrenc et ccl., 1982) ; 
- fort poids moléculaire (Walter et Ebert,, 1979). 
Des sérums de patients chagasiques testés en 
immunoélectrophorèse contre un antigène de for- 
mes épimastigotes révèlent de nombreux arcs de 
précipitation (Brenière, 1982). Dans cette étude, 
nous montrons qu’un arc cathodique présente une 
forte activité GDH Nadp+. Cet arc cathodique 
correspond à un antigène immunogénique puisqu’il 
est mis en évidence par des anticorps présents dans 
les sérums de certains patients chagasiques. 
(1) Étude réalisée dans le cadre de l'accord signé entre l'Institut bolivien de biologie d'altitude (IBBA) etl’O.R.S.T.0.M. 
(2) IBBA, Embajada de Francis, Casilla. 824, La Paz, Boliuia. 
(3) Entomologiste mkdical O.R.S.T.O.M., IBBA, même adresse. 
Cah. O.R.S.T.O.M., sh. Ent. méd. et Pwasitol., vol. XXI, no 1, $983 : 53-55 53 
F. Hrettière, M. Tibayretac 
Matériel et méthodes 
La préparation de I’antigène est. indiquée dans 
Brer&w (1982). Cependant., en vue de respecter 
l’activité enzymatique, l’ant.igène n’a pas été passé 
à la S-press, rt. a été conservé à -7OOC jusqu’8 
emploi. De plus. il a ét.é concentré trois fois sur 
crllulr hmison niontbe d’unr membrane filtrante 
Dia& 1.W 10. 
L’i~n~rn.lnoGlcc,tropllorèsr a été conduite selon 
la mkthodc décrite par Afchain (1976), avec les 
modifications suivantes : migration réduite à 1 Ii 30 
sui\-ie d’une diifusion à +4’JC pendant 45 h ; 
IilVa@ drs plaques pendant une journée en clian- 
grant trois fois le hab. 
La révtlation enzymatique a utilisP la solu- 
tion décrite par Tihayrrnc et al. (1953), en remyln- 
\;ant l’agarose ii 1,‘L Oie par dr l’eau dkillée. En vue 
d’éliminer des actis-itk non spkifiques, les plaques 
ont ét.4 t.est.ées a\ w la rrvkne solutkm diminu4e du 
R1.I1:~5tIXt splcificp~e de l’enzyme (acide glutamique). 
Résultats et discussion 
Parmi les 1 C.i strums de patient.s à sérologie 
chagasiqI~e positi\-e (Brénikrr,. 1982), 2 ont. pré- 
senté en inlruunoelectrophorese un arc de précipi- 
tation cat.hodique. Cet. arc s’est coloré en quelques 
minut.es avec la réaction spécitique GDH Nadp+ 
(photo 1). La solution de rfkélation sans le substrat, 
spécifique de l’enzyme n’a pas donné de coloration. 
Cet. ant.igène cathodique peut 6tre le composant 
cathodique majeur décrit. par Marcipar et nl. (1982). 
L’antigène rtv& par son act.ivit.6 GDH peut ét.re 
I’enzymr GDH elle-rn~rne, ou un composé antigé- 
nique auql~~l elle serait fortement. liée. 
En ce qui concerne la sptcificitb, tventuelle de 
cet antigène, dans la mesure oil il correspondrait 
à l’enzynbe elle-rr$rne, on peut noter que l’enzyme 
GDH Nadpt- aPIJX%it en klectrophorèse mono- 
morphr citez t,outes les souches de T. crzrzi (Tibay- 
renc c,t tri., 1982), et. différente des GDH Nadp+ de 
Ttypatmsmrm rrmi marenl~eblci, Trypatrosotrm ran- 
pli (Tihavrenc et Le Ray 
Leishttttrt~ i;I 
en préparat.ion) et 
vw.rirtrna (TiL‘renc, données 11011 
publiées). Si l’antigène est. l’enzyme elle-mkne, le 
fait de connaître sa nature hlochimique devrait 
grandement faciliter la purification de cet antigène. 
Cet.te purification peut avoir les applications sui- 
vantes : 
- étude physiologique de cet antigbne dans les 
infections humaines ou animales ; 
- amélioration du diagnostic en phase aiguë ou 
chronique de la maladie : 
- essais vaccinaux. 
: 
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P~OT~ 1. - Immu~~oblrctrophr,rèsr, avec sbrum de pat.ient; 
chagasique chronique, montrant. un arc de précipita- 
ion cathodique coloré par l’activité &tamate deshy- 
twgénase Nadp+ 
Conclusion 
T,e fait d’avoir mont& l’activit,é enzymatique 
d’un ant.igène immunogénique de T. crnzi clevrait 
faciliter la purification de cet antigène : en effet, 
ceci permet d’utiliser la réaction spkifique enzyrne- 
substrat ponr t.ent.er de pwifier cet antigène. Des 
essais sont en cours El 1’IBBA pour chercher d’autres 
act.ivit.és enzymatiyues chez des antigènes de T. 
crmi ou d’autres parasit.es apparentés. 
ilinm~scrit reru UU. Service des Éditions de l’O.R.S.T.O.M., 
le 4 mars 1983. 
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Activité glutamate deshydrogénase Nadp+ d'une fraction antigénique immunogénique de Trypanosoma cruzi

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